教你秒懂如何使用慢病毒

病毒包装是生物医学研究中的一大利器。通过病毒我们可以高效地让我们要研究的基因在目标细胞中过表达或者特异性地敲低细胞中的目标基因。科研中用到的病毒主要有慢病毒、腺病毒、腺相关病毒。根据各种病毒不同的特性,不同的课题需要包装不同的病毒。比如,腺相关病毒更适合进行动物在体研究。腺病毒具有包装容量大、适合在体研究等有点。生物医学科研中使用得最多的是慢病毒,慢病毒具有外源基因容量大、目的基因整合稳定表达、可同时感染分裂和非分裂细胞、转染效率高的特点,已经广泛应用于基础科研、临床研究中。1、预实验的重要性文献报道或他人经验中的MOI(感染复数,毒粒与被感染细胞的数量比值),不仅取决于病毒对细胞本身的亲噬性,而且受到不同来源重组病毒滴度测定误差、使用保存过程损失、具体细胞状态、传代次数、细胞密度、具体实验操作等方面的影响。完全照搬MOI可能并不能达到最佳效果。 传代细胞系、原代细胞等材料,实际状态在各个实验室也会存在一定差异。预实验......阅读全文

教你秒懂如何使用慢病毒

  病毒包装是生物医学研究中的一大利器。通过病毒我们可以高效地让我们要研究的基因在目标细胞中过表达或者特异性地敲低细胞中的目标基因。科研中用到的病毒主要有慢病毒、腺病毒、腺相关病毒。根据各种病毒不同的特性,不同的课题需要包装不同的病毒。比如,腺相关病毒更适合进行动物在体研究。腺病毒具有包装容量大、适

教你秒懂如何使用慢病毒

病毒包装是生物医学研究中的一大利器。通过病毒我们可以高效地让我们要研究的基因在目标细胞中过表达或者特异性地敲低细胞中的目标基因。科研中用到的病毒主要有慢病毒、腺病毒、腺相关病毒。根据各种病毒不同的特性,不同的课题需要包装不同的病毒。比如,腺相关病毒更适合进行动物在体研究。腺病毒具有包装容量大、适合在

孩子发烧是细菌感染还是病毒感染?教你秒懂血常规!2

二、从血常规结果区分细菌感染还是病毒感染;  掌握难度:★★★☆☆  血常规中的白细胞总数和分类是临床医生诊断和治疗疾病重要的参考资料,尤其在儿科急性发热、感染性疾病诊治中,血常规检查常是区别细菌性感染或病毒感染以及感染严重度必不可少的手段。所以孩子生病后去医院看病,常常有医生建议去做血常规化验。在

孩子发烧是细菌感染还是病毒感染?教你秒懂血常规!1

 宝宝自打出生后,就有可能遭遇各种各样的疾病。一旦送往医院,最常见的就是查体之后的抽血检查血常规了,这些辅满数字、又花花绿绿的检验单,却经常让我们一头雾水。不是每一位妈妈都是学医出身,也不是每一位医生都那么细心地给妈妈逐项检查解释。一般医生给宝宝检查完身体后,会开一张“血常规”的化验单。通过化验单上

如何读懂血常规,看完后秒懂!

  在医院,医生常开的血液化验项目里,血常规大概最常见了。感冒,发烧,拉肚子,头晕,头痛等等常见小毛病去医院做检查,也是从血常规开始的。化验单上那么多项目,是怎么看的?别急,我们先来看如何读懂血常规。检验医学网  血常规只是一种检测手段,它能够提示我们身体所发生的变化。通过血液的成分变化也有助于我们

让你秒懂液氮罐的使用

  液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐两种。贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存,不宜在工作状态下作远距离运输使用;液氮运输罐为了满足运输的条件,作了专门的防震设计。其除可静置贮存外,还可在充装液氮状态下,作运输使用,但也应避免剧烈的碰撞和震动。   液氮罐的使用   一、使用前的检查液氮罐在充

如何解读“出凝血”常规检查?看完秒懂!

 出血和凝血问题与多种疾病相关,但是约90%的出凝血问题可以由血凝学实验室给予诊断。目前常规的检测项目有凝血四项和血小板计数,这些简单的检查,要是理解到位,作用不可小觑。    凝血四项:凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated parti

订购到的慢病毒如何保存和使用?

订购到的慢病毒如何保存和使用?包装好的慢病毒液全程采用干冰运输,快递至客户处。请务必注意查收,收到后请打开包装检查干冰是否还有剩余,病毒种类和规格是否与发货单完全一致。请将慢病毒液在-80℃保存,避免反复冻融,6个月内滴度不会明显下降,建议尽快使用完毕。对于保存6~12个月以上的样品,实验前需重新测

订购到的慢病毒如何保存和使用?

  订购到的慢病毒如何保存和使用?   包装好的慢病毒液全程采用干冰运输,快递至客户处。请务必注意查收,收到后请打开包装检查干冰是否还有剩余,病毒种类和规格是否与发货单完全一致。请将慢病毒液在-80℃保存,避免反复冻融,6个月内滴度不会明显下降,建议尽快使用完毕。对于保存6~12个月以上的样品,实

秒懂胆红素与总胆汁酸

  临床上生化报告单中常见的总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IDIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)等指标可反映肝脏分泌、排泄的功能。本文就与大家一起简要分析一下上述指标的临床意义。  胆红素(TBIL)  包括间接胆红素和直接胆红素,是两者总量的合称。机体 TBIL 的来源绝大部分

激光雷达原理秒懂

说到无人车,就不得不提到激光雷达,简称光达。在硅谷的小伙伴应该都见过光达。它就是无人车上不停旋转的那顶帽子。 特斯拉的老大Elon Musk声称,唯有特斯拉的车不需要激光雷达(lidar)。特斯拉只需用摄像头和雷达(radar)传感器,就可以做到像人眼一样观察四周路况。这真的可行吗?秒懂光达原理光达

如何摸索慢病毒最佳MOI值?

MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral p

如何摸索慢病毒最佳MOI值

  MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral p

使用慢病毒的注意事项

使用慢病毒注意事项 1. 病毒操作时最好使用生物安全柜。如果使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开排风机。 2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和手套。 3. 操作病毒时特别小心不要产生气雾或飞溅。如果操作时超净工作台有病毒污染,请立即用70%乙醇加1%的SDS 溶液擦拭干净。接触过病毒的枪头,离心管

慢病毒使用操作手册

一、慢病毒的储存与稀释:1. 病毒的储存:收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验,可以将病毒暂时放置于4 ℃保存;如需长期保存请放置于-80℃(病毒置于冻存管,并使用封口膜封口)① 病毒可以存放于-80℃ 6个月以上;但如果病毒储存时间超过6个月,建议在使用前需要重新滴定病毒滴度。② 反复冻融

带你秒懂BOD5测定仪

  BOD5测定仪是利用空气压差法进行生化需氧量测定的一种新型仪器,能准确提供与化学稀释法可比的测定结果,具有读数直观,生化反应曲线一目了然和使用维护方便等特点,是工作分析的理想工具。可广泛应用于环保监测、石油化工、医疗卫生、教学科研等部门对水质的监测。   BOD5测定仪的功能特点:   1. 模

一文秒懂红外测油仪

 红 外 测 油 仪 原 理依据国家标准“GB/T16488-1996”,红外测油仪采用红外光度法测定水中石油类和动植物油、空气中油烟、在波数为3030、2960、2930cm处测定有特征吸收的物质。红外测油仪可脱离计算机操作,直接进行三波长红外法或非分三红外法测油,运行简便。应用计算机进行设置、扫

教你如何使用反应釜

  实验室反应釜介绍:反应釜是一种反应容器设备,在采购的时候要根据不同的实验需求,通过对容器的结构设计与参数配置,实现工艺要求的加热、蒸发、冷却及低高速的混配功能。  反应釜广泛应用于石油、化工、橡胶、农药、染料、医药、食品等生产型用户和各种科研实验项目的研究,用来完成水解、中和、结晶、蒸馏、蒸发、

化学试剂分类不清楚?看完秒懂

我们实验室的小伙伴每天都在和各种各样的试剂打交道,分析纯、优级纯、色谱纯、农残级、trace metal级,这些都常挂在嘴边的词你了解他吗?单说色谱纯还要分等度和梯度级别的,今天我们就来细数一下各种试剂。 目前我国的试剂类规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优

化学试剂分类不清楚看完秒懂

  我们实验室的小伙伴每天都在和各种各样的试剂打交道,分析纯、优级纯、色谱纯、农残级、trace metal级,这些都常挂在嘴边的词你了解他吗?单说色谱纯还要分等度和梯度级别的,今天我们就来细数一下各种试剂。   目前我国的试剂类规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基

一文秒懂TOD,-BOD-和COD区别

 表示水中有机物含量的综合指标有两类,一类是以与水中有机物量相当的需氧量(O2)表示的指标,如生化需氧量BOD、化学需氧量COD和总需氧量TOD等;另一类是以碳(c)表示的指标,如总有机碳TOC。对于同一种污水来讲,这几种指标的数值一般是不同的,按数值大小的排列顺序为TOD>COD>BOD5>TOC

如何正确使用慢肝解郁胶囊?

  慢肝解郁胶囊的用法用量为口服,一次4粒,一日3次。  以0.25g/粒的慢肝解郁胶囊为例,您应该按照这样的方式服用:  一次用量:4粒  一日频次:3次

3分钟教你如何自制病毒护具?

  在病毒爆发期间,口罩长期短缺,香港人开始自己制作口罩--一条临时生产线和女裁缝用缝纫机大量生产口罩。  在地球上人口最密集的城市之一,随着人们争相防范新型致命冠状病毒,口罩已成为热门物品。  当药品进货时,药店门口总是排起长龙,有时甚至排起数千人的长队。  一些人转向DIY解决方案--尽管质量有

教你如何使用恒温振荡器

随着时代的发展,科技在不断的进步,我们可使用的东西也是越来越多。介绍过恒温摇床、振荡培养箱等,今天为大家介绍恒温振荡器,恒温摇床,恒温培养箱,先让我们来了解一下它如何使用吧。  1、装入试验瓶,并保持平衡,如是双功能机型,设定振荡方式。接通电源,根据机器表面刻度设定定时时间,如需长时间工作,将定时器

病毒包装技术——慢病毒生产及使用操作手册

一、实验流程制备慢病毒表达质粒及其辅助载体,四个质粒共转染293T细胞,转染后6h更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。二、实验材料慢病毒载体包装系统为四质粒系统, 组成为Gag/pol、vsvg、rev及pLenti-X-EGFP表

慢病毒实验程序

含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化,提取慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3) 培养 48hrs - 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。 4) 病毒的纯化和浓缩。 5) 分装、- 80 ℃保存。 6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。

慢病毒包装实验

实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管,加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血

慢病毒包装实验

慢病毒包装实验             实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动物制备;但也有不同于反转

慢病毒包装实验

慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于:(1)感染原代培养细胞;(2)制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株;(3)in vivo的基因操作、转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动

什么是慢病毒

慢病毒(LV)慢病毒载体(lentivirus vector,LV)属于逆转录病毒科(Retrovidae),为 RNA病毒。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表