那些病毒包装中的秘密你知道吗?
一、操作安全性(1)可在生物安全柜、常规超净工作台(不开启排风机)中进行慢病毒使用操作;(2)操作者须穿着实验服,戴口罩、一次性手套,谨防毒液直接接触眼耳鼻口或皮肤伤口;(3)操作过程注意避免毒液飞散、滴洒,注意勿被锐利器材、针头等划破皮肤;(4)不慎直接接触毒液的操作台、需回收器材,可通过0.25% SDS、70%乙醇、1%次氯酸钠等溶液灭活病毒;(5)使用过的工作台面、显微镜载物台等经70%乙醇擦拭;(6)培养器皿、枪头等废弃物应84消毒液(1:9稀释)浸泡,或121℃高温消毒,方可丢弃。二、慢病毒的保存(1)慢病毒载体经过干冰运输,在-80℃可保存6个月,保存超过6个月时需重新摸索工作滴度。(2)冻存的毒液在使用前置于冰上或4℃融化,最好于当天用完,未用完的毒液可暂时保存于4℃,不超过2天。(3)反复冻融会严重降低慢病毒滴度,每次冻融可降低20%以上,建议在初次使用时按用量进一步小量分装冻存。慢病毒包装三、慢病毒包装常见问......阅读全文
那些病毒包装中的秘密你知道吗?
一、操作安全性(1)可在生物安全柜、常规超净工作台(不开启排风机)中进行慢病毒使用操作;(2)操作者须穿着实验服,戴口罩、一次性手套,谨防毒液直接接触眼耳鼻口或皮肤伤口;(3)操作过程注意避免毒液飞散、滴洒,注意勿被锐利器材、针头等划破皮肤;(4)不慎直接接触毒液的操作台、需回收器材,可通过0.25
那些病毒包装中的秘密,你造么?
一、操作安全性 (1)可在生物安全柜、常规超净工作台(不开启排风机)中进行慢病毒使用操作; (2)操作者须穿着实验服,戴口罩、一次性手套,谨防毒液直接接触眼耳鼻口或皮肤伤口; (3)操作过程注意避免毒液飞散、滴洒,注意勿被锐利器材、针头等划破皮肤; (4)不慎直接
食品包装标准有哪些?你知道吗?
作为国内较早一批从事包材检测的老品牌企业。那么,国家规定的食品包装标准有哪些呢?食品包装标准不同的包装材料、生产工艺等均会导致食品包装可能出现的各种问题,而这些不同的包装材料或从事的生产工艺环节等,在具体用于食品包装前,根据我国相关法律的规定,都需要运用专业的仪器设备进行相应的包装检测。例如运用塑料
那些你可能不知道的关于血清的“秘密”
牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。一,血清的成分血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异
基因测序为你揭开埃博拉病毒的秘密
2014年6月,西非埃博拉病毒爆发初期,一组研究人员以空前的规模和速度迅速破译了这一致命病毒的基因组。他们的发现揭开了病毒扩散过程中大量的关键性问题,包括病毒只通过人与人相互接触的方式传播并通过大量传播产生新变异。 虽然目前公共卫生官员们相信病毒最危险的阶段已经过去,事实上一切还尚未结束,先前
水环境中病毒的那些事
自新型冠状病毒引发的肺炎疫情爆发以来,全国一致抗“冠”进入了关键期。随着新冠疫情的发展,新型冠状病毒有可能通过粪口传播这一发现引发了排污水行业极大的关注与讨论。医疗废水处理后进入市政污水管网,经污水处理厂处理后达标排放进入水体。病原体污染以及对人体的危害是倍受关注的全球性环境问题,介水传播病毒一
37种脂肪酸甲酯分离的小秘密,你知道吗?
CNW CD-2560色谱柱可完美适用于食品中脂肪酸的检测(GB 5009.168-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定,GB 5009.257-2016 食品安全国家标准 食品中反式脂肪酸的测定),可实现37种脂肪酸甲酯的有效分离。 经常有检测人员反馈之前用CD-2560可很好的分
油中水分分析方法你都知道吗?
