细胞活性定磷比色法定量检测试剂盒前的实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。一、 样品准备1. 准备好 25cm2细胞培养瓶或 60mm细胞培养皿的待测培养细胞(5 X 106细胞)2. 小心加入 xx 毫升预冷的 SBJ 清理液(试剂 A),覆盖生长表面3. 小心抽去清理液4. 使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞5. 加入 xx 毫升 SBJ 清理液(试剂 A),混匀细胞6. 移入到预冷的 15 毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)7. 放进 4℃台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g8. 小心抽去上清液9. 加入 xx 微升S B J 裂解液(试剂 B),充分混匀10.转移到预冷的 1.5 毫升离心管11.强力涡旋震荡 15 秒12.置于冰槽里孵育 30 分钟13.放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟,速度为 16000g(或 13000RPM)14.小心移取 500 微升上清液到新的预......阅读全文
细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒...
细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明主要用途YIJI细胞诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过诱导型一氧化氮合成酶、硝酸还原酶和乳酸脱氢酶反应系统,在诱导型一氧化氮合成酶特异性抑制剂存在与否的情况下,由底物L-精氨酸
培养细胞的活力测定(四唑盐比色法)
培养细胞活力测定是肿瘤体外研究中应用最广的技术手段之一。任何培养瓶内生长的细胞都由死细胞和活细胞组成,从形态上区别死、活细胞是困难的。方法:四唑盐(MTT)比色法四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝四唑盐比色法的原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶干水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,
细胞色素P450的光谱测定——比色法
实验材料肝微粒体蛋白试剂、试剂盒磷酸缓冲液Tris缓冲液蒸馏水仪器、耗材试管试管架比色池双光速分光光度计微量注射器针头单光束紫外分光光度计细胞色素P450(cytochromeP450或CYP450,简称CYP450)为一类亚铁血红素—硫醇盐蛋白的超家族,它参与内源性物质和包括药物、环境化合物在内的
Cell解密:细胞形态由谁定?
生物发育是一个混乱的事件。 发育中的细胞具有各种各样的形态。它们有可能像烙饼那样扁平,像立方体一样呈等边形,或是像软管一样细而长。发育胚胎是由不同大小的卵子所生成,并且它们往往是在动态环境中生长发育。由于有性生殖和随机突变,它们具有各种各样的遗传标记。更奇怪的是,细胞内的遗传回路已知是嘈杂且容
外周血B细胞的检测_活性B细胞检测
实验步骤展开
细胞自噬与细胞活性之间的关系
细胞自噬是指在自噬相关基因的调控下,利用溶酶体降解自身受损的细胞器及大分子物质的过程,以此维持细胞自身的需要及细胞器的更新。一、细胞自噬的基本概念及特征1、自噬的过程细胞质中的线粒体等细胞器首先被称为“隔离膜”的囊泡所包被,这种“隔离膜”主要来自于内质网和高尔基体;囊泡逐渐闭合最终形成双层膜结构,即
趋化活性测定法测定细胞因子活性
具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微
趋化活性测定法测定细胞因子活性
具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微
我国学者使用黑磷开发全新生物活性磷基药物疗法
近日,中国科学院深圳先进技术研究院喻学锋研究员课题组在开发天然生物活性纳米化疗药物领域取得新进展。相关工作“Rediscovery of Black Phosphorus: Bioactive Nanomaterials with Inherent and Selective Chemother
有机磷急性中毒家兔乙酰胆碱酯酶活性变化
实验概要了解有机磷中毒的症状,观察阿托品和解磷定对有机磷中毒解救的效果及乙酰胆碱酯酶活性变化。实验原理有机磷是剧毒农药,可抑制胆碱酯酶,使体内积聚大量的乙酰胆碱,导致M、N样症状;阿托品和解磷定可分别解除M样症状和恢复酶的活性,可达到解救目的。主要试剂0.2% (V/V) DDV (敌敌畏)1mg
碘解磷定注射液的用法用量及不良反应
用法用量 成人常用量。静脉注射一次0.5〜1g (1〜2支),视病情需要可重复注射。 不良反应 注射后可引起恶心、呕吐、心率增快、心电图出现暂时性S-T段压低和Q-T时间延长。注射速度过快引起眩晕、视力模糊、复视、动作不协调。剂量过大可抑制胆碱酯酶、抑制呼吸和引起癫痫发作。口中苦味和腮腺肿
组织溶酶体脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量检测试剂盒
组织溶酶体脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 组织溶酶体脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过溶酶体脂酶反应系统中,在选择性抑制剂存在与否的情况下,底物胆固醇油酸酯水解后的游离脂肪酸,与醋酸铜反应后的蓝绿色产物,呈现吸光峰值的变化,即
目视比色法和光电比色法的对比
与目视比色法相比,光电比色法消除了主观误差,提高了 测量准确度,而且可以通过选择 滤光片和 参比溶液来消除干扰,从而提高了选择性。光电比色计和紫外-可见分光光度计的光路结构非常相似,它们之间所不同的地方在于:①分光光度计采用棱镜或光栅作 色散元件,因而可以得到纯度较高的单色光束。而光电比色计采用
目视比色法与光电比色法的介绍
