新一代SPR技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用(一)

EF手性对突变钙调蛋白与一氧化氮合酶结合域肽段相互作用研究一氧化氮合酶(NOS)是一种非常重要的生物小分子NO合成催化酶,一氧化氮合(NOS)包括三个同型酶:神经酶(nNOS), 和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。每种酶产生的NO分别用于神经传递、血管舒张和免疫应答.一氧化氮合酶是通过钙调蛋白结构阈将N末端氧化酶结构域和c-末端结合域形成的同源二聚体蛋白。一氧化氮合酶(NOS)能催化L-精氨酸生成NO及在几个关键的生理过程中起主要作用,钙调蛋白(CaM)是小的泛素化Ca+2偶联蛋白,用于激活(NOS);钙调蛋白通过EF手性变化与Ca+2结合,但钙调蛋白激活NOS的机制还不完全清楚.目前用于CaM与NOS 相互作用研究方法较为复杂、耗时。为此,加拿大waterloo大学的John通过niocya 公司最新开发的LSPR 实时无标记检测技术分析了不同手性对突变的CaM与NOS相互作用,对比CaM与N......阅读全文

新一代SPR-技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用(一)

EF手性对突变钙调蛋白与一氧化氮合酶结合域肽段相互作用研究一氧化氮合酶(NOS)是一种非常重要的生物小分子NO合成催化酶,一氧化氮合(NOS)包括三个同型酶:神经酶(nNOS), 和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。每种酶产生的NO分别用于神经传递、血管舒张和免疫应答

新一代SPR-技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用(二)

蛋白结合分析:将NOS固定OpenSPR的纳米金芯片表面,并对CaM做浓度梯度检测,结果导入TraceDrawer分析。(图4 )OpenSPR实时检测,梯度稀释后不同浓度检测出野生型CaM对nNOS(红线)和eNOS 肽(紫红线)的结合情况,观察结合、解离及再生的整个过程,结果显示实验曲线稳定及信

LSPR技术在检测钙调素与NO合成酶靶向肽偶联动力学中的...

LSPR技术在检测钙调素与NO合成酶靶向肽偶联动力学中的应用新一代SPR创新技术应用典型 :LSPR技术在检测钙调素与NO合成酶靶向肽偶联动力学中的应用钙调素(CaM) 是一个小分子的酸性  Ca2+ 偶联蛋白,参与很多的生理过程,钙调蛋白可以与很多不同的蛋白质结合,因此影响了细胞功能的方方面面。钙

质谱技术在蛋白组研究中的应用(一)

[摘要] 质谱对于现代蛋白质化学研究是一项重要的技术。也可用于蛋白组分析,在同一时间监控上千种蛋白的表达情况。首先蛋白质混合物可以用双向凝胶电泳分开,再用质谱及随后的蛋白质数据库检索对单个蛋白进行鉴定和分析。最近几年,质谱领域取得了令人鼓舞的进展,使得全自动、高通量的蛋白检测成为可能。质谱也

Gradiflow-技术在蛋白质分离研究中的应用(一)

电泳是现代蛋白质研究常用和有效的工具,但是电泳过程中所产生的热量对蛋白质结构的破坏,以及目的蛋白从蛋白胶或其他介质中低的回收效率等等问题,常常让蛋白质更深入的研究戛然而止,而Gradiflow 技术的应用解决了研究者头疼的难题 ! Gradiflow 技术要点可以简单概括为如下几点:1. 应用不同孔

钙调蛋白的定义

  钙调蛋白(calmodulin, CaM)又称钙调素,是一种普遍存在于各种真核细胞内,并能与钙离子结合的多功能蛋白质。   钙调蛋白参与细胞内多种信号转导途径,并在Ca2+依赖性信号转导途径中起到关键作用,是动态Ca2+传感器,能够响应广泛的Ca2+浓度,并向下游传递信号。  钙调蛋白分子是由

