血清的制备方法问题

1、问:我的实验需要自己制备一些血清用于培养细胞,有没有人知道用于培养细胞的血清需要怎样的制备过程?答:自己制备血清当心污染啊,我们一般不自己制备胎牛血清,我们是购买的Gibco牛血清,Gibco新西兰血清10091148,效果非常好,也很稳定。如果无菌条件好的话,用静置析出方法就行。 2、问:一般我们用得Gibco胎牛血清用前还要灭活,我想用大鼠的血,不知道要不要灭活? 答:你直接把采来的血液在离心管里4℃过夜,离心,取上清,在无菌过滤,也可灭活,然后分装冻存,用时再配。 3、问:如果灭活会不会对血清中的一些因子有损伤? 答:加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。灭活一般不会对血清中的一些因子损伤的。 ......阅读全文

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。

兔多克隆抗血清的制备实验

实验材料 抗原试剂、试剂盒 PBS乙醇仪器、耗材 注射针头注射器培养箱实验步骤 1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的颈背部毛皮,另一只

抗原和免疫血清的制备实验

实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制

制备型血清离心机分类方法

制备型血清离心机分类方法有多种。1、按分离目的可分:制备型血清化验室离心机和制备型血清工业离心机。2、按温控可分:制备型血清冷冻离心机和制备型血清常温离心机。3、按速度可分:制备型血清低速离心机和制备型血清高速离心机。4、按分离规模可分:小型制备型血清离心机和大型制备型血清离心机。5、按产地可分:国

免疫球蛋白抗血清制备方法

免疫球蛋白抗血清制备方法此法用于制备间接法抗抗体。因抗原为可溶性,故多需加佐剂。(1)淋巴结注射法1)选择体重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),编号;2)在家兔两后脚掌共注射活卡介苗,50mg(约0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮内0.2mL)。7~10d后,鼠或国窝处淋巴结肿大如黄豆或

制备型血清离心机分类方法

制备型血清离心机分类方法有多种。1、按分离目的可分:制备型血清化验室离心机和制备型血清工业离心机。2、按温控可分:制备型血清冷冻离心机和制备型血清常温离心机。3、按速度可分:制备型血清低速离心机和制备型血清高速离心机。4、按分离规模可分:小型制备型血清离心机和大型制备型血清离心机。5、按产地可分:国

抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备

实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

免疫学技术:免疫血清制备方法

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时

抗血清的制备免疫程序知识点

1.免疫原的剂量:免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受,在一定剂量范围内,免疫原剂量越大,产生的抗体效价越高。2.免疫途径:有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种,加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针

免疫血清的制备及效价测定

制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

抗血清的制备的免疫程序有哪些?

1.免疫原的剂量:免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受,在一定剂量范围内,免疫原剂量越大,产生的抗体效价越高。2.免疫途径:有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种,加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量

细胞营养产品在制备无血清/低血清培养基中的应用

基础培养基 + 超滤植物源营养物 = 个性化低成本无血清/低血清培养基  如此简单高效!CHO细胞专用复合添加物Sheff-CHO系列专为CHO细胞优化研发;全球独家非动物源复合添加物系统;独家超滤系统过滤;有添加微量元素、无蛋白等多种产品,满足不同工艺需求;全面改善细胞表现,增强细胞活力,提高蛋白

兔抗人血清抗体的制备和效价测定

实验原理 凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特异性结合的物质称为抗原。物质所具有的这种特性称为抗原性(Antigenicity)。当机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。 医学上常

兔多克隆抗血清的制备实验——耳动脉放血

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  准备用于放血的家兔(见基本方案) 2.  将靠近家兔头部的半只耳朵托在梅指和食指上,用中指和无名指弯曲剩余的半只耳朵使之下垂,以便使血液随重力下流,用一个18G注射用针头(不带注射器)沿着兔耳中动脉进针,针尖指向兔耳根部

中美学者首次制备人血清素神经元

  血清素(Serotonin)是一种调节情绪和精神状态的神经递质,与许多神经系统疾病和精神疾病有关,包括抑郁症。但是,由于我们没有办法获得活体的人类血清素神经元来研究这些疾病,因此,大多数的血清素研究一直都是在实验动物身上进行的。延伸阅读:首次用iPS制备控制食欲的神经元。  最近,来自上海交通大

