如何摸索慢病毒最佳MOI值

MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral particles, v.p)或基因组数量(vector genome,v.g.)来表示病毒数量。 慢病毒(Lentivirus)载体是基于HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)的单链RNA病毒载体,可感染分裂或非分裂细胞,并将外源基因有效地整合到宿主染色体上,且具有较低的免疫原性,被广泛应用于各种体外细胞实验中。 常见细胞MOI参考值(慢病毒) 慢病毒MOI值摸索步骤 实验前信息准备 目标细胞系培养条件及增殖速度 排除细胞支原体污染 查阅文献,获得目标细胞参考MOI值(如没有相关文献......阅读全文

如何摸索慢病毒最佳MOI值?

MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral p

如何摸索慢病毒最佳MOI值

  MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral p

什么是MOI值?如何进行MOI值摸索?

什么是MOI值?如何进行MOI值摸索? MOI(Multiplicity of Infection,感染复数)是指病毒感染细胞的比例。选择合适的MOI值,病毒的感染效率以及目的蛋白的表达量越高,相对细胞的毒性越小。对于分裂活跃的细胞,比如293细胞MOI=1时,95%以上的细胞均可以表达目的

锐赛病毒技术专区:什么是MOI值?如何进行MOI值摸索?

  什么是MOI值?如何进行MOI值摸索?   MOI(Multiplicity of Infection,感染复数)是指病毒感染细胞的比例。选择合适的MOI值,病毒的感染效率以及目的蛋白的表达量越高,相对细胞的毒性越小。对于分裂活跃的细胞,比如293细胞MOI=1时,95%以上的细胞均可以表达

如何利用TLC摸索最佳柱层析条件?

TLC的一个重要作用就是为柱层析选择合适的洗脱体系和合适的洗脱比例,柱层析洗脱剂配制后用TLC验证Rf值,将需要的斑点Rf值调至0.2左右,梯度洗脱。

MOI值怎么测定

R&A对MOI值的限制规定是:垂直MOI: 13.1盎司·平方英寸/2400克·平方厘米水平MOI: 21.9盎司·平方英寸/4000克·平方厘米倾斜MOI: 23.3盎司·平方英寸/4250克·平方厘米举例说明:如果一支球杆的MOI是3000g·cm2,另一支是2000g·cm2,那么3000g·

MOI值怎么测定

R&A对MOI值的限制规定是:垂直MOI: 13.1盎司·平方英寸/2400克·平方厘米水平MOI: 21.9盎司·平方英寸/4000克·平方厘米倾斜MOI: 23.3盎司·平方英寸/4250克·平方厘米举例说明:如果一支球杆的MOI是3000g·cm2,另一支是2000g·cm2,那么3000g·

教你秒懂如何使用慢病毒

病毒包装是生物医学研究中的一大利器。通过病毒我们可以高效地让我们要研究的基因在目标细胞中过表达或者特异性地敲低细胞中的目标基因。科研中用到的病毒主要有慢病毒、腺病毒、腺相关病毒。根据各种病毒不同的特性,不同的课题需要包装不同的病毒。比如,腺相关病毒更适合进行动物在体研究。腺病毒具有包装容量大、适合在

教你秒懂如何使用慢病毒

  病毒包装是生物医学研究中的一大利器。通过病毒我们可以高效地让我们要研究的基因在目标细胞中过表达或者特异性地敲低细胞中的目标基因。科研中用到的病毒主要有慢病毒、腺病毒、腺相关病毒。根据各种病毒不同的特性,不同的课题需要包装不同的病毒。比如,腺相关病毒更适合进行动物在体研究。腺病毒具有包装容量大、适

慢病毒用于体外(in-vitro)-感染培养原代细胞和建系细胞

  1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同,用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献,了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性,感染复数(MOI 值)以及在体内(in vivo)注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持,可以通过感染预实验得到合适的感染复数(MOI 值)(使用24孔板检测

慢病毒用于体外(in-vitro)实验:感染培养原代细胞和...

