OpenSPR如何革新流式动力学检测(一)

流式细胞仪是现代细胞生物学家和免疫学家不可缺少的优秀工具。它可以提供广泛的信息,帮助研究人员识别各种细胞的物理和化学特征。作为一种用途极为广泛的仪器,流式细胞仪有许多应用,包括细胞计数、分选、活力、细胞凋亡检测、膜电位甚至结合检测等。但是其无法直接检测分子间结合动力学,因此本文我们讨论了流式细胞仪的应用并演示如何使用我们的OpenSPR的LSPR技术对流式细胞仪的工作做革新,以更快的获得发表文章所需的动力学数据。流式细胞仪的工作原理流式细胞仪是基于光学的仪器,通过流体系统、激光器、一系列光学滤波器和检测器进行运作。将荧光标记的细胞悬浮液注射入仪器,细胞通过一个漏斗型流体瓶颈,将细胞变成单细胞流。然后,细胞通过激光照射的细胞检测区,基于细胞内的物理和/或化学特征,光被散射,细胞上的荧光团也被激发并向探测器发射,从而获取细胞的荧光信号和光散射信号。细胞被激光检测,它们要么直接被废弃,要么被分类并进入收集管进行下游检测。从流式细胞仪可......阅读全文

流式检测细胞凋亡还有哪些方法?

  前面讲到利用流式细胞术进行细胞凋亡检测的annexinV/PI双染色法,今天主要简要介绍SYTO/PI双染色法、细胞DNA含量分析法、TUNEL法。  SYTO/PI双染色法  SYTO系列染料是一种细胞膜通透性的核酸染料,可以自由进入活细胞与细胞内的DNA或者RNA结合,未结合时发射荧光信号的

细胞表面抗原流式细胞检测的一般步骤(供参考)

1.实验材料:检测管或96微孔板 一抗(FITC标记),以表记Anti-CD19/FITC抗体为例缓冲液:PBS(PH7.4)设备:移液器、离心机、冰盒或冰箱、流式细胞仪2. 注意事项:标记抗体在使用之前用PBS溶解并振匀,并确认没有沉淀,迅速离心几秒,使所有的液体都集中到管底,标记抗体应避光4℃保

细胞表面抗原流式细胞检测的一般步骤(供参考)

  1.实验材料:   检测管或96微孔板 一抗(FITC标记),以表记Anti-CD19/FITC抗体为例   缓冲液:PBS(PH7.4)   设备:移液器、离心机、冰盒或冰箱、流式细胞仪   2. 注意事项:   标记抗体在使用之前用PBS溶解并振匀,并确认没有沉淀,迅速离心几

细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术

细胞调亡的流式细胞仪检测技术一、固定细胞的染色方法1)PI单染色法方法一1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。2.3ml PBS洗一次。3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。5.40

细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术

细胞调亡的流式细胞仪检测技术 一、固定细胞的染色方法 1 ) PI 单染色法 方法一1. 收集细胞( 1 ~ 5 )× 106 个, 500 ~ 1000r/min 离心 5min ,弃去培养液。2. 3ml PBS 洗一次。3. 离心去 PBS ,加入冰预冷的 70 %的乙醇固定, 4 ℃, 1h

细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术

一、固定细胞的染色方法 1)PI单染色法 方法一 1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.3ml PBS洗一次。 3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5.400目的筛网过滤

细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术

一、固定细胞的染色方法 1)PI单染色法 方法一 1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.3ml PBS洗一次。 3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5.400目的筛网过滤

新一代SPR-技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用(二)

蛋白结合分析:将NOS固定OpenSPR的纳米金芯片表面,并对CaM做浓度梯度检测,结果导入TraceDrawer分析。(图4 )OpenSPR实时检测,梯度稀释后不同浓度检测出野生型CaM对nNOS(红线)和eNOS 肽(紫红线)的结合情况,观察结合、解离及再生的整个过程,结果显示实验曲线稳定及信

PacBio-RS-II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。His

安捷伦-LDIR-激光红外成像技术革新环境样品微塑料检测

  近日,卡塔尔大学环境科学中心的 S. Veerasingam 教授团队在 “Talanta” 科学杂志上发表了题为“Laser Direct Infrared Spectroscopy: A cutting-edge approach to microplastic detection in e

PacBio-RS-II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

  PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。   His

分子间相互作用分析:荧光标记VS无标记

同无标记技术相比,利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低,例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验,无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而,基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性,像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中,研究人员该如何选择合适的检测技术呢?不要着急,下

细胞动力学参数检测

细胞增殖活性的检测 用增殖的细胞核抗原(PCNA)检测细胞增殖活性 用Ki-67检测细胞增殖活性 用CD71检测细胞增殖活性 用BrdU单克隆抗体检测细胞增殖活性 细胞周期素的检测

细胞动力学参数检测

细胞增殖活性的检测 用增殖的细胞核抗原(PCNA)检测细胞增殖活性 用Ki-67检测细胞增殖活性 用CD71检测细胞增殖活性 用BrdU单克隆抗体检测细胞增殖活性 细胞周期素的检测

如何修炼成流式高手之科研样本制备

为什么同一个配色,同一份实验步骤,但是最后实验结果却也变成“买家秀与卖家秀”。     我们来看看他的实验记录, 但是,如果是在做胞内染色的时候,死细胞对于实验结果的影响更大,但是普通的PI或者7AAD ,有会因为细胞需要固定,破膜而使所有细胞都是阳性。这个时候我们就需要使用到通用型死活细胞染料,这

流式细胞仪的象限如何观察

左下为正常细胞,右下为早期凋亡细胞左上为坏死细胞,右上为晚期凋亡细胞

磁珠分选与流式分选该如何选择?

