环介导等温扩增技术的原理与应用
原理与应用环介导等温扩增（Loop-Mediated Isothermal Amplification，LAMP）技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术，该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应，该方法能够在1h内就可以将靶基因扩增109倍，当靶基因为RNA时，该方法还可以通过在反应体系中添加反转录酶而实现对RNA的扩增；在LAMP反应中，会有大量的DNA合成，因此会产生很多焦磷酸根离子，这些焦磷酸根离子可以结合溶液中的二价Mg2+形成不容的焦磷酸盐，便于对反应结果的观测，使扩增和检测一步就可以完成，大大提高检测效率。1.1 LAMP反应的基本原理该技术根据靶基因的6个区域设计出4条引物，包括两条内引物和两条外引物（如下图），其中内引物由靶序列正义链和反义链的两个特异区域组成，利用DNA链在60-65℃的恒温条件下处于解链和退火的动态平衡状态，在DNA聚合酶......阅读全文
RPA（重组酶聚合酶扩增）技术原理及RPA与LAMP对比
英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年，基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增，开发的重组酶聚合酶扩增ZL技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。(http://www.twistdx.co.uk)
京检科院快速检测禽流感技术通过验收
4月12日，记者从北京出入境检验检疫局获悉，由北京市检科院研发的禽流感新检验方法——LAMP快速检测技术已通过验收，技术人员在两个小时内就可以检测出禽流感病毒。据介绍，新检测方法比老方法用时缩短一半，且检验成本较低，未来将在基层检疫机构和养殖场推广。 新检测方法学名为环介导等温扩增法
恒温核酸扩增技术与传统PCR对比
和传统的PCR技术相比，恒温核酸扩增不仅仅是缩短了核酸扩增的时间，更重要的是核酸扩增摆脱了对硬件的束缚。PCR技术原理是利用94℃高温使DNA双链解开，并在耐高温的DNA聚合酶的作用下扩增DNA片段。PCR反应至少需要2个不同的温度使DNA片段得到特异性的扩增。恒温核酸扩增是利用各种酶与DNA之
研究提出幽门螺旋杆菌的高敏高精检测方法
近日，中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员李志远团队联合南方医科大学附属东莞医院，通过环介导等温扩增（LAMP）结合最新的CRISPR/Cas12a技术，提出针对高致病性幽门螺旋杆菌菌株的高敏感度检测方法。相关研究发表于Biosensors and Bioelectronics。该论文第一作
分子诊断经验篇：如何应对等温扩增时出现的假阳性问题
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术，从诞生之日起就不断受到研究者的青睐，但也少不了唏嘘、质疑，甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是，在建立方法或者实际样本检测的过程中，等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高，使得其实际应用范围变窄，未能真正显
教你怎样快速鉴别温和气单胞菌与嗜水气单胞菌
今天给大家介绍气单胞菌属的另一个具有运动性的细菌——温和气单胞菌（Aeromonas sobria，As）温和气单胞菌的生长特性温和气单胞菌属于弧菌科，产气单胞属，革兰氏阴性菌，菌体呈短杆状，单侧有鞭毛，具有运动性，无荚膜，无芽孢。在普通琼脂培养基生长良好，菌落呈白色和浅黄色半透明的圆形，边缘整齐，
Echo声波移液技术的原理与应用优势
声波移液Echo——实现单日75万样本的转移，超20家全球知名药企都在用生物技术发展到如今，各种灵敏的检测方式层出不穷，例如新一代测序技术、质谱技术、荧光定量PCR技术等等。那您的样品处理方式是不是也够“灵敏”呢？您是不是总是扩大反应体系以消除因移液导致的误差？您是不是总是因为试剂成本太高，而降低检
恒温核酸扩增技术的扩增速度
由于恒温核酸扩增只需要在一个温度下进行，相比较于PCR不同温度之间的循环，恒温扩增不需要反复的升温降温过程，有些恒温扩增的速度是快于PCR的扩增速度的。例如：环介导恒温核酸扩增（LAMP），重组聚合酶扩增法（RPA）以及切刻内切酶恒温扩增（NEAR）。目前英国公司optigene已经成功的改造了
等温滴定量热仪应用范围
蛋白质-蛋白质相互作用(包括抗原-抗体相互作用和分子伴侣-底物相互作用)；蛋白质折叠/去折叠；蛋白质-小分子相互作用以及酶-抑制剂相互作用；酶促反应动力学；药物-DNA/RNA相互作用；RNA折叠；蛋白质-核酸相互作用；核酸-小分子相互作用；核酸-核酸相互作用；生物分子-细胞相互作用；……加样体积：
实时荧光定量－PCR技术原理与应用（二）
SYBR Green I 在核酸的实时检测方面有很多优点，由于它与所有的双链 DNA 相结合，不必因为模板不同而特别定制，因此设计的程序通用性好，且价格相对较低。利用荧光染料可以指示双链 DNA 熔点的性质，通过熔点曲线分析可以识别扩增产物和引物二聚体，因而可以、区分非特异扩增，进一步地还可
生物质谱技术原理及其应用与展望
生命科学被誉为21世纪的最前沿科学之一，随着人类第一张基因序列草图的完成和发展，生命科学的研究也将进入一个崭新的后基因组学，即蛋白质组学时代。正如基因草图的提前绘制得益于大规模全自动毛细管测序技术一样，后基因组研究也将会借助于现代生物质谱技术等得到迅猛发展。本文拟简述生物质谱技术及其在生
实时荧光定量－PCR技术原理与应用（一）
实时荧光定量 PCR技术原理与应用聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后，我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析，也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 。无论定性还是定量分析，分析的都是 PCR 终产物。但是
仅需唾液！幽门螺旋杆菌的高敏高精检测新方法
中国科学院广州生物医药与健康研究院李志远团队通过环介导等温扩增(LAMP)结合最新的CRISPR/ Cas12a技术，提出针对高致病性幽门螺旋杆菌菌株的高敏感度检测方法。该方法仅需检测唾液样本，就能快速精准检测出感染该菌株的阳性病人，相关研究成果近日以Harnessing enhanced CR
基因扩增技术的技术特点
