PacBioRSII测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。 HistoGenetics公司引进PacBio RS II测序系统 HistoGenetics公司和Pacific Bioscience公司于2014年4月29日共同宣布,鉴于PacBio测序平台能够测通HLA基因全长,从而提供更加精确的HLA分型的优势,购进两台PacBio RS II系统取代之前Sanger一代测序用于HLA分型。HLA是具有高度多态性的同种异体抗原,含有上万种等位基因以编码抗原蛋白识别外来抗原。准确的HLA分型对于器官移植、自身免疫疾病相关研究、药物超敏性研究等非常重要。之前采用Sanger及NGS短序列测序方法......阅读全文

PacBio-RS-II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。His

PacBio-RS-II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

  PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。   His

百迈客测序阵营再添强援—PacBio-RS-II测序仪正式投产

  日前,百迈客公司引进的三代单分子实时测序PacBio RS II已正式投入生产。在三代测序平台上,实现了数据产量和读长的双重提升,一个SMRT Cell芯片可产出高达1.3Gb数据,reads平均长度达到14KB,N50超过20KB,最长reads超过45KB,为基因组测序、全长转录组测序、碱基

HLA分型技术

HLA分型技术主要组织相容性复合物(MHC)是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原,MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子,对抗原递呈和免

HLA分型技术(一)

  HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标,免疫遗传学研究的发展,很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性;80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。  一、血清学分型技术  (一)HLA-Ⅰ类抗原

HLA分型技术(二)

  (二)PCR/SSO技术  此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecific ol

HLA分型方法

1.淋巴细胞毒试验 为HLA抗原分型常用方法。2.混合淋巴细胞培养试验本方法多用于组织相容性方面的研究,临床上主要用于器官移植。3.分子生物学技术一类是PCR为基础的基因分型。另一类是以测序为基础的基因分型。

HLA分型的方法

①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。②混合淋巴细胞培养试验:多

HLA的分型方法

 HLA的分型方法是检验主管技师考试要求掌握的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。   1.淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原

北京希望组新购5台Sequel测序平台

   北京希望组生物科技有限公司(GrandOmics Biosciences, Co., Ltd., 以下简称“希望组”)与美国太平洋生物公司(Pacific Biosciences of California, Inc.,以下简称称“PacBio”)今日宣布达成战略合作,希望组与旗下科技服务公司

关于HLA分型的技术发展介绍

  HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究,90年代以来,HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方法,随着测序技术的突飞猛进,

关于HLA分型的DNA分型方法介绍

  DNA分型主要分为两种方法:基于核酸序列识别的方法和基于序列分子构型的方法,常用的方法大致可分为大类:  ①限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism,RFP)。其原理是不同的DNA膜板山于序列的差异在限制性内切酶作用下将被切成大小

HLA有哪些分型方法?

①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。②混合淋巴细胞培养试验:多

关于HLA分型高分辨分型应用的介绍

  1、地中海贫血治疗  2、造血干细胞移植异基因造血干细胞移植是现能根治重型Β地贫的方法。如有HLA相配的造血干细胞供者,应作为治疗重型Β地贫的首选方法。  3、急性白血病,骨髓移植。  4、对ANLL疗效较好。  ①同基因骨髓移植,供者为同卵孪生子。  ②同种异基因骨髓移植,供者为患者的兄弟姐妹

PacBio推出小而强大的测序系统

  之前,人们一直在猜测Pacific Biosciences可能会推出小型的单分子测序仪,但PacBio从未给出肯定的答复。而在2015年9月的最后一天,PacBio给了人们一个惊喜,突然宣布推出Sequel测序系统。Sequel系统保留了SMRT技术的优点,与现有的PacBio RS II系统相

HLA基因分型方法:RFLP法

RFLP法1)常规制备DNA盐析法1.用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。2.每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次,再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。3.加50μl 10% SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质,37℃过夜或55℃ 3h。4.加0.25体积饱和醋酸钠溶液,剧烈摇动1

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍: HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。 1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍:HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.2ml到反

HLA细胞法分型试验简介

HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。1.试验

HLA细胞法分型试验简介

HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。

HLA的分型方法有什么?

  ①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。  ②混合淋巴细胞培养

Pacific-合作国内基因公司开展转化医学项目研究

  Pacific Biosciences将向湖滨盘古基因公司提供PacBio® RS II DNA测序系统。 湖滨盘古基因公司已在天津东丽湖科技园建立了一个1500平方米的基因组学研究机构,致力于利用PacBio单分子实时( SMRT® )测序平台,进行转化医学项目研究。   “我们的目标是要成为

关于HLA基因复合体的分型技术介绍

  HLAⅠ类抗原的DQ、DR用血清学检测法进行分型,因此在方法学上称为血清学鉴定的抗原(serologicallydefinedantigen,SD抗原);DP和D特性需用细胞学方法进行检测,因此称为淋巴细胞鉴定的抗原(lymphocytedefinedantigen,LD抗原)。虽然HLA的基因

PacBio测序有望掀起下一场遗传诊断的革命

  从一代到二代再到三代,近年来测序技术的发展势不可挡。单分子测序也逐渐表现出它的优势,在测序舞台上发挥着举足轻重的作用。近日,比利时鲁汶大学和瑞典乌普萨拉大学的研究人员在《Nucleic Acids Research》发表综述文章,介绍了PacBio SMRT测序技术在临床中的应用。  文章简单回

罗氏联手PacBio打造NGS诊断产品

  美国Pacific Biosciences公司周三宣布与罗氏诊断签订一项协议,以PacBio的SMRT技术为基础开发诊断产品。包括前期、里程碑和供应付款在内,罗氏将向PacBio支付7500万美元。   罗氏选择了PacBio公司的SMRT技术   去年,罗氏曾向 Illumina发起收

观点:国人不要再在三代测序仪上犯同样错误了!

  作者:天津南开大学生命科学学院 高山  华大基因购入首台单分子测序仪PacBio RS II。看到这个消息,华大进入单分子领域太晚了。  我刚到美国的时候,2011年看好这技术,2012年开始写第一本中文手册,后面就想到中国会大肆购买,然后2013年写标书,2014年基金评审被毙。  其实当时就

新一代测序十年记:后起之秀PacBio

  在新一代测序技术崛起的早期,市场主要被Illumina、Life Tech和Roche这三家公司占领。偶尔也有一些新的测序平台出现,但大多是雷声大雨点小,不久便没了下文。面对这些强大、成熟的系统,新平台要想站稳脚跟,的确不是件容易的事。  在2010年的AGBT年会上,Pacific Biosc

HLA分型的常用方法有哪些?

1.分子生物学技术: 一类是PCR为基础的基因分型,一类是以测序为基础的基因分型。2.淋巴细胞毒试验: 为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T

简述HLA低分辨分型的内容

  采用序列特异性引物扩增HLA等位基因的特异性片段,经电泳分离,根据PCR结果的反应格局具判断被测标本的HLA等位基因型,具有通量大、正确性好的特点。反映了HLA抗原水平的等位基因类型,用于骨髓、器官移植组织配型的初筛。

关于HLA高分辨分型的介绍

  过去治疗白血病通常是通过骨髓移植进行的,由于必须在麻醉状态下抽取骨髓捐献者的部分骨髓,整个过程对捐献者产生非常大的心理压力。现随着科学进步,只需抽取若干毫升静脉血,分离出干细胞,再输入患者体内即可。首先抽取患者和捐献者的静脉血样本,提取DNA,测出各自DNA碱基的顺序,最后通过软件比对分析得出H