用细胞培养法制备病毒血清学抗原应注意的问题
①用于许多病毒中和试验、血凝试验、补体结合试验、凝集及沉淀反应的抗原，用组织培养之材料制备较为理想。 ②用于病毒中和试验的抗原不需要很纯，但是其“感染性病毒于非感染性病毒”之比值高。因后者可结合抗体，感染滴度高，这样经稀释后，即可除去大多数宿主材料及非感染性病毒。所以用于中和试验的病毒，其最适培养条件应能获得最大量感染性病毒。处理和保存中亦应注意，使其不致失去感染性。 ③血凝抗原应具有足够高的效价，使其在稀释后，尚有4个或8个抗原单位。重要的问题在于维持液中的血清不得含有病毒血凝的非特异性移抑制物。此外，该血清中亦不得含有试验血凝系统中红细胞的血凝素。维持液血清经白陶土处理货用不含血清的维持液，则可解决非特异性抑制物的问题，有时，感染的组织培养用氟碳化合物处理，可使其中之血凝素“暴露”出来，有些病毒抗原的血凝效价，亦可通过反复冻融、超声或吐温80、乙醚处理而提高。 ④一般认为补体结合抗原，应有适当效价，不含宿主物质（......阅读全文
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期，最早使用离子交换凝胶作为载体，轻微搅动即可悬液在培养基中，因而可增加细胞附着的面积，达到大量培养细胞的目的。后来，根据细胞附着生长的特点，对微载体进行了改良，使其带有电荷或其它介质，更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养，也可用于大规模的培养
混合淋巴细胞培养法
混合淋巴细胞培养法 混合淋巴细胞培养法是通过淋巴细胞的有效反应常用于器官移植前的组织配型，以测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容的程度的方法。由于MLC中淋巴细胞接受同种异型抗原的刺激而发生活化、增殖，产生种类众多的细胞因子，促进NK、LAK和CTL等杀伤细胞的分化，因此又是免疫调节研
微载体细胞培养法介绍
（1）微载体选择：先用利用三种小量微载体做培养实验，观察细胞在一定时间内细胞的吸着率和计算细胞数，以得到最大量细胞为佳。（2）水化：称一定量的微载体放入容器中，按每克微载体加50～100ml的比例，加入无Ca2＋和Mg2＋的磷酸缓冲液（PBS），室温下放置应不少于3小时，并不时轻微搅动，然后再用新鲜
关于活细胞培养法的优点
①能精确地控制材料、环境与药物对组织细胞的效能； ②可从细胞水平上通过观察推算出对活组织的作用时间； ③能区别药物对细胞的直接作用还是通过免疫系统、内分泌系统发挥间接作用； ④药物用于临床前可不需用人体作试验，直接用人细胞作为实验对象，起到了从动物试验过度到人体临床试验的桥梁作用； ⑤该
何为稀释混合平板法（细胞培养）
将已经培养好的细胞稀释数倍后，制作好装片，在显微镜下计数，然后按照稀释比例计算出溶液中的细胞数量。这样做的好处是，稀释后，数量减少，容易计算。医院里，利用这种方法，计算血细胞，可以检查出贫血等病。
细胞培养染色体显示法
1） 传代培养细胞染色体显示法 1．培养细胞：取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80％～90％汇合单层培养细胞。 2．加秋水仙素：使用终浓度为0.02～0.8微克/毫升营养液，温箱继续培养6～10小时；或用低温封闭法：把培养细胞置于4℃条件下6～12小时后，再于37℃温箱继续培养6
活细胞培养法的作用介绍
不仅可以检查细胞系（株）对药物的敏感性，而且还可作体内和体外敏感性的比较，同时也可观察到体外细胞不同药物所引起的形态结构和生理、代谢的变化，如铵盐和腺苷均可使细胞浆内形成空泡。脓绿素可增加细胞对氧的吸收，抑制细胞核的分裂，一定剂量的复方丹参能阻碍细胞贴壁，可影响人食管癌细胞对基质附着的作用，故有
特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型，则无须做任何处理，在传代时先做离心处理去除旧培养液，添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时，因其有贴附性，必须进行干扰使细胞不能贴附，才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大
特殊细胞培养实验_一、二倍体细胞培养法
实验方法原理二倍体细胞来源体内二倍体细胞，也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状，便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养，但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状，亦非易事。为此必须采取一些有效的措施，一是低温冻存，二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获得
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以：（1）获得神经胶质细胞；（2）用于神经胶质细胞电生理特性，如膜电位、去极化等；（3）用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物，它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子，并能分泌多种神
初代细胞培养实验——消化培养法
初代培养或原代培养，可以用于：（1）从供体获取组织后的首次培养；（2）组织和细胞刚刚离体，生物性状尚未发生很大的变化，具有二倍体遗传性状，在供体来源充分、生物条件稳定的情况下（年龄、性别），在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法，能把组织块分散成细胞团或单个细胞，便于细
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切：用眼科剪把
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切：用眼科剪把
脂肪干细胞培养_吸脂术法
实验材料深层脂肪组织试剂、试剂盒PBS缓冲液蒸馏水I型胶原酶氯化铵青霉素DMEM仪器、耗材离心管针管灭菌锅离心机水浴锅培养箱培养瓶流式细胞仪脂肪干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。研究发现ADSCs细胞
家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法
家兔椎间盘细胞培养可以：（1）获得家兔椎间盘细胞；（2）用于椎间盘相关课题研究；（3）用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统，其中，第一组给予纯氧，另外3组给予不同浓度的臭氧：30 ug/ml，60 ug/ml和80 ug/ml，然后于15 min及30 min后，采用台