油中水分分析方法一般可分为两大类,即物理分析这和化学分析法。本文介绍了几种经典的水分分析方法。经典水分分析方法已逐渐被各种水分分析方法所代替,目前市场上主要存在的水分测定仪。水分测定仪主要有卡尔·费休水分测定仪、水分测定仪、库仑水分仪、微波水分仪、红外水分仪、露点水分仪,以及一些专用水分仪。这些仪器
养殖中水质分析有多重要,你知道吗
养鱼(虾)即养水,这个道理已经被人们所公认。但是,什么样的水是好水,或者说,好水有什么标准,则不是所有的人知道的了。过去,养殖户和技术员断水质的好坏仅凭肉眼。也总结出许多好的经验。但是,经验是有很大局限的。首先,要求你有丰富的经验,而且,有时候也不是那么可靠。比如,这个水中的溶氧到底是多少,就没有办
生活中十大厌氧菌,你都知道吗?
在我们生活的环境中,一直存在一群只能在无氧或低氧分环境下生长的微生物,它们对人类健康起着非常重要的影响,那就是厌氧微生物。厌氧微生物绝大多数为细菌,很少数是放线菌,极少数是支原体,因此也常称之为厌氧菌。 厌氧微生物在人类生活的环境和人体中广泛存在,所以一直是科学家和医生关注的焦点。近
病毒包装技术——腺病毒包装流程
1. 细胞的准备a) 复苏293细胞,传代培养1-2代,调整好细胞状态,务必4代以内完成转染实验。b) 在转染前1天,用胰酶消化传代,将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中,加入2ml完全培养基(DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax),摇匀后置于5% CO2、95% 湿润
你知道吗?脑细胞是使用来自病毒的基因共享信息!
亿万年前,当时脊椎动物刚开始爬上陆地的时候,一个这样的生物就被病毒感染了。它是一种逆转病毒,能够将其基因侵入到对方的DNA中。他们被传给了这个动物的下一代。当这些病毒基因经过几代人后,他们就从单纯的“偷渡者”进入宿主的重要部分生物学。 一个这样的基因叫ARC。它活跃在神经元中,在大脑中起着
唐筛你要知道的秘密
怀孕15周后,孕妇都得去医院做一个唐氏筛查,主要是为了避免先天性唐氏儿的出生。这是孕期一项非常重要的检测。卫生部规定所有的孕妇都应该在孕15周-19周之间做唐氏筛查,所以大多数的准妈妈都要去做。但是以下这些唐筛的秘密你都了解吗? 误区一:唐筛结果通过了就没事。错! 很多的准爸妈对于唐筛寄
DNA合成:你应该知道的秘密
说起DNA合成,几位前辈师兄师姐们犹会提起上世纪90年代世行贷款买仪器,好些单位甚至医院都赶时髦买了DNA合成仪,买回来才发现自己那点合成需求和费用,委实买得起用不起,那昂贵的设备成了摆设。彼时国外DNA合成虽然质量好纯度高,可寄回来海关不好过,时间上实在伤不起,幸亏国内迅速崛起的几家DNA定制
DNA合成:你应该知道的秘密
说起DNA合成,几位前辈师兄师姐们犹会提起上世纪90年代世行贷款买仪器,好些单位甚至医院都赶时髦买了DNA合成仪,买回来才发现自己那点合成需求和费用,委实买得起用不起,那昂贵的设备成了摆设。彼时国外DNA合成虽然质量好纯度高,可寄回来海关不好过,时间上实在伤不起,幸亏国内迅速崛起的几家
怎样降解水质中的亚硝酸盐,你知道吗?