特异性高首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段，其酶活性在90℃会变性失活，需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段，同时引物是在37℃延伸（聚合）易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差，1988年Saiki等从温泉水中分离到的水
LAMP技术两小时内检测出禽流感病毒
记者昨天从北京出入境检验检疫局获悉，由北京市检科院研发的禽流感新检验方法——LAMP快速检测技术已通过验收，技术人员在两个小时内就可以检测出禽流感病毒。据介绍，新检测方法比老方法用时缩短一半，且检验成本较低，未来将在基层检疫机构和养殖场推广。 新检测方法学名为环介导等温扩增法，是集靶核酸扩
基因组DNA提取与PCR扩增技术
一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。实验原理 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子键、氢键、范德华力等，破坏或降低这些结合力就可把核酸与蛋白分开。 DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶
核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)
SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术，采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中，该探针被掺入到双链扩增产物中，由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开，从而释放荧光，用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率，耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内
扩增敏感仪的应用
中文名称扩增敏感仪英文名称amplisensor定 义一种实时定量分析仪。即根据荧光能量转移理论，检测互补核苷酸间双螺旋形成，可用于以PCR为基础的检测。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
多彩色荧光原位杂交技术的原理与应用
mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术，它不仅具有FISH的优点，而且克服了FISH的许多局限，其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个基因，分辨复杂的染色体易位和微小缺失，区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发
DNA纤维荧光原位杂交技术的原理与应用
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度，如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化，再以此为载体进行FISH，使其分辨率显著提高，这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术，将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
twistDx－的重组酶聚合酶扩增（RPA）技术原理
twistDx 的重组酶聚合酶扩增（RPA）将彻底改变在资源有限的现场环境中扩增和检测核酸的能力。RPA 技术原理RPA 体系的重点是重组酶，这些酶与寡核苷酸引物形成复合体，并使引物与双链 DNA 中的同源序列配对。单链 DNA 结合（SSB）蛋白与被取代的 DNA 链结合，并使形成的 D 环保
依赖核酸序列的扩增技术简述
该技术的检测反应有赖于AMV逆转录酶、噬菌体T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、两种特别设计的特异性寡核苷酸引物和分子信标探针共同协作而完成。 NASBA全称是nucleic acid sequence-based amplification，即依赖核酸序列的扩增技术。 依赖核酸序列的扩增技术，是
基因扩增PCR的扩增与克隆方法介绍
①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守区,且与非扩增区无同源序列。这样可以减少引物与基因组的非特异性结合,提高反应的特异性 ②引物长度:15-40bp为宜。引物过短或过长均可使反应的特异性下降。 ③引物的碱基尽可能随机发布,避免出现数个嘌呤或嘧啶的连续排列,G+C碱基的含量在40%-75%
等温滴定量热仪的技术指标
短期噪音水平：0.5纳卡/秒 (2 纳瓦)。 基线重复性：优于±20纳瓦/小时 。 工作温度： 2 ℃ 到 80 ℃。 最小响应时间： 17秒 可选择化学反应的响应时间： 多种选择（ZL技术） 。 搅拌速度有多种选择。 控温方式：Peltier电子控温方式，快速达到控制温度，不需水浴。
基因扩增技术的定义
又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域
基因扩增技术的优点
特异性高首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从温泉水中分离到的水
四川非洲猪瘟综合防控技术攻关取得重要进展
四川聚焦非洲猪瘟综合防控，依托四川大学等单位开展防控关键技术攻关，取得阶段性重要进展。一是早期诊断技术取得新突破。建立非洲猪瘟RPA快速诊断方法，研制非洲猪瘟病毒抗原高敏荧光检测试剂盒，其中，非洲猪瘟镧系荧光快速诊断检测方法及试剂盒达国际先进水平，试剂盒在四川省、国内多个省（市）和韩国推广应用，
PCR原理与应用
聚合酶链反应(PolymeraseChainReactionm,PCR)是一项体外基因扩增技术,1985年美国PE公司人类遗传研究室发明了该项技术,Saiki等首先应用于镰状红细胞贫血的产前诊断,但由于操作方法繁琐未能全面推广应用。直到1988年耐热DNA聚合酶(Taq酶)的发现和应用,使PCR技术
PCR基因扩增原理
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每1
牛顿环的应用
判断透镜表面凸凹、精确检验光学元件表面质量、测量透镜表面曲率半径和液体折射率。在加工光学元件时，广泛采用牛顿环的原理来检查平面或曲面的面型准确度。应用于光谱仪、把复合光分离成单色光的组成。