使用细胞分离试剂盒的过程中提升细胞释放效率的技巧
使用 Invitrogen Dynabeads™Flowcomp™细胞分离试剂盒的过程中提升细胞释放效率的技巧·由于DSB-X 生物素-链霉亲和素之间的结合随着时间延长而逐渐变强;因此不要将释放步骤的时间延长至实验方案中规定的时间以上。在某些案例中,更短的孵育时间会获得更高的得率。·在与解离试剂孵育后,我们推荐您在将样本放置到磁力架上之前,使用1 mL枪头吹打样品10次以上,以充分重悬样本。......阅读全文
使用细胞分离试剂盒的过程中提升细胞释放效率的技巧
使用 Invitrogen Dynabeads™Flowcomp™细胞分离试剂盒的过程中提升细胞释放效率的技巧·由于DSB-X 生物素-链霉亲和素之间的结合随着时间延长而逐渐变强;因此不要将释放步骤的时间延长至实验方案中规定的时间以上。在某些案例中,更短的孵育时间会获得更高的得率。·在与解离试剂孵育
提升CELLLection™释放步骤效率的通用技巧
·请确保RPMI+1% FBS的pH值不要太高:DNA酶I在pH 7.0–7.4之间的效率最高(RPMI暴露于大气环境中会导致pH值增加,pH指示剂会变紫)。·请勿在DNA酶I的处理过程中使用RPMI+10% FCS。应用10%的FBS会比1%的FBS获得的细胞得率更低(可能由于一些批次的FBS中含
在阴性分离过程中提升最终分选效率/得率的技巧
·样本制备:所有的分离操作都必须在单细胞悬液中进行。·请确保使用了正确的细胞数量,稀释倍数和抗体混合物体积,Dynabeads™磁珠和缓冲液系统。·在混匀步骤使用HulaMixer™样品混合器(目录编号15920D)以确保分离操作中的混合效果良好。·在接触磁力架前的最后操作步骤中,用户须使用1 mL
DETACHaBEAD™产品的使用过程中提升细胞得率的技巧
·在使用前将DETACHaBEAD™溶液彻底混匀。·获得良好得率最为关键的参数是在孵育过程中DETACHaBEAD™溶液与样品的混匀效果。我们推荐用户采用能够持续维持管体运动状态、并让样品保持在管底以避免磁珠变干的混合器或旋转仪(如HulaMixer™样品混合器(目录编号15920D))。·减少细胞
使用任意一款阳性分离试剂盒分离细胞的过程中怎样才...
使用任意一款阳性分离试剂盒分离细胞的过程中怎样才能提升细胞得率?·样本制备过程非常重要。所有的分离操作都必须在单细胞悬液中进行。对于直接从全血样本中分离某一类型细胞(如单核细胞)的操作而言,我们推荐您在分离前对血样进行洗涤,以去除其中的干扰因素。·对于指定了“混匀”操作的所有孵育过程而言,必须使用一
离心机分离细胞过程中细胞所处的状态
组织经酶解消化后游离出来,细胞的表面通常很脆,易于破裂,分离过程中要尽可能使细胞处于悬浮状态,如处于梯度的屏障层上。如果细胞经离心形成沉淀,在重悬过程中由于剪切作用对细胞可能会有不同程度的损伤。在采用漂浮法分离时,都会应用蛋白水酶解,例如胰蛋白酶、胶原酶等。在随后的清洗
对提升阴性分离法的靶细胞纯度的建议
·良好的回收和纯度基于高质量的MNC制备,其中颗粒细胞和血小板的数量要低。·在混匀步骤使用HulaMixer™样品混合器(目录编号15920D)以确保有足够的抗体与靶细胞相结合。·在抗体结合步骤之后对细胞进行良好的洗涤,以去除未结合的抗体。·2X rosetting方案能够提升细胞纯度,而不增加分离
动物骨髓中性粒细胞分离液试剂盒使用说明
各种动物骨髓中性粒细胞分离液试剂盒规格:200 mL/kit保存:本产品对光敏感,应该室温避光储存,保质期 2 年。无菌开封后,保存于室温。试剂盒组成:试剂A 200mL试剂C 100mL细胞洗涤液 200mL全血及组织稀释液 200mL红细胞裂解液 100mL操作步骤:制备骨髓的单细胞悬液。细胞悬
台式高速大容量离心机分离细胞过程中细胞所处的状态
生物组织经酶解消化后细胞游离出来,细胞的表面通常很脆,易破裂,在台式高速大容量离心机分离过程中要尽可能使细胞处于悬浮状态。如果细胞经离心形成沉淀,在重悬过程中由于剪切作用,对细胞可能会有不同程度的损伤。采用漂浮法分离时,一定要使细胞处于梯度中某一密度处,不要使细胞漂浮到梯度表面。细胞处于梯度表面即暴
台式高速大容量离心机分离细胞过程中细胞所处的状态
生物组织经酶解消化后细胞游离出来,细胞的表面通常很脆,易破裂,在台式高速大容量离心机分离过程中要尽可能使细胞处于悬浮状态。 如果细胞经离心形成沉淀,在重悬过程中由于剪切作用,对细胞可能会有不同程度的损伤。采用漂浮法分离时,一定要使细胞处于梯度中某一密度处,不要使细胞漂浮到梯度表面。细
细胞转染的效率分析
线型PEI(LinePEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成
简述细胞转染的效率
线型PEI(LinePEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于
干细胞的选择技巧
干细胞选择指示剂时,一般要求变色明显(所以一般不选用石蕊),指示剂的变色范围与恰好中和时的pH要吻合。①在酸碱中和滴定的实验中,不用石蕊作指示剂,主要原因是:石蕊的“红色→紫色”、“紫色→蓝色”的颜色变化不够明显,不利于及时、准确地作出酸碱是否恰好完全中和的判断。②强酸强碱相互滴定,生成的盐不水解,
Percoll细胞分离液的使用方法
实验概要掌握Percoll细胞分离液的使用方法。实验原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
影响细胞酶释放的因素
⒈细胞内外酶浓度的差异 对于非血浆特异酶,细胞内外浓度差可在千倍以上,因此只要有少量细胞坏死或者细胞有轻度病变,血中酶浓度就可能明显升高。有人计算过只要有1/1000肝细胞坏死,所释放的酶可使血中酶增加一倍。鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OCT)在细胞内外浓度差异可达到105:1,此酶在肝脏病变时变化极为明
使用血清细胞培养实验的操作技巧
