大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

氨基酸类似物的掺入越来越有用。非天然氨基酸的定点掺入,使得运用化学生物学对特定蛋白质的研究和应用成为可能。但是,非天然氨基酸的整体掺入也检验着蛋白质组和基因编码假定。例如,有机体对非天然氨基酸的适应可能会导致新的基因编码。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料大肠杆菌菌株色氨酸类似物寡核苷酸引物试剂、试剂盒结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液仪器、耗材Luria-Bartani 培养基Microcon 浓缩器实验步骤下述方法包括:( 1 ) 大肠杆菌在色氨酸类似物中的生长。( 2 ) 含 fW 取代氨基酸的蛋白质的表达和纯化。( 3 ) 对非天然氨基酸进行深入水平的分析。3.1 大肠杆菌在非天然氨基酸(培养基)上的生长色氨酸类似物掺入大肠杆菌是直截了当的。因为色氨酰转移 RNA 合成酶没有编辑结构域,天然氨基酸与类似物的区分只是在结构上。枯草杆菌色氨酰转移 RNA 合成酶可以相对更有效地结......阅读全文

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

实验材料 大肠杆菌菌株色氨酸类似物寡核苷酸引物试剂、试剂盒 结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液仪器、耗材 Luria-Bartani 培养基Microcon 浓缩器实验步骤 下述方法包括:( 1 ) 大肠杆菌在色氨酸类似物中的生长。( 2 ) 含 fW 取代氨基酸的蛋白质的表达和纯化。( 3 ) 对非天

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入             实验材料 大肠杆菌菌株 色氨酸类似物 寡核苷酸引物

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

氨基酸类似物的掺入越来越有用。非天然氨基酸的定点掺入,使得运用化学生物学对特定蛋白质的研究和应用成为可能。但是,非天然氨基酸的整体掺入也检验着蛋白质组和基因编码假定。例如,有机体对非天然氨基酸的适应可能会导致新的基因编码。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实

氨基酸代谢标记实验_辅助方案-TCA沉淀测定标记掺入量

实验材料被标记的细胞悬液(见基本方案或备择方案 1~4)试剂、试剂盒0.1%(m V)BSA/0.02%(m V)NaN310%TCA 溶液冷冻乙醇仪器、耗材连接真空管道的滤过装置2.5 cm 玻璃微纤维滤膜(Whatman GF/C)实验步骤1. 加 10~20 μl 被标记的细胞悬液到 0.1

氨基酸分析仪检测牛乳中掺入的大豆蛋白

方案优势       别利用近红外光谱法、高 效液相色谱法以及聚合酶链式反应等结合化学测定方法或质谱法可以定性定量检测牛乳中的大豆蛋白,但是检测成本较高。本实验使用氨基酸分析仪,利用牛乳和大豆蛋白质的氨基酸组成含量差异对牛乳中掺入的大豆蛋白进行定性定量检测,弥补了现有方法耗时长检测不灵敏的不足

课题实验整体外包

公司介绍       北京致成生物医学科技有限公司成立于2014年4月,注册资金500万元,总部位于北京市经济技术开发区亦庄生物医药园,是集“医研权产销”于一体的综合性生物医药中关村高新技术、国家高新技术,中关村金种子企业等。公司现有全/兼职员工62人,其中硕士及以上学历者57人。核心成员全部出自院

以3HTdR-掺入测定DNA合成实验

实验方法原理用3H -TdR 标记细胞,提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平实验步骤材料无菌处于合适时期的细胞(若使用热的 2mol/L PCA 方法需要细胞生长于玻璃器皿或试管中,若用其他方法,细胞可培养于常规的塑料皿中)3H-TdR ,0.4 MBq /ml (约 10uC i/ml),每毫升培养

蛋白中放射性物质掺入率测定实验

实验方法原理 实验材料 样品试剂、试剂盒 预冷三氯乙酸乙醇乙醚仪器、耗材 Whatman GF-C玻璃纤维膜多功能真空仪(Fisher)20 ml 闪烁瓶闪烁计数器实验步骤 1. 加入 20 μl 预冷的 10% TCA 停止反应,充分混匀,冰浴 10 min 以沉淀蛋白质。2. 将样品点在真空仪中

以3HTdR-掺入测定DNA合成实验

实验方法原理 用3H -TdR 标记细胞,提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平实验步骤 材料无菌处于合适时期的细胞(若使用热的 2mol/L PCA 方法需要细胞生长于玻璃器皿或试管中,若用其他方法,细胞可培养于常规的塑料皿中)3H-TdR ,0.4 MBq /ml (约 10uC i/ml),每毫升

蛋白中放射性物质掺入率测定实验

三氯乙酸沉淀法             实验方法原理 实验材料 样品

以3HTdR-掺入测定DNA合成实验

实验方法原理用3H -TdR 标记细胞,提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平实验步骤 材料 无菌 处于合适时期的细胞(若使用热的 2mol/L PCA 方法需要细胞生长于玻璃器皿或试管中,若用其他方法,细胞可培养于常规的塑料皿中) 3H-TdR ,0.4 MBq /ml (约 10uC i/ml)

以3HTdR-掺入测定DNA合成实验

            实验方法原理 用3H -TdR 标记细胞,提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平 实验步骤 材料 无菌 处于合适时期的细胞(若使用热的 2mol/L PCA

大肠杆菌转化实验

实验方法原理 质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42°C短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料 质粒DNA重组DNA试剂、试剂盒 LB培养基蒸馏水IPTGX-gal氨苄青霉素仪器、耗材 旋涡混

