大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选

【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,不能在基本培养基上生长,必须补充某些物质才能生长,称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤:诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出,缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂,诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落,一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液,分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量,不同微生物的最适处理剂量不同,须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关:诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间,往往......阅读全文

大肠杆菌转化实验——热击法

大肠杆菌转化可以:(1)将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制,增殖和表达,以获得目的基因;(2)验证大肠杆菌感受态细胞效果;(3)用于分子生物学其他研究。实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒

肠杆菌和大肠杆菌的区别

这是分类学上的差异。肠杆菌,是一个“科”;大肠杆菌,是“肠杆菌科”下的一个“种”。————————————中文名称: 大肠杆菌外文名称: 学名:Escherichia coli (T. Escherich 1885)界: 细菌界门: 变形菌门(Bacteria)纲: γ-变形菌纲(Proteobac

出血性大肠杆菌及检验

一、概况   肠出血性大肠杆菌(EHEC)是能引起人的出血性腹泻和肠炎的一群大肠埃希氏菌。以O157:H7血清型为代表菌株。  肠出血性大肠杆菌感染可引起轻度腹泻、出血性结肠炎(HC)、溶血性尿毒综合症(HUS),血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等。其中HUS病程凶险,易造成急性肾衰竭乃至死亡。  

外源质粒DNA转化大肠杆菌

摘要: 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程细菌中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一. 外源质粒 DNA 转化 大肠杆菌 1 实验简介 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程

大肠杆菌的转化原理及方法

大肠杆菌的转化原理及方法大肠杆菌转化可以:(1)将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制,增殖和表达,以获得目的基因;(2)验证大肠杆菌感受态细胞效果;(3)用于分子生物学其他研究。实验方法原理:质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42°C短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择

小儿大肠杆菌肠炎的症状有哪些?

  腹泻:腹泻是最常见的症状,通常表现为水样便,量较多,有腥臭味。病情较轻时大便稀薄或带水,呈黄色或黄绿色,有酸味,含有少许黏液及白色奶块或泡沫。病情发展严重时,大便呈黏液状,带脓血,有腥味。  发热:患儿可表现为高热,达39℃以上,甚至发生惊厥。但也可表现为体温不升,说明病情较重。  脱水:可表现

关于侵袭性大肠杆菌肠炎的概述

  肠侵袭性大肠埃希杆菌(enteroinvasive E.coli,EIEC)首先于1967年日本报告自患痢疾样腹泻的大儿童和成人中发现,常误为菌痢。主要在大儿童及成人中致病。临床表现为发热、腹痛、腹泻、里急后重、脓血便。症状与菌痢不易鉴别。

美国首现致病大肠杆菌死亡病例

  美国卫生官员7月8日确认,美国出现第一例肠出血性大肠杆菌死亡病例。  美国疾病控制和预防中心说,一名居住在亚利桑那州北部的居民因感染肠出血性大肠杆菌发病死亡。实验室测试结果显示,这一居民所染菌株与在德国流行的大肠杆菌菌株一致。    美国官方没有公布这位居民的细节信息,只说他超过65岁,先前去过

大肠杆菌O157显色检测平板

  产品规格:   货号:LD-527 ,100片/盒   产品简介:   用于检测大肠杆菌O157的常规培养基是由山梨醇麦康凯琼脂构成,它对O157的特异性极差,常造成假阳性。山梨醇麦康凯琼脂培养基之所以如此难以读数是因为在延长的培养过程中会发生染色的改变。而大肠杆菌O157显色检测平板是一

大肠杆菌定性测试仪使用流程

大肠杆菌定性测试仪中西便使用,符合美国EPA标准1、除去培养瓶外包装,打开其瓶盖;2、在培养瓶中注入测试水直至100ml;3、轻轻搅拌至培养基完全溶解,注意:不要起泡沫4、用瓶盖将培养瓶盖紧;5、将培养瓶放入Aquasure Pro 3000TM测试单元中并盖好;6、使用AC220V,DC12V,输

工业大肠杆菌发酵“生产”丹参素

  记者12日从天津大学获悉,该校化工学院教授赵广荣团队历时6年,成功实现工业大肠杆菌发酵生产丹参素,实现了丹参素从头全生物合成。目前,该团队建立的合成微生物细胞工厂,发酵生产丹参素产量达7g/L以上。这一成果被国际顶尖杂志英国《自然·化学生物学》评价“该人工途径为植物多酚提供了新来源”,为丹参素工

科威特出现新型大肠杆菌耐药菌株

首届感染预防和控制国际会议(ICPIC 2011)报道  科威特学者AA Dashti等首次报告并检测到,科威特出现了一种含两种碳青霉烯类基因、对多种抗生素耐药的大肠杆菌O25b序列型(ST)131。   研究者调查了从一例来自科威特AI-Amiri医院的社区始发尿路感染患者透析腹水中发现的一种多重

大肠杆菌的检测方法--平板计数法

  该方法是统计物品含菌数的有效方法,操作的顺序是首先将样本进行适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取定量的稀释液进行培养使其逐渐生长成肉眼可观察的菌落,然后通过稀释度和样本数量来计算菌数。但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的 2~3或更多

关于大肠杆菌的发酵法检测介绍

  这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方法,还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。