血清是我公司的主营产品,主要用于细胞培养实验,产品种属有牛(胎牛/小牛/成牛)、人(混合血型/AB血型)、马、驴猪鸡等。今天,上海劲马为大家分享使用血清细胞培养实验的操作技巧:1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷
真菌/酵母细胞高纯线粒体分离试剂盒使用说明
主要用途 真菌/酵母细胞高纯线粒体分离试剂是一种旨在使用生物、化学和物理方法相结合,有效去除真菌/酵母菌细胞壁,进一步快速且充分裂解真菌/酵母菌细胞,从而分离出完整而高度纯化的活性线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜培养或冻存的野生型或突变型真菌/酵
动物细胞活性内质网分离试剂盒使用说明
主要用途YIJI动物细胞活性内质网分离试剂是一种旨在通过机械或化学处理和差速离心方法,从动物细胞中分离出完整的活性内质网细胞器组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种细胞(人体、动物、昆虫等)的活性内质网的制备。其制备物产量高,活性保证,可以被用于细胞色素P450系
凋亡细胞释放的代谢物激活巨噬细胞
弗吉尼亚大学的一组研究人员发现,细胞凋亡过程中释放的代谢物会诱导巨噬细胞表达参与组织修复的基因,而且它们还能抑制炎症。在他们发表在《Nature》杂志上的论文中,该小组描述了他们对细胞凋亡过程的研究以及他们所了解到的情况。 细胞凋亡是机体细胞自然死亡的过程。先前的研究表明,这是一个有序的过程,
免疫细胞的分离
免疫细胞的分离: (1)外周血单个核细胞的分离 外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同,介于1.075-1.090之间,因而可利用一种比重介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。常用的
白细胞的分离
(一)血液中红细胞与白细胞比例约600~1000:1,两者的比重不同其沉降速度亦异,通常用两种方法加以分离。 本法是利用血细胞自然沉降率的分离法,采集血液后应及时抗凝,通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶,从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静
细胞分离的定义
中文名称细胞分离英文名称cell separation定 义将组织材料分散制成细胞悬液后,从中获取目的细胞的过程。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
巨噬细胞的分离
一、从小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分离巨噬细胞1.取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。2.如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,直接从这一步
稀有细胞和少量细胞的单细胞分离
对于单细胞转录组学,单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言,高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具,但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外,细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路,从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失,就往往需要用到大量的
稀有细胞和少量细胞的单细胞分离
对于单细胞转录组学,单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言,高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具,但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外,细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路,从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失,就往往需要用
T-细胞及B-细胞的分离
将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙棉的
提高细胞转染效率的方法
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择适合实验设计的转染试剂。当然,适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。2
如何鉴定细胞的转染效率
通常是带上一个报告基因,比如绿色荧光蛋白,然后在镜下观察看发光的和不发光的细胞比
单细胞分选效率的分析
引言在单克隆细胞培养时,手动有限稀释法是最经典的分离单细胞手段之一。这种方式分离单细胞,每个孔中落进去的细胞数目符合泊松分布。依靠单细胞分选仪器分离单细胞的效率,无论从分选能力还是重复性都要明显优于手动的有限稀释方法。测定一款设备分选效率的标准方法,是用荧光校准微球来分选检验。实验方法Namocel
表皮细胞的转染实验技巧
表皮细胞广泛遍布于身体,正常的表皮细胞较难转染,尤其是使用基于脂质体技术的转染试剂。我们使用电转(Amaxa)方法转染正常人的结肠表皮细胞并得到了65%的GFP标记细胞。非常感谢SignaGen,现在我们使用GenJet Ver II可以成功转染正常人的结肠表皮细胞并且转染效率显著提高至75%。