随着养殖水平的不断提高,养殖密度的不断加大,对池塘的投入也在不断地增加,水体的负载大都达到或超过饱和程度,进而使水体的理化条件不断恶化,水体中的氨氮、亚硝态氮(亚硝酸盐)等有毒有害物质大量产生,致使养殖鱼类容易中毒死亡,往往给养殖户带来比较惨重的损失。亚硝酸盐是广泛存在于水体的一种物质,是水体氮循环
这些食品真相你知道吗
2018年,我国食品安全形势继续稳中向好,粮、肉、蛋、乳等基础原料,以及大宗日常消费品的样品合格率均处于较高水平,尤其是乳制品合格率始终保持在99.5%以上。然而,网络上各种关于食品安全问题的传言、谣言屡见不鲜,不断考验着生产者、消费者的心理承受力和辨别力 “咖啡是否致癌”“非洲猪瘟蔓延,猪
病毒包装技术——病毒包装实验经验总结
第一,细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等)是三个主要影响病毒质量的因素。第二,细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断,比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意,一般在
病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(二)
2.3 蛋白质分析 为了分析AAV Rep和Cap蛋白质表达,按照2.2部分所述进行质粒转染。转染后48小时,将培养物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2),细胞低速离心沉淀收获。细胞沉淀在冰上用200ml STM-NP缓冲液(25mM蔗糖,10mM Tris-HCl,pH8
病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(一)
摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AA
病毒包装技术6——腺病毒包装流程介绍
1. 细胞的准备 a) 复苏293细胞,传代培养1-2代,调整好细胞状态,务必4代以内完成转染实验。 b) 在转染前1天,用胰酶消化传代,将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中,加入2ml完全培养基(DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax),摇匀后置于5%
病毒包装的原理
质粒 DNA 和其他包装质粒共转染细胞(293T 细胞)产生病毒,即为病毒包装。293T 细胞是由 293 细胞派生, 表达 SV40 大 T 抗原的人肾上皮细胞系, 被广泛应用于瞬时转染以过表达各种目标蛋白, 或是用以包装病毒。病毒包装的原理(以慢病毒包装为例)质粒 DNA 为能转录出慢病毒遗传物
大熊猫那些不为大众所熟知的“秘密”
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/6/503410.shtm它是地球上生存了800万年的“活化石”它是举手投足间萌化人心的“小可爱”拥有这种反差感的全世界也只有咱的国宝大熊猫了但这800万年间大熊猫可不是靠“卖萌”生存的在演化过程中大熊猫究竟发
你比你想象中携带更多的病毒
细菌学家最近对皮肤里的细菌群(肠道菌群)进行了广泛的研究,对我们的健康和疾病有很好的启示。病毒学家们对这些与“病毒组”相关的发现产生浓厚的兴趣,因为他们的研究不再局限于皮肤表面病毒了。 来自宾夕法尼亚大学医学院的一项新研究发现人体皮肤上大部分的DNA病毒从来没有被发现过,是病毒的“暗物质”。
病毒包装技术7——腺相关病毒(AAV)包装介绍
锐赛小课堂技术篇0702-113 摘要: 腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH
病毒包装技术——慢病毒载体构建及包装流程
一、实验流程(1和2为并列步骤)慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,PCR(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(CDNA质粒或者文库)调取目的基因CDS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。
输血治疗的这些误区,你知道吗?
输血治疗发展至今,已经是众多急慢性疾病的常规治疗手段之一,其在补充血液或成分丢失,维持有效循环血量和恢复血液携氧能力,提高胶体渗透压和血浆蛋白,改善凝血功能等方面具有不可或缺的作用。虽然输血是一项有效治疗方法,但也需要有正确的理解和运用,而我们在日常生活和工作中却经常会遇到一些不够正确的认识和解读
影响细胞转染的因素,你知道吗
血清:血清影响复合物的形成,降低转染效率阳离子脂质体和 DNA 的量在使用血清时会有所不同,因此想在转染培养基中加入血清时要进行条件优化。大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康,对于对血清缺乏比较敏感的细胞,可以使用 OPTI-MEM I 培养基。对于对血清缺乏比较敏感的贴壁细胞,建议使用
校准和检定的区别,你知道吗?
1、目的不同 校准的目的是对照计量标准,评定测量装置的示值误差,确保量值准确,属于自下而上量值溯源的一组操作。这种示值误差的评定应根据组织的校准规程作出相应规定,按校准周期进行,并做好校准记录及校准标识。 校准除评定测量装置的示值误差和确定有关计量特性外,校准结果也可以表示为修正值或校准因子
细胞图像的分析方法你知道吗?
显微图像分析可以为细胞培养过程提供许多帮助。比如从图像中提取想要的信息、或是加工图像使信息呈现更简单清晰等,都属于图像分析的技术领域。 首先,图像分析是基于显微装置获取图像后执行的步骤。根据图像分析的结果,我们可以通过计数测量、统计分析等过程推导出实验结论。所以说,图像分析是连接图像和结论之间