大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选
【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中，用某些物理因素或化学因素处理细菌，可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力，不能在基本培养基上生长，必须补充某些物质才能生长，称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤：诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出，缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂，诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落，一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液，分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量，不同微生物的最适处理剂量不同，须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关：诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间，往往......阅读全文
韩国科学技术院利用大肠杆菌生产酪氨酸
韩国教育科学技术部日前宣布，韩国科学技术院(KAIST)生命科学工程系李相烨教授组成功研制出酪氨酸等化学物质,开发出利用新种大肠杆菌生产出治疗忧郁症和痴呆所需物质——酪氨酸的新方法。 该研究组以核糖核酸(RNA)技术，插入制造酪氨酸所需的基因(去除妨碍生产的基因)培养大肠杆菌。培养大肠菌的
香港首现肠出血性大肠杆菌感染个案
早前源自德国的肠出血性大肠杆菌，在欧美多国肆虐，导致数十人死亡。香港日前首次在本地发现O124：H19产志贺毒素大肠杆菌的感染个案。专家指出，该病菌的毒性及杀伤力等同德国爆发的O104型产志贺毒素大肠杆菌。 密切接触者未现病征 香港卫生防护中心8月5日公布称，一名本身有长期病患的71
我国快速建立肠出血性大肠杆菌检测法
建立了覆盖近50种EHEC的诊断血清 近日，我国细菌学科学家、生物技术科学家联手，快速建立肠出血性大肠杆菌O104H4检测方法和鉴定方法，并已开始向全国推广。中国CDC(疾病预防控制中心)传染病预防控制所所长徐建国研究员日前在接受记者专访时称，该方法的建立，为我国各地及时捕捉可能入侵的这一
北京市疾控中心：开始排查新型大肠杆菌病例
针对德国被0104：H4血清型肠出血性大肠杆菌污染的食物造成的食源性疾病暴发事件，市疾控中心昨天表示，为及时确诊相关病例，中心已经制定相关可疑病例的排查方案，检测试剂已发放至各区县疾控中心。 市疾控中心表示，其正在密切关注德国出现的该起新型大肠杆菌事件，日前已出台可疑病例排查方案，要求医疗机构
德国宣布肠出血性大肠杆菌疫情结束
德国负责流行病研究的权威机构罗伯特・科赫研究所26日宣布，5月中旬开始在德国暴发的肠出血性大肠杆菌疫情结束。 该研究所说，最后一个病例发生在3周前的7月4日，此后没有新的病例报告。本次肠出血性大肠杆菌在德国造成50人死亡，3469人感染，德国以外只有一人死亡。不过，
大肠杆菌超标－宜家在23国下架杏仁蛋糕
据外媒报道，因为产品大肠杆菌超标，瑞典家居巨头宜家宣布在23个国家下架杏仁蛋糕。 中国海关宣布，从一家瑞典供应商提供的杏仁蛋糕中检出了超量的大肠杆菌，已销毁了一批次的问题产品，共计1800个蛋糕。 宜家公司周二表示，一家瑞典供应商提供的2批次杏仁蛋糕检出了大肠杆菌，决定将23个国家中
宜家再次陷食品安全风波蛋糕大肠杆菌超标
继上月底自产瑞典肉丸陷入马肉丑闻后，时隔不到半月，瑞典家居用品巨头宜家再次陷入食品安全问题风波。 根据上海检疫局的消息，在最新一轮的食品质量检查中，因大肠杆菌超标，目前已销毁由宜家进口的巧克力杏仁蛋糕总计1.872吨。同时被销毁的还有大量卡夫奶油芝士蛋糕和2.7吨雀巢
除菌香皂并不除菌－大肠杆菌逍遥法外
美国密西根大学公共卫生学院的一个研究小组通过多年的研究发现，使用含有三氯生浓度在0.1—0.45克/100毫升之间的除菌香皂，其实并不比普通香皂更有效地减少细菌和防止传染疾病。这项研究成果发表在8月出版的《临床传染病》（Clinical Infectious Diseases）上。 三氯生是除菌香皂