钙调蛋白基本介绍

  Ebashi 等在 1965 年报道了细胞中存在介导钙信号的钙结合蛋白,随后 Cheung 将这一类能结合钙离子的磷酸二酯酶(PDE)激活蛋白命名为“钙调蛋白”(calmodulin,简称 CaM)。 [4]  钙调蛋白是一种广泛存在于真核细胞中,进化上高度保守的一类钙离子受体蛋白。钙调蛋白是由

​钙调蛋白的功能特点

钙调蛋白是细胞第二信使系统的重要成分,在Ca信号系统传导中起着关键的作用,调控生理代谢及基因表达,控制细胞正常的生长和发育。钙调蛋白作为第二信使在植物信号转导中的作用一直是植物生理、细胞生物学和发育生物学研究的热点。Ca/CaM是有机体进化过程中最保守的信号转导级联反应系统,这一信号途径广泛存在于真

天平与砝码的调修在实际中的应用

天平与砝码的调修在实际中的应用质量计量的发展是人类社会发展的结果,zui早出现在什么时间尚未没有明确的说法。目前,只知道zui新zui早的质量计量器具是天平。而砝码早在1889年就选定了铂铱合金圆柱体,要求成分是90%铂,10%铱直径和高均为39mm的圆柱体,作为国际原器。质量计量是整个计量工作的一

钙调蛋白的溴化氰裂解实验

钙调蛋白的溴化氰裂解实验             试剂、试剂盒 甲酸 纯的钙调蛋白 溴化氰

钙调蛋白的溴化氰裂解实验

试剂、试剂盒甲酸纯的钙调蛋白溴化氰乙腈实验步骤材料甲酸(市售最髙级(如AldrichChemicalCo.,Inc.)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶体)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Baker)

关于钙调蛋白的结构介绍

  钙调蛋白的外形似哑铃,有两个球形的末端,中间被一个长而富有弹性的螺旋结构相连,长度为 6.5nm,每个末端有两个Ca2+结构域,每个结构域可以结合一个Ca2+,这样一个钙调蛋白可以结合4个Ca2+ ,每个位点都是由12个氨基酸残基组成的套环,门冬氨酸和谷氨酸的侧链提供 Ca2+结合基团。其中C端

钙调蛋白的溴化氰裂解实验

试剂、试剂盒 甲酸纯的钙调蛋白 溴化氰乙腈实验步骤 材料甲酸(市售最髙级(如AldrichChemicalCo.,Inc.)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶体)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Bak

新一代测序在癌症中的临床应用

  一提起癌症,人们往往谈虎色变。的确,癌症是全球发病和死亡的主要原因。据WHO统计,2012年有820万例癌症相关的死亡。所幸,DNA测序技术的快速发展正在改变我们对癌症的认识,也在转变癌症的筛查、诊断和治疗。  如今,新一代测序主要应用在癌症预防和治疗中的哪些方面?美国罕见病基因组研究所的研究人

新一代测序在癌症中的临床应用

  一提起癌症,人们往往谈虎色变。的确,癌症是全球发病和死亡的主要原因。据WHO统计,2012年有820万例癌症相关的死亡。所幸,DNA测序技术的快速发展正在改变我们对癌症的认识,也在转变癌症的筛查、诊断和治疗。  如今,新一代测序主要应用在癌症预防和治疗中的哪些方面?美国罕见病基因组研究所的研究人

新一代测序在癌症中的临床应用

一提起癌症,人们往往谈虎色变。的确,癌症是全球发病和死亡的主要原因。据WHO统计,2012年有820万例癌症相关的死亡。所幸,DNA测序技术的快速发展正在改变我们对癌症的认识,也在转变癌症的筛查、诊断和治疗。如今,新一代测序主要应用在癌症预防和治疗中的哪些方面?美国罕见病基因组研究所的研究人员不久前

新一代Fluidigm-微流体芯片PCR技术在农业中的应用

通过对单核苷酸多态性(SNP)的筛查,对育种分类,鉴定,改良,及进行动植物管理, 为现代农业带来巨大改变。但采用有关方法前, 需要对物种进行大规模的筛选研究。市场上Affymetrix公司提供的芯片可扫描500,000到900,000个SNPs位点而Illumina公司 的BeadChips