大肠杆菌转化实验

实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料质粒DNA 重组DNA试剂、试剂盒LB培养基 蒸馏水 IPTG X-gal 氨苄青霉素仪器、耗材旋

大肠杆菌转化实验

            实验方法原理 质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。

大肠杆菌转化实验

热击法CaCl2转化法一步法高效率电转化法实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料质粒DNA                      

大肠杆菌的电击转化实验

            实验方法原理 转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种,它不同于通过噬菌体

大肠杆菌的电击转化实验

大肠杆菌的电击转化实验可以用于:更为简便快捷地进行转化。实验方法原理转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种,它不同于通过噬菌体感染

大肠杆菌的电击转化实验

实验方法原理 与制备用化学方法进行转化的感受态细胞相比,制备电转化的感受态细胞要容易得多。细菌简单地生长至对数中期、冷却、离心,用冰冷的水或缓冲液充分洗净以降低细胞悬液的离子强度,而后再用含 10% 甘油的冰冷缓冲液悬浮。实验材料 质粒 DNA试剂、试剂盒 甘油纯水SOC 培养液仪器、耗材 CYTL

联合团队开发非天然α氨基酸合成新策略

8月30日,上海交通大学化学化工学院教授张万斌团队与中国科学院上海有机化学研究所研究员、中国科学院院士麻生明团队合作,通过双手性金属协同催化,实现了烯烃构型和中心手性的综合控制,为具有不同立体化学特性,即含有Z-和E-烯烃部分及R-和S-手性中心的光学纯分子的立体发散合成提供了一个潜在的通用策略,为

大肠杆菌的生长曲线测定实验

细菌的生长曲线测定实验对于(1)细胞生长过程监控(2)细胞生长时态的观察等都有重要意义实验方法原理将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓

机体的天然免疫实验

实验材料 血清试剂、试剂盒 伤寒培养液琼脂生理盐水仪器、耗材 试管吸管水浴箱实验步骤 1.  取无菌小试管2支,分别注明1、2号。2.  用吸管取新鲜无菌兔血清0.5毫升,加入第1管内。3.  用另一支吸管吸取无菌生理盐水0.5毫升,加入第二管内。4.  再用吸管吸取伤寒杆菌培养液,分别加入1及2管

利用肉桂天然成分抑制鸡大肠杆菌机制研究获进展

近日,华南农业大学药用植物研究中心教授吴鸿团队与广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所助理研究员周芳合作,在利用肉桂天然成分抑制鸡大肠杆菌机制研究方面取得新进展。相关成果发表于《食品生物科学》(Food Bioscience)。禽大肠杆菌病的耐药性问题是一个重大的公共卫生问题,它不仅影响家禽业的发展

利用肉桂天然成分抑制鸡大肠杆菌机制研究获进展

  近日,华南农业大学药用植物研究中心教授吴鸿团队与广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所助理研究员周芳合作,在利用肉桂天然成分抑制鸡大肠杆菌机制研究方面取得新进展。相关成果发表于《食品生物科学》(Food Bioscience)。  禽大肠杆菌病的耐药性问题是一个重大的公共卫生问题,它不仅影响家禽

PCR实验室整体解决方案

PCR实验室简介Pcr实验室又叫基因扩增实验室、DNA实验室,基因检测实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精

大肠杆菌生长曲线测定实验

一定量的微生物,接种在适合的新鲜液体培养基中,在适宜的温度下培养,以菌数的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,做出的曲线叫生长曲线。一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。实验方法原理测定微生物生长曲线的方法很多

我国科学家实现底盘细胞生长与产物合成的精准调控

  利用合成生物学构建细胞工厂能够实现重要化学品和生物能源的高效制造,是解决目前人类面临资源、能源和环境问题的关键技术。然而,生物合成往往与微生物细胞生长竞争资源,如何精准调控细胞的生长与产物合成是构建高效菌株的核心问题之一。设计一种普适性高且鲁棒性好的细胞生长和生物合成平衡策略是解决上述问题的关键

磷酸氨基酸分析实验

鉴定蛋白质中磷酸化的氨基酸残基是很有意义的。磷酸化作用发生在蛋白质的丝氨酸、苏氨酸和酩氨酸时,通过部分的HCl水解及接着进行双向薄层电泳,可以便利地鉴定 标记的磷酸氨基酸。实验方法酸水解法磷酸化蛋白质 印度墨汁 HCl 磷酸氨基酸混合物 电泳缓冲液 茚三酮 PVDF膜 烘箱 离心机 离心管 纤维素薄

氨基酸序列测定实验

实验方法原理 实验材料 分离胶和积层胶溶液还原型谷胱甘肽干粉试剂、试剂盒 4 × 凝胶缓冲液10 × 下槽缓冲液10 × 上槽缓冲液甲醇转移缓冲液0.1%(V/V)考马斯亮蓝的 50%甲醇溶液10%(V/V)乙酸的 50%甲醇溶液仪器、耗材 微量注射器或凝胶加样吸头PVDF 膜小型电转装置自动蛋白质

磷酸氨基酸分析实验

鉴定蛋白质中磷酸化的氨基酸残基是很有意义的。磷酸化作用发生在蛋白质的丝氨酸、苏氨酸和酩氨酸时,通过部分的HCl水解及接着进行双向薄层电泳,可以便利地鉴定 标记的磷酸氨基酸。实验材料磷酸化蛋白质试剂、试剂盒印度墨汁HCl磷酸氨基酸混合物电泳缓冲液茚三酮仪器、耗材PVDF膜烘箱离心机离心管纤维素薄层色谱