《科学》：大肠杆菌突变率比预想的高1000倍
葡萄牙科学家近日研究发现，大肠杆菌（Escherichia coli）有益突变发生的频率比之前预想的要高上1000倍之多。这将有助于解释为什么细菌能快速对抗生素产生抵抗性。相关论文发表在8月10日的《科学》杂志上。 领导该项研究的是葡萄牙古尔班基安科学研究所（Gulbenkian Science I
韩国发布近5年的大肠杆菌疫情情况
食品伙伴网讯 5月23日，韩国食品药品安全处（MFDS）发表消息称，因酷暑病原性大肠杆菌等致病菌引起的食物中毒风险在不断增高，食物的保存、管理、摄取方面，需格外注意。 病原性大肠杆菌引起的食物中毒主要发生在高温、潮湿的夏季，近5年来（2012年至2016年）韩国由大肠杆菌引发的感染病例呈逐
阿根廷出口牛肉检出产志贺毒素大肠杆菌
据欧盟食品饲料类快速预警系统（RASFF）消息，近日，阿根廷出口一批次冷冻牛肉检出产志贺毒素大肠杆菌。 RASFF具体通报内容如下：通报时间通报国通报产品编号通报原因销售状态/采取措施通报类型2017-12-11荷兰冷冻牛肉2017.CGK检出大肠杆菌志贺毒素stx2+产品未在市场销售，未批准
研究揭示胃肠道细胞如何与大肠杆菌互动
华盛顿大学医学院研究人员开发出一种新方法，可以培养从病人胃肠道移除的组织中获得的人体细胞，最终可能会帮助科学家开发出个性化疗法，治疗炎症性肠疾病和其他胃肠道疾病。 相关研究发表在Gut杂志上，华盛顿大学医学院研究人员表示，他们已经在短短两个星期内，用47例患者常规内镜检查程序如结肠镜检查中移除
台北抽验即食熟食大肠杆菌－凉面不合格居多
据台湾“中央社”消息，8月11日台北市卫生局公布即食熟食抽验结果，其中有3件“凉面”及1件“夏威夷可丽卷”，经初检跟复检后，大肠杆菌仍超标不合格。 台卫生部门表示，今年5至6月针对市售卤味、面食、凉面、三明治、饭团、便当、汉堡、轻食餐点等100件即食熟食食品进行抽验，抽验商家包括超商、凉面摊
台湾新北市饮料验出大肠杆菌超标7倍
台湾新北市饮料验出大肠杆菌超标7倍。据台湾媒体报道，新北市卫生局抽验市售“手摇杯饮料及冰沙”产品50件，其中田季发爷三重店初验、复验结果均不符规定，大肠杆菌群比标准高出7倍多，将依违反“食品卫生管理条例”处3万元（新台币）罚款。 卫生局除检验卫生标准外，另针对手摇杯饮料加验防腐剂及甜味剂，发
大肠杆菌微生物学检查法
（一）细菌的分离鉴定1.标本：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。2.分离培养与鉴定：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。37℃孵育18～24小时后，观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化
Cell：大肠杆菌竟促进宿主的铁吸收能力
在一项新的研究中，美国科罗拉多大学波德分校的Bin Qi和Min Han证实作为一种导致食物中毒或从宿主身上偷走营养物的病原体而广为人所知的大肠杆菌实际上通过产生一种帮助细胞摄取铁的化合物在促进宿主健康中发挥着关键性作用。这项研究揭示出大肠杆菌让它的宿主受益的机制，这可能最终导致人们开发出最有效
Cell：大肠杆菌竟促进宿主的铁吸收能力
在一项新的研究中，美国科罗拉多大学波德分校的Bin Qi和Min Han证实作为一种导致食物中毒或从宿主身上偷走营养物的病原体而广为人所知的大肠杆菌实际上通过产生一种帮助细胞摄取铁的化合物在促进宿主健康中发挥着关键性作用。这项研究揭示出大肠杆菌让它的宿主受益的机制，这可能最终导致人们开发出最有效
超声波破碎大肠杆菌温度升高解决方法
实验室常用超声波细胞破碎仪来破碎大肠杆菌，用于提取表达外源蛋白等试验，在超声波破碎大肠杆菌过程中常常温度探头测得大肠杆菌菌液中温度逐渐升高，有可能会致使热敏物质失活，该怎么解决呢？今天舜玛仪器来谈谈在超声波细胞破碎仪处理大肠杆菌过程中降低温度的解决措施。超声波细胞破碎仪在处理大肠杆菌过程中，由于超声
冻融对发酵用大肠杆菌甘油保存的影响
摘要:目的:探讨冻融对发酵用大肠杆菌甘油保存的影响.方法:将大肠杆菌用10%的甘油溶液制成菌悬液,分成3组,测定各组菌种的活菌数,同时置-20℃冷冻处理.3组分别被冻融处理1、2、3次.测定冻融处理后、冻存1年及2年各组的活菌数.结果:随着冻融次数的增加,冻融处理后,冻存1年及2年的活菌数均明显降低
以大肠杆菌做生物反应器的好处
大肠杆菌结构简单，易于培养，繁殖快。1.技术比较成熟，已经建立各种载体可以适应各种基因。2.比较容易破壁，收获容易3.产生包涵体纯化容易4.长得比较快，实验室要求的基本过夜就可以了5.培养便宜，培养基比较容易配6.有培育出来的很多菌种，仔细选择的话表达效率会很高7.导入质粒之类的条件已经摸得比较清楚