目前常见的分选方法有两种,一种是流式分选,一种是磁珠分选,两种方案各有优势,下面我们分别来了解一下。1、什么是MACS 磁性分选?            答:首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞,然后把标记好的细胞过分选柱(分选柱周围会有磁铁),带磁珠的细胞就留在柱子上,不带磁珠的细胞就流走了,从而

如何看流式细胞周期结果图

流式细胞术在许多研究生课题中常用到,但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例,大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的,方便讨论。流式细胞术分析细胞周期结果示图 首先来认识下图:1、纵坐标Cell Number:即计数到的有效细胞数;2、横坐标

如何选择合适的流式细胞术抗体?

选择合适的流式细胞术抗体可以考虑以下几个方面:特异性:确保抗体能够特异性识别目标抗原,避免与其他相似抗原发生交叉反应。可以查阅相关文献、产品说明书以及其他研究人员的使用经验。克隆号:不同克隆号的抗体可能在性能上有所差异。有些克隆号的抗体经过广泛验证和应用,可能更可靠。荧光素标记:根据流式细胞仪的配置

如何看流式细胞周期结果图

流式细胞术在许多研究生课题中常用到,但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例,大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的,方便讨论。流式细胞术分析细胞周期结果示图 首先来认识下图:1、纵坐标Cell Number:即计数到的有效细胞数;2、横坐标

CRISPR实验指南:如何检测CRISPR脱靶突变(一)

  张锋实验室的一位研究生:Winston Yan的项目就是利用CRISPR-Cas9基因组编辑系统的一个突变来敲除调控小鼠胆固醇的基因。“最终的目的是为治疗应用铺平道路,”Yan说,他最近完成了他的研究生工作,同时也第一次遇到CRISPR脱靶效应的问题。  CRISPR能帮助研究人员快速有效地对基

如何看懂一张粒度检测报告

在找填充粉体的过程中,我们经常会用到粒度分析,那么粒度检测报告到底反映了什么?上面的数字又代表了什么?下面介绍。1. 测试范围是什么?所测粒径的区域。2 . 粒径是什么?颗粒的直径叫做粒径,一般以微米或纳米为单位来表示粒径大小。3. 什么是等效粒径?粉体颗粒不可能是完美的球形,所以当一个颗粒的某一物

如何看懂一张粒度检测报告

在找填充粉体的过程中,我们经常会用到粒度分析,那么粒度检测报告到底反映了什么?上面的数字又代表了什么?下面介绍。1. 测试范围是什么?所测粒径的区域。2 . 粒径是什么?颗粒的直径叫做粒径,一般以微米或纳米为单位来表示粒径大小。3. 什么是等效粒径?粉体颗粒不可能是完美的球形,所以当一个颗粒的某一物

如何看懂一张粒度检测报告

在找填充粉体的过程中,我们经常会用到粒度分析,那么粒度检测报告到底反映了什么?上面的数字又代表了什么?看完这个你就都懂了~1. 测试范围是什么?所测粒径的区域。2 . 粒径是什么?颗粒的直径叫做粒径,一般以微米或纳米为单位来表示粒径大小。3. 什么是等效粒径?粉体颗粒不可能是完美的球形,所以当一个颗

如何优化实验操作以提高流式细胞术检测细胞的结果准确性?

为了优化实验操作以提高流式细胞术检测细胞的结果准确性,可以采取以下措施:样本准备:确保细胞活性:在样本处理过程中尽量减少对细胞的损伤,保持细胞的高活性。使用台盼蓝拒染法等检测细胞活性,若活性低可适当去除死细胞。制备单细胞悬液:通过轻柔的吹打、过滤等方式避免细胞团聚,获得均匀的单细胞悬液。抗体选择与使

流式应用精选——微核检测(体内体外)

 注:点击文章名称查看详情。文章名称样本仪器型号备注Assessment of the Genotoxic Potential of Azidothymidine in the Comet,Micronucleus, and Pig-a AssayBone Marrow and Peripheral

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

关于脂肪干细胞的流式检测介绍

  通过酶消化法将细胞收集到离心管中,细胞悬液调整密度为1×105 mL-1,800r/min(120g),离心5 min,弃掉上清,用4℃的冷D-Hanks 冲洗重悬细胞,再次将细胞悬液以800 r/min,离心5 min,之后弃去上清。然后用D-Hanks 将细胞重悬至1 mL,加入抗体5~10

怎么看流式检测ROS的图

你是不是想问winbox中interfaces----traffic,这里显示的图?如是的,当中,就是tx与rx,一个出一个进,或是说一个下载,一个上传,上下两图是相对的。其实,可以简单的看,大的数字为下载的流量,小的数字为上传的。一般的都是下载大于上传的。就此图没有多大的意义。能观察到的,也就是流

带你了解流式细胞仪检测

  什么是流式细胞仪?   流式细胞仪(Flowcytometry)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一