激光衍射技术在吸入制剂研究中的应用(一)

1. 引言通过吸入方式将药物直接输送到人体肺部,已是世界公认的哮喘和慢性阻塞性肺病的最好治疗方法。而肺部及呼吸道也可作为一个通道,递送的药物通过气道表面进入人体血液系统,然后再进入到身体其他器官,达到全身见效的目的。然而影响药物在肺部及呼吸道沉积的因素有很多,其中气雾的粒度大小分布就是最重要的影响因

激光衍射技术在吸入制剂研究中的应用(一)

通过吸入方式将药物直接输送到人体肺部,已是世界公认的哮喘和慢性阻塞性肺病的最好治疗方法。而肺部及呼吸道也可作为一个通道,递送的药物通过气道表面进入人体血液系统,然后再进入到身体其他器官,达到全身见效的目的。然而影响药物在肺部及呼吸道沉积的因素有很多,其中气雾的粒度大小分布就是最重要的影响因素之

研究分子互作——Nicoya-SPR-技术的新应用案例

Nicoya SPR数据让您的文章更上一层楼!2016年,加拿大滑铁卢大学的Dr. Dieckmann和他的团队用核磁共振波谱法检测最低CaM浓度和逐渐增加的CaM浓度与NOS肽结合的构象,并结合SPR技术,发现当CaM浓度增加时,相互作用的强度也增强了,并导致了蛋白构象变化。SPR数据在确定相互作

质谱技术在蛋白组研究中的应用(二)

6 质谱仪的最新进展 用质谱检测蛋白,首先考虑到用PMF与 MALDI-TOF联用,如果无法检测,下一步就用ESI-MS/MS创建序列标签。在PMF分析中,MALDI的平板中只需一小部分样本就足以检测,剩下的样本就可以用来创建序列标签。并且,在MALDI-TOF仪器上,用一种叫做“源后延迟”

Gradiflow-技术在蛋白质分离研究中的应用(二)

2. 蛋白质组预分离2DE是研究者常用的蛋白质组分析方法,这种方法很有用,但是它的限制因素在实验过程中逐渐呈现出来,比如一些膜蛋白,高分子量和低分子量的蛋白质,就很难用2DE检测出来。特别是一些蛋白样品中包含高丰度的蛋白质,这样就很有可能将研究者感兴趣的蛋白质掩盖,在2DE图谱上体现不出来,从而减少

钙调蛋白调节微管解聚简介

  微管的组装需要微管结合蛋白和 Tau因子的共同作用,由于依赖于钙调蛋白激酶的底物而彻底被磷酸化,导致微管解聚。当体系中存在一定的 Ca2+的时候,钙调蛋白就会与微管 Tau 因子竞争结合,微管的聚合就会被抑制,细胞的生理活动恢复正常。利用显微注射法注入钙调蛋白,可以有效的延长有丝分裂中期持续的时

钙调蛋白样品的测活实验

试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液 MLCK 酶磷酸丙酮(任选)MLCK 测活缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管 Whatman*P81 磷酸纤维素纸(切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机(任选)实验步骤 材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽(10m

钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验

钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验             试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)

钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验

试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截留分子量

关于钙调蛋白的作用机理介绍

  钙调蛋白分子本身无酶的活性,在无Ca2+的情况下,也无生物学活性;但在胞内Ca2+结合后,钙调蛋白发生构型上的变化,暴露疏水区,疏水区与依赖于 钙调蛋白的靶酶相互作用而调节酶的活性。 [4] 作为一个多功能的Ca2+传感器,钙调蛋白能够应对不同Ca2+浓度。结合Ca2+后,钙调蛋白会发生构象转变

钙调蛋白样品的测活实验

试剂、试剂盒MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液MLCK 酶磷酸丙酮(任选)MLCK 测活缓冲液仪器、耗材聚丙烯微量离心管Whatman*P81 磷酸纤维素纸(切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机(任选)实验步骤材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽(10mmol/L

钙调蛋白样品的测活实验

钙调蛋白样品的测活实验             试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽 ATP 钙调蛋白储液

钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验

试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材 透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱 蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤 材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截