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以：（1）获得神经胶质细胞；（2）用于神经胶质细胞电生理特性，如膜电位、去极化等；（3）用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物，它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子，并能分泌多种神
病毒的培养方法实验——传代细胞培养法
实验方法原理从人及动物某些组织，特别是肿瘤组织，经多次传代可建立传代细胞系，这种细胞能无限地传代，某些传代细胞对病毒敏感范围较广，可用作病毒的分离鉴定，如HeLa 细胞，Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞，HeLa 细胞来自子宫颈癌，Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上
初代细胞培养实验——组织块培养法
实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1. 剪切把组织小块（1cm3）置入小烧杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸净Hanks液，用眼科剪反复剪切成1mm3块为止；2. 摆布用弯头吸管吸取若干小块，置入培养
单细胞培养培养方法介绍平板培养法
将制备好的单细胞悬浮液，按照一定的细胞密度，接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法，称为平板培养。等量的单细胞培养液与等量熔化(30～50℃)的琼脂培养基(0．6%～1%)混合，迅速铺板于培养皿中，琼脂冷却凝固后，细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封闭，在2
单细胞培养培养方法介绍看护培养法
有些植物细胞，一旦分离出来，不仅不能分裂、增殖，还可能死亡。看护培养法是用一块愈伤组织来哺育单细胞，使其正常分裂和增殖的培养方法。用微量移液管或小勺，将来自悬浮培养物或愈伤组织的单细胞转移到漂浮的定量滤纸上，滤纸下是旺盛生长的愈伤组织。几天之后，在愈伤组织看护影响下，在一般培养基中沉寂的细胞开始分裂
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上，初代培养细胞和有限细胞系（二倍体细胞）比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是，当体内任何细胞被置于体外培养后，对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用，即从培养液中摄取营养的同时，也向培养液排
二倍体细胞培养法介绍
二倍体细胞培养法与一般培养相同，关键在于传代，其传代程序为： （1）吸除旧培养液注入另瓶中。 （2）用温BSS冲洗1次。 （3）用0.25%温胰蛋白酶消化，加入消化液量以仅覆盖细胞层即可；作用1~5分钟。 （4）待细胞附着松动、细胞质边缘卷起和间隔加大，便终止
鹦鹉热衣原体的细胞培养法介绍
常见有两种方法，一种是利用HeLa229细胞或McCoy细胞等进行分离培养，另一种则是通过鸡胚卵黄囊接种培养，随后均经过姬姆萨染色或荧光染色，最终利用显微镜鉴定包涵体。 细胞分离培养一直被视为衣原体检测的标准方法。该法的敏感性显著高于鸡胚培养法，而且某标本接种细胞的盲传培养可提高分离率。衣原体
大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法
大鼠星型胶质细胞培养可以：（1）用于神经系统发育、分化及再生等基础研究；（2）脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究；（3）脑损伤和脑疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后，作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定，应用缺氧D-Hanks'液及缺
单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法
用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法，称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同，可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面，采用静止培养的方式，适用于各种器官和组织的培养。深层
小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法
小鼠胚胎干细胞培养可以：（1）细胞保种；（2）用于干细胞研究；（3）用于细胞生理学、形态学等研究；（4）动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步
单细胞培养培养方法介绍微室培养法
人工制造一个小室，将单细胞培养在小室中的少量培养基上，使其分裂、增殖形成细胞团的方法，称为微室培养法，亦称为双层盖玻片法。其操作是将携带1个细胞的1滴培养基置于无菌载玻片上，并用无菌矿物油包围培养基液滴。再分别在培养基液滴的两侧滴1滴矿物油，在每一矿物油滴上放一张盖玻片。然后，把第三张盖玻片放在培养
特殊细胞培养实验_加支持物培养法
实验方法原理加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物，进行培养的方法。待细胞贴附于支持物生长增殖后，可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从瓶中抽出，能做各种技术处理，是研究工作中常用的方法之一。各种对细胞无毒性的如玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等，均可做支持物
神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法
实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1. 选用生后1周的新生大白鼠，用碘酒,酒精棉球消毒，断头取其大脑皮层组织。 2. 解剖显微镜下，剥离脑膜，切除大脑髓质部分。 3. 将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
混合淋巴细胞培养(3HTdR掺入法)
实验概要熟悉混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte cultue，MLC)的原理；掌握分离淋巴细胞的方法；学习用同位素标记进行混合淋巴细胞培养的操作方法。实验原理混合淋巴细胞培养或称混合淋巴细胞反应（MLR）是将二个无关个体的淋巴细胞混合在一起培养，由于二者的淋巴细胞膜上的组织相容性抗原