目视比色法常用的目视比色法是标准系列法,该法采用一组由质料完全相同的玻璃制成的直径相等、体积相同的比色管,按顺序加入不同量的待测组分标准溶液,再分别加入等量的显色剂及其他辅助试剂,然后稀释至一定体积,使之成为颜色逐渐递变的标准色阶。再取一定量的待测组分溶液于一支比色管中,用同样方法显色,再稀释至相同
红细胞丙酮酸激酶活性
红细胞丙酮酸激酶活性介绍: 丙酮酸激酶为四聚体,是提供红细胞能量的重要的酶。缺乏此酶,红细胞因能量消耗而破坏。采用比色法。红细胞丙酮酸激酶活性正常值: a)比色法:10.1~20U/gHb; b)荧光斑点法:阴性。 红细胞丙酮酸激酶活性临床意义: 本试验可作为丙酮酸激酶缺陷的诊断试验。 红
豌豆干细胞的活性化剂
缩氨酸是2到50个氨基酸连接的聚合物,它是由多种与人体机能有关的氨基酸组成的大分子,通常分子量在3000以下。豌豆干细胞缩氨酸是从豌豆干细胞中提取的,又叫做水解豌豆蛋白质。这种物质对人体表皮干细胞起活性化作用,因此被称为豌豆干细胞活性化剂。 利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将豌豆干细胞缩氨酸
Cell:癌基因控制干细胞活性
近日,刊登在国际杂志Cell上的一项研究论文中,来自海德堡干细胞研究所等机构的研究人员通过对胚胎干细胞进行研究发现了可以控制胚胎发育暂停的因子。我们都知道,在很多类型的癌症中都会产生大量的MYC(癌基因),而且MYC产生地越多,肿瘤的恶性程度就会愈发明显。 研究者指出,MYC同样在胚胎干细胞中
LSCM细胞内活性氧基
细胞内活性氧基 活性氧(active oxygen species)可影响细胞代谢,与蛋白质、核酸、脂类等发生反应,有些反应是有害的,因此测量活性氧在毒理学研究中有一定的意义。根据检测活性氧的不同可选择不同的荧光探针。常用荧光探针有Dichlorodihydrofluorescein diaceta
细胞活性检测DNA合成增殖实验
BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程
自然杀伤细胞活性测定方法介绍
【概述】自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,它不依赖抗体和补体,即能直接杀伤靶细胞,如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等;此外,尚有免疫调节功能,也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。【参考值】51Cr释放法:自然释放率
辅佐细胞的免疫活性介绍
1.抗原递呈作用辅佐细胞能够以容易识别的方式将抗原递呈给T细胞,从而使T细胞活化;具有这项功能的细胞统称为抗原呈递细胞(antigen-presentingcell,APC)。APC通常指那些表达MHCⅡ类分子、可向TH细胞递呈抗原的细胞,一般情况下用作辅佐细胞的代名词。还有一类细胞可将表面抗原与M
-Cell:癌基因控制干细胞活性
近日,刊登在国际杂志Cell上的一项研究论文中,来自海德堡干细胞研究所等机构的研究人员通过对胚胎干细胞进行研究发现了可以控制胚胎发育暂停的因子。我们都知道,在很多类型的癌症中都会产生大量的MYC(癌基因),而且MYC产生地越多,肿瘤的恶性程度就会愈发明显。 研究者指出,MYC同样在胚胎干细胞中
MTT法细胞活性检测实验步骤
MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途:
什么是NK细胞活性测定呢
NK细胞具有ADCC,能直接杀伤肿瘤细胞,故将单个核细胞与肿瘤细胞共同培养,肿瘤细胞存活率低,NK细胞的活性则高。测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。 体外检测NK细胞活性的方法有形态学法、酶释放法、放射性核素释放法、化学发光法、流式细
分光光度计对土壤速效磷的测定
分光光度计对土壤速效磷的测定:磷存在与人体所有细胞中,是维持骨骼和牙齿的必要物质,几乎参与所有生理上的化学反应。磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。 一、前沿掌握比色法测定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。掌握土壤速效磷
单核巨噬细胞系统的细胞的分泌活性
MPS细胞是一类重要的分泌细胞。在许多组织和器官中,MPS细胞是分泌性蛋白的主要来源,其分泌物种类之多在体内仅肝细胞才能与之相比。一般情况下,活化的MPS细胞才有活跃的分泌能力。现已发现MPS细胞可分泌多达100种以上的酶类和其他生物活性物质。这些物质的分子量不一,从分子量仅32的超氧阴离子至分
分光光度计测定土壤速效磷
摘要:磷存在与人体所有细胞中,是维持骨骼和牙齿的必要物质,几乎参与所有生理上的化学反应。磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。 一、前沿掌握比色法测定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。掌握土壤速效磷的浸提,浸提液的处理,
分光光度计测定土壤速效磷
磷存在与人体所有细胞中,是维持骨骼和牙齿的必要物质,几乎参与所有生理上的化学反应。磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。 一、前沿掌握比色法测定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。掌握土壤速效磷的浸提,浸提液的处理,标准曲
农药残留速测的三种方法
农药残留速测技 术酶抑制法是利用有机磷农药的毒理特性建立的一种快速检测农药残留的方法。在一定条件下,有机磷农药对某些酷酶催化水解的正常功能有一定的抑制作用,其抑 制率的大小与农药的浓度呈正相关。这些酷酶包括:各种动物来源的乙酞胆碱酷酶和丁酞胆碱酷酶以及从某些植物中提取的植物酷酶。让酶与样本萃取液或溶
概述酸性磷酸酶活性与有机磷的有效性
磷饥饿条件下, 植物被诱导分泌酸性磷酸酶;另一方面, 植物根系分泌酸性磷酸酶活性的增加又能够水解释放土壤中的有机磷化合物供植物生长。在植物体内, 酸性磷酸酶主要累积在液泡中, 大量研究表明, 酸性磷酸酶在调控植物磷营养方面有着非常重要的作用, 它在有机磷的代谢及再利用过程中也起着十分重要的作用,