Percoll细胞分离液的使用方法

实验概要掌握Percoll细胞分离液的使用方法。实验原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm/kg H2O),粘度也很小,可形成高达1.3g/mL密度,采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,Percoll不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。主要试剂1. 小牛血清2. Percoll细胞分离液3. 8.5%NaCl4. 1.5MPBS主要设备1. 高速冷冻离心机(3K-30)2. 4℃、-20℃冰箱3. 长针头注射器4. 1.5mL和10mL离心管实验材料PBMC细胞实验步骤1. 不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5% NaCl或1.5M PBS混合......阅读全文

Percoll梯度法染色实验

实验材料:染色质试剂、试剂盒:精胺、精咪、Percoll、溶液仪器、耗材:聚碳酸酯离心管实验步骤:1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,匀浆分离得到的染色质。Perco

染色体分离实验——Percoll梯度法

实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液:

Percoll细胞分离液的使用方法

实验概要掌握Percoll细胞分离液的使用方法。实验原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(

用-CsCl,Percoll,-Nycodenz,-metrizamide作自形成密度梯度离心-二

四)碘盐自形成梯度:( Nycodenz或 metrizamide) 这二种梯度材料在固定角式转头或垂直管转头,近垂直转头离心过程中会用较短的时间就可以自形成密度。和重金属盐一样,离心力、转头种类、离心时间对自形成梯度的形状都有很大的影响。由于碘盐的粘性系数对温度很敏感,很小的温升也会因

用-CsCl,Percoll,-Nycodenz,-metrizamide作自形成密度梯度离心-三

表(三)metrizamide及其溶液的性质(20℃)浓度密度g/ml折射率粘性渗透率百分比浓度%(W/V)Molar00.0000.99821.33301.00100.1271.05121.34831.3107200.2531.10621.36461.6180300.3801.16121.3809

用-CsCl,Percoll,-Nycodenz,-metrizamide作自形成密度梯度离心-一

用 CsCl,Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一)概述:近年来用重金属盐(主要是 CsCl)分离生物大分子的平衡等密度离心;用 Percoll(由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料,即在硅颗粒外包覆 PVP塑料

用Percoll不连续密度梯度法分离小鼠精原细胞的方法介绍

目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布于位于27

用Percoll不连续密度梯度法分离小鼠精原细胞的方法详解

精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞,用于体外培养。资料表明,从成年啮齿类的睾丸分离粗线期及其后

Percoll非连续性密度梯度离心法单核细胞的分离实验

基本原理:本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法,主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作,且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材·外周血单个核细胞·PBS 1×和PBS 10×(无Ca2+、Mg2+),含0.5mM EDTA·胎牛血清(56℃,30分钟加热灭

Preparation-of-Mouse-Neutrophils

实验概要Preparation of Mouse Neutrophils实验步骤Mice:8-16 weeks old malePrewarm buffer to room temperatureBuffer A : Ca2  /Mg2 ‐free Hank’s buffered saline so

Preparation-of-Mouse-Neutrophils

实验步骤Mice:8-16 weeks old malePrewarm buffer to room temperatureBuffer A : Ca2  /Mg2 ‐free Hank’s buffered saline solution [HBSS; Invitrogen, Grand Isla

核细胞分离的原理及分层液法的分离步骤

  单个核细胞PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的密度为1.076~1.090;血小板为1.030~1.035。因此,利用一种密度介于1.076~1.090之间、近于等渗的溶液(分层液)进行密度梯度离心,可使不同类别的血细胞按其相应密

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

外周血中嗜碱性粒细胞(BASO)分离方法

Percoll密度梯度离心分离法:1、Pcrcoll混悬液的配制:Percoll 90ml,HBSS 9ml, HEPES(0.25mol/l)1ml(PH 7.3),HCL(1mol/l)0.4ml 调节至PH7.42、制备Percoll密度梯度管密度 Percoll/HBSS(ml/ml)1.0

Primary-cultures-of-intrahepatic-bile-duct-epithelial-cells-isolated-and...

Primary cultures of intrahepatic bile duct epithelial cells isolated and cultured1. Liver was surgically removed and perfused via the hepatic vein.2. 

Isolation-of-liver-lymphocyte

Isolation of liver lymphocyte   Several lymphocyte subpopulations reside in the normal adult human liver. Liver lymphocytes mainly include a large n

单个核细胞的分离纯化

外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1.原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的

单个核细胞的分离

实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密

黄瓜花叶病毒(CMV)的纯化

方法:(黄瓜病叶匀浆粗病毒提取并浓缩后)Ⅰ. CSCL自形成梯度用平均密度近1.37的CSCL,(每毫升加0.5克),日立CP100MX离心机,P100AT2转头,6.5PA管,样品量0.5~1ml均匀混在 CSCL中,加满离心管,        78,000rpm ,离心6小时,20℃,加

按细胞比重分离B细胞

按细胞比重分离B细胞1.将2~3ml含3×107纯化的B细胞(B细胞>90%)的细胞悬液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平离心1000×g 20分钟。2.吸去无细胞上清液,交界面的低密度B细胞和大部分Percoll溶液。由于此时细胞沉淀非常松散,需留下约0.2ml Percol

密度梯度细胞分离法

            实验方法原理 制备密度梯度液,通过密度梯度液离心细胞,收集各梯度组分,用培养基稀释,培养细胞。 实验材料 细胞样品

密度梯度细胞分离法

            实验方法原理 制备密度梯度液,通过密度梯度液离心细胞,收集各梯度组分,用培养基稀释,培养细胞。 实验材料 细胞样品

密度梯度细胞分离法

实验方法原理 制备密度梯度液,通过密度梯度液离心细胞,收集各梯度组分,用培养基稀释,培养细胞。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 生长培养基生长培养基+20% Percoll25ml离心管注射器或梯度收集器24孔培养板折光仪或密度计低速离心机实验步骤 通过下述方法之一制备密度梯度液:(

密度梯度细胞分离法

实验方法原理制备密度梯度液,通过密度梯度液离心细胞,收集各梯度组分,用培养基稀释,培养细胞。实验材料细胞样品试剂、试剂盒D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材生长培养基生长培养基+20% Percoll25ml离心管注射器或梯度收集器24孔培养板折光仪或密度计低速离心机实验步骤通过下述方法之一制备密

细胞分离纯化技术

Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(

蚜虫内共生菌菌胞的提取方法

实验概要Percoll溶液不连续密度梯度离心法提取蚜虫的内共生菌菌胞。实验原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(

Enrichment-of-PBMCs-with-monocytes-(The-Science-Advisory-Board)

DescriptionThis protocol is used in our lab to reduce the costs of the cell sorting with MACS reagents. The cell suspension obtained after this protoc

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离             实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