豚鼠的血清和血浆的制备及取血的方法

一、豚鼠的取血法(1)足背中静脉取血:助手固定动物,将其后肢膝关节伸直捉到实验者面前,实验者将动物脚背面用酒精消毒,找出背中足静脉后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射器针刺入静脉。拔针后立即出血,呈半球状的隆起。采血后,用纱布或脱脂棉压迫止血。反复取血时,两后肢交替使用。(2)心脏取血:

豚鼠的取血法及血清和血浆的制备方法

一、豚鼠的取血法(1)足背中静脉取血:助手固定动物,将其后肢膝关节伸直捉到实验者面前,实验者将动物脚背面用酒精消毒,找出背中足静脉后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射器针刺入静脉。拔针后立即出血,呈半球状的隆起。采血后,用纱布或脱脂棉压迫止血。反复取血时,两后肢交替使用。(2)心脏取血:

血清免疫球蛋白(Immunoglobulin,IgG)的分离制备—盐析法

(一)原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称IgG)的主要成分之一,分子量约为15万~16万,沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种,要从血浆中分离出IgG,首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序,使IgG在样品中比例大为

兔多克隆抗血清的制备实验——皮内注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  按基本方案中步骤1制备免疫兔用的抗原。 2.  牢牢地抓住兔子,剃除其背毛,用70%乙酵消毒其暴露的皮肤。用拇指和食指将需要免疫注射的区域的皮肤张开,用3 ml 注射器带24G注射针头以相对皮肤30。的角度进针(针尖的斜

合成培养基配制实验——无血清培养基的制备

实验材料ECM试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材滤膜实验步骤1.  选择适宜的培养基质(ECM),先制备成贮存干液;2.  使用前,贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液;3.  使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌;4.  用吸管吸取使用液,均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器

兔多克隆抗血清的制备实验——肌肉内注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的颈背部毛皮,另一只手托住兔

盐水配血法—红细胞悬液和血清的制备方法

  盐水配血法—红细胞悬液和血清的制备方法:静脉采血3ml,取下针头,将其中的0.4ml注入已加入106mmol/L枸橼酸钠抗凝剂0.1ml的试管中(血液与抗凝剂的比例为4:1),混匀,待用。剩余血液加入另一支试管中,使其自然凝固。分离血清备用。洗涤红细胞:取抗凝血一份,加8-10倍量的生理盐水,颠

抗伤寒沙门菌SOD血清的制备及其免疫保护作用的研究

作者:徐军发,唐湘涓        单位:广东医学院检验科关键词:伤寒沙门菌;鼠伤寒沙门菌;Fe-SOD;抗血清;免疫保护作用【 摘要 】 目的 制备抗伤寒沙门菌Fe-SOD血清,研究其免疫保护作用,探讨SOD与沙门菌毒力的关系。 方法 用纯化的伤寒沙门菌(Stw1)Fe-SOD免疫家兔制备兔抗Fe

兔多克隆抗血清的制备实验——皮下组织注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  准备用于注射家兔的抗原,并准备用于皮下注射免疫的家兔(方法同皮内注射)。2.  将家兔背部皮肤捏出,以远离其下的肌肉,用24G注射针头全程穿剌,进入皮下,小心勿刺入肌肉组织中,在4个不同的部位各注射0.5 ml 抗原。 

用细胞培养法制备病毒血清学抗原应注意的问题

①用于许多病毒中和试验、血凝试验、补体结合试验、凝集及沉淀反应的抗原,用组织培养之材料制备较为理想。 ②用于病毒中和试验的抗原不需要很纯,但是其“感染性病毒于非感染性病毒”之比值高。因后者可结合抗体,感染滴度高,这样经稀释后,即可除去大多数宿主材料及非感染性病毒。所以用于中和试验的病毒,其最适培

初筛实验室抗HIV临界值质控血清的制备及应用

 王锦恒   邓梅英    541001   桂林医学院附院         关键词  抗-HIV  质量控制  临界值   质控血清    ELISA 是目前公认的抗-HIV 较佳的筛选方法[1],但在实际工作中,笔者发现ELISA抗-HIV的检测受诸多因素影响,有系统误差(包括试剂盒质量问题 、