大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验
实验材料 大肠杆菌菌株色氨酸类似物寡核苷酸引物试剂、试剂盒 结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液仪器、耗材 Luria-Bartani 培养基Microcon 浓缩器实验步骤 下述方法包括：( 1 ) 大肠杆菌在色氨酸类似物中的生长。( 2 ) 含 fW 取代氨基酸的蛋白质的表达和纯化。( 3 ) 对非天
大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的制备实验
实验材料 过表达σ32 的大肠杆菌细胞株试剂、试剂盒 氯霉素氨苄青霉素异丙基硫代-β-D-半乳糖苷利福平LB 培养基SDS 样品缓冲液脱氧胆酸钠仪器、耗材 Oak Ridge 离心管带刻度的聚丙烯锥形离心管Tissue-TearorTM 匀浆器超声破碎器实验步骤 材料与设备过表达σ32 的大肠杆菌细
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
实验方法原理 分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶解的包含体，因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法，还是有许多策略适用于包含体蛋白的溶解。本方案描述的就是这些策
大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验
氨基酸类似物的掺入越来越有用。非天然氨基酸的定点掺入，使得运用化学生物学对特定蛋白质的研究和应用成为可能。但是，非天然氨基酸的整体掺入也检验着蛋白质组和基因编码假定。例如，有机体对非天然氨基酸的适应可能会导致新的基因编码。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
实验方法原理分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶解的包含体，因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法，还是有许多策略适用于包含体蛋白的溶解。本方案描述的就是这些策略
大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的制备实验
实验材料过表达σ32 的大肠杆菌细胞株试剂、试剂盒氯霉素氨苄青霉素异丙基硫代-β-D-半乳糖苷利福平LB 培养基SDS 样品缓冲液脱氧胆酸钠仪器、耗材Oak Ridge 离心管带刻度的聚丙烯锥形离心管Tissue-TearorTM 匀浆器超声破碎器实验步骤材料与设备过表达σ32 的大肠杆菌细胞株〔B
大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
摘要： 下文介绍大肠杆菌感受态细胞的制备和转化. 1、感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后,必须导入特定的宿主(受体)细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化.
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
基本方案 实验方法原理 分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶
大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验
大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入 实验材料 大肠杆菌菌株 色氨酸类似物 寡核苷酸引物
大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
[实验目的]通过本实验，掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的方法和技术[实验原理]细菌处于容易吸收外源DNA 的状态叫感受态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复