慢病毒用于体外(in vitro)实验:感染培养原代细胞和建系细胞1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同,用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献,了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性,感染复数(MOI 值)以及在体内(in vivo)注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持

病毒的MOI是什么意思

MOI :multiplicity of infection,感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值,也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。

噬菌体MOI(multiplicity-of-infection)值及其意义

MOI 是multiplicity of infection的缩写,中文译为感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值,也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu

自噬双标腺相关病毒说明(二)

(Tom Egil Hansen and Terje Johansen,BMC Biology,2011) 图4 Vigene自噬双标病毒载体图谱五.Vigene mCherry-GFP-LC3B 自噬双标操作方法(一)体外实验以2型AAV病毒为例,Vigene为您推荐的MOI值104-105,是根

昆虫细胞高MOI杆病毒感染

高MOI( Multiplicity Of Infection,等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值)感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP(Defective Interfering Particles,即只包装入部分基因组的病毒颗粒)的形成,因为关心的是细胞或者培养液中的蛋

订购到的慢病毒如何保存和使用?

  订购到的慢病毒如何保存和使用?   包装好的慢病毒液全程采用干冰运输,快递至客户处。请务必注意查收,收到后请打开包装检查干冰是否还有剩余,病毒种类和规格是否与发货单完全一致。请将慢病毒液在-80℃保存,避免反复冻融,6个月内滴度不会明显下降,建议尽快使用完毕。对于保存6~12个月以上的样品,实

订购到的慢病毒如何保存和使用?

订购到的慢病毒如何保存和使用?包装好的慢病毒液全程采用干冰运输,快递至客户处。请务必注意查收,收到后请打开包装检查干冰是否还有剩余,病毒种类和规格是否与发货单完全一致。请将慢病毒液在-80℃保存,避免反复冻融,6个月内滴度不会明显下降,建议尽快使用完毕。对于保存6~12个月以上的样品,实验前需重新测

腺病毒感染细胞时,一般用多大的MOI值比较好

- 不同的病毒感染不同的细胞效率有所不同,要多少MOI感染,我一般会做一个梯度实验,以24h出现荧光的细胞数80%以上为最佳。

维真稳转株构建流程(一)

稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。一.准备及预实验确定细胞系相关信息,需包括如下内容目标细胞系培养条件目标细胞增殖速度支原体污染情况注:为避免慢病毒感染后细胞死

腺病毒系统使用指南(三)

腺相关病毒感染目的细胞预实验以2型AAV病毒为例,维真生物为您推荐的MOI值10000:1-100000:1,是根HEK293T细胞得出的数据,不同的细胞所使用的病毒MOI值会有所不同。建议您感染目的细胞前,进行预实验摸索最佳MOI值,推荐使用有荧光的对照病毒来摸索条件。1. 为了节省病毒,推荐使用

慢病毒使用操作手册

一、慢病毒的储存与稀释:1. 病毒的储存:收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验,可以将病毒暂时放置于4 ℃保存;如需长期保存请放置于-80℃(病毒置于冻存管,并使用封口膜封口)① 病毒可以存放于-80℃ 6个月以上;但如果病毒储存时间超过6个月,建议在使用前需要重新滴定病毒滴度。② 反复冻融

慢病毒感染目的细胞实验步骤

1. 感染预实验以 24 孔培养板为例,同时进行目的细胞和工具细胞的感染预实验。工具细胞可选择 293T(人胚肾上皮细胞)、H1299(人肺癌细胞)或其它细胞。实验材料:培养基、24 孔培养板,移液枪,枪头, EP 管,细胞计数板、冰盒、废液缸等。(根据目的细胞情况,可酌情使用 Polybrene)

昆虫细胞的低MOI杆病毒感染

感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Sys

慢病毒实验程序

含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化,提取慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3) 培养 48hrs - 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。 4) 病毒的纯化和浓缩。 5) 分装、- 80 ℃保存。 6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。

慢病毒包装实验

慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于:(1)感染原代培养细胞;(2)制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株;(3)in vivo的基因操作、转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动

慢病毒包装实验

实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管,加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血

什么是慢病毒

慢病毒(LV)慢病毒载体(lentivirus vector,LV)属于逆转录病毒科(Retrovidae),为 RNA病毒。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表

慢病毒包装实验

慢病毒包装实验             实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动物制备;但也有不同于反转

慢病毒载体相关知识问答大总结

慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统,其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合

cTn用于诊断心梗,最佳临界值该如何界定?

  研究1:肾功能不全患者的最佳诊断临界值是“健康人群第99百分位数”吗?    这项多中心研究发现,在肾功能不全患者的急性心肌梗死(AMI)诊断中,使用敏感或高敏感cTn检测诊断准确性较高。肾功能不全患者的cTn最佳诊断临界值稍高,建议针对不同检测方法分别考虑。    该研究对7种敏感性较高的