大肠杆菌检测的相关内容

  大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌,主要寄生于大肠内,约占肠道菌中的1%。是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。大肠杆菌能合成维生素B和K,正常栖居条件下不致病;若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。在水和食品中检出,可认为是被粪便污染的指标。大肠菌群数常作为饮水、食物或药物的卫生学

关于大肠杆菌的基本信息介绍

  大肠杆菌(Escherichia coli),又叫大肠埃希氏菌,Escherich在1885年发现的。大肠杆菌是条件致病菌,在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染 [1] 。

肠出血性大肠杆菌的介绍

  肠出血性大肠杆菌(EnterohemorrhagicE. coli, EHEC)是大肠杆菌的一个亚型,以O抗原分型,EHEC可分为O157、O26、O111血清型,主要致病菌株为O157:H7,可引起感染性腹泻,因能引起人类的出血性肠炎而得名。在1982年一次出血性结肠炎流行中被分离出。

大肠杆菌的呼吸酶和底物汇总

大肠杆菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化还原对中点电位(伏)甲酸脱氢酶碳酸氢盐/甲酸盐−0.43氢化酶质子/氢−0.42NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32甘油-3-磷酸脱氢酶DHAP/Gly-3-P−0.19丙酮酸氧化酶醋酸盐+二氧化碳/丙酮酸盐?乳酸脱氢酶丙酮酸盐/乳酸盐−0.19D-氨基酸脱氢酶2

大肠杆菌噬菌体的繁殖特点

繁殖过程可以分为吸附、侵入、复制、合成与释放4步。(1)吸附。噬菌体以它的尾部末端高度特异性地吸附到敏感细胞表面上某一特定的位点,如细胞壁、鞭毛或纤毛。(2)侵入。(3)复制与合成。指噬菌体DNA和蛋白质外壳的复制。噬菌体DNA进入宿主细胞后,立即引起宿主的代谢改变,宿主细胞内的核酸不能按自身的遗传

大肠杆菌与酵母菌的区别

1、从分类上说,大肠杆菌是细菌,属于原核生物;酵母菌是真菌,属于真核生物。2、从大小上说,大肠杆菌细胞小,大小约为0.7×13微米;酵母菌细胞大,一般为1-5微米×5-30微米。3、从细胞壁成分说,大肠杆菌细胞壁主要是由肽聚糖;酵母菌细胞壁的主要成分是葡聚糖和甘露聚糖,占壁干重的85%以上,几丁质含

产肠毒素大肠杆菌有哪些菌株

  产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,简称ETEC)是大肠杆菌的一种,主要通过食物和水传播,是导致婴幼儿和旅行者腹泻的主要原因。  ETEC菌株众多,不同的菌株可能会产生不同的毒素。以下是一些常见的ETEC菌株:  O157:H7:这是最为人们所知的

大肠杆菌的检测方法酶底物法

  酶底物法已被列为国家标准(GB/T4789.32-2002),用酶底物法来检测大肠杆菌的主要原理是:大肠杆菌细菌能够产生 β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase),它能够分解 ONPG(Ortho-nitro phenyl-β-D-galactopyr-anoside),从而使得培养

在线大肠杆菌测定仪的特点

  1、操作简单,集成报表生成,实时反应全过程监测,并动态显示测试项目的反应曲线  2、自动进行质控和校准,保障测试结果的一致性和可靠性  3、全自动控制,用户可编程检测参数,适应不同应用场合对可疑样本自动启动循环检测模式,同时启动控制中心警报机器断电后重新来电时,自动恢复工作状态  4、运行可靠,

大肠杆菌菌株的基本信息介绍

  大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) 革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米。周生鞭毛,能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3。国家规定,每毫升饮用水中的菌落总数小于100,

关于侵袭性大肠杆菌肠炎的预防

  侵袭性大肠杆菌肠炎在多数情况下属于自限性疾病,多于1~2周内痊愈。预后和下列因素有关:①年老体弱、婴幼儿及免疫功能低下患者,并发症多,预后严重;②中毒性菌痢病死率较高,尤其是呼吸衰竭型;③痢疾志贺菌Ⅰ型引起症状较为严重,而福氏菌易致慢性,耐药性菌株则影响疗效;④采用适当抗菌药物对清除感染有重要作

肠致病性大肠杆菌的简介

  肠致病性大肠杆菌即大肠埃希氏菌(E. coli),是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。  大肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌

大肠杆菌的检测技术PCR检测技术

  PCR(polymerase chain reaction) 即聚合酶链反应技术,PCR 是指利用耐热 DNA 聚合酶的作用,通过变性  -延伸  -复性的循环操作, 在体外迅速将DNA 模板扩增数百万倍的一种克隆技术。采用琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增产物的荧光条带。  在食品微生物领域中,

关于大肠杆菌导致的疾病的介绍

  1、肠道外感染  多为内源性感染,以泌尿系感染为主,如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者,大肠杆菌可侵入血流,引起败血症。早产儿,尤其是生后30天内的新生儿,易患大肠杆菌性脑膜炎;  2、急性腹泻  某些血清型大肠杆菌能引起

关于大肠杆菌的平板计数法检测

  用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL,该样品与乳糖胆盐发酵类似,然后将其放入无菌培养皿中,再加入温度于 45℃下的 CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量,并进行培养皿中溶液均匀混合,可以通过快速转动培养皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右 [3] ,然后快速摇晃培养基,使其可以均匀覆盖平

概述大肠杆菌的生物学特性

  1、理化特性  大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状;大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状;大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢;多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附