体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高1
1.简介:目前的体外暴露染毒研究中,受试物可在气液界面直接与细胞接触(Cultex),避免了传统浸没培养暴露中培养基成分对实验的干扰。在此气-液界面体外暴露染毒过程中的实验重复性(稳定性和再现性)取决于细胞体外暴露染毒技术及暴露系统的优化设计。 在文献中,我们常见到的受试物在气液界面直接与细胞暴露接触的体外暴露染毒方案有不同类型(Aufderheide,2005;Aufderheide et al.,2005)。在这里,我们把两个主要应用的模块类型,即线性流体外暴露染毒系统(Linear Flow System)和辐射流体外暴露染毒系统(Radial Flow System)进行实验测试对比,以讨论这两种方法的差异。 2.材料与方法2.1 体外暴露染毒系统2.1.1 CULTEX CG(线性流暴露染毒系统Linear Flow System) 第一代气液界面体外暴露染毒系统 见图1,主要特点是细......阅读全文
体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高-1
1.简介:目前的体外暴露染毒研究中,受试物可在气液界面直接与细胞接触(Cultex),避免了传统浸没培养暴露中培养基成分对实验的干扰。在此气-液界面体外暴露染毒过程中的实验重复性(稳定性和再现性)取决于细胞体外暴露染毒技术及暴露系统的优化设计。 在文献中,我们常见到的受试物在气液界面直接与细胞暴露接
体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高-2
图5 颗粒物沉积模式图 3.结果不同粒径及质量的颗粒物在两种不同暴露染毒模块内有不同的沉积结果。通常情况下,虽然粒子的理化性质及粒径大小可能会对颗粒沉积有影响,但在同一粒子的暴露结果可以看出,辐射流暴露染毒系统CULTEX RFS中三个位置暴露数据的具有更低的偏差和相对标准偏差,且相对标准偏差都
细胞体外暴露染毒技术的发展与展望
一、简介: 不断进行的工业发展和新技术改进应用(例如,纳米技术),都导致了空气污染的不断增加,导致了肺部疾病在过去几十年里大大的增加。新的产品(例如,纳米粒子的喷雾剂)已经被广泛应用在电气工业,日常消费和医疗应用等等特别是喷雾或粉末形式应用的产品,对人体健康被认为是特别有害的。由于增加了有害物质的释
实验动物染毒途径和技术1
在毒理学试验中染毒途径的选择,应尽可能模拟人在接触该受试物的方式。最常用的染毒途径为经口、经呼吸道;经皮及注射途径。染毒的途径和方法根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。不同途径的吸收速率,一般是静脉注射>吸入>肌内注射>腹腔注射>皮下注射>经口>皮内注射>其他途径(如经皮等)
多通道气液界面细胞直接暴露染毒技术CultexRFS-Compact
多通道气液界面细胞直接暴露染毒技术-CultexRFS Compact,细胞气液界面的直接暴露。在过去的几十年里,大气污染表现出惊人的速度,特别是今年中国雾霾的污染。空气中颗粒物浓度的急剧增加导致了呼吸道急性或慢性疾病的影响。在传统研究中,是通过动物的吸入暴露实验,确定可吸入物质对健康的影响。到
优化噪声监测的技术路线设计
车水马龙被看成是城市繁华的标志。如今,不少人希望远离闹市,去安静的地方生活。究其原因,噪声污染是重要方面之一。可以说,噪声污染普遍存在,其危害不仅与声强有关,也取决于个体的敏感程度。例如,在寂静的乡村,一阵狗吠或鸡鸣,都有可能惊醒睡眠浅的人。在城市,人口居住密度高,个体反应差别更大,容易出现众说
全身与口鼻吸入暴露染毒的使用对比研究
全身暴露染毒(whole body exposure)与口鼻吸入暴露染毒(Nose only inhalation)的是两种常见的暴露染毒方式,在应用上各有其优势特点。shibata公司MIC系统是一种新型全身暴露染毒设备,同时兼具口鼻吸入暴露的一些优点。该实验通过MIC系统在两种方法上的使
实验动物染毒途径和技术4
(三)经皮肤染毒> 经皮肤染毒的目的有两种。一种是经皮染毒毒性试验,如经皮Lao测定常用大鼠,皮肤致癌试验常用小鼠‘另一种是皮肤刺激和致敏试验,皮肤刺激试验常用兔和豚鼠,皮肤致敏试验用豚鼠。 被毛的去除:试验前用机械法(剪剃毛)或化学法(硫化胸或硫化钡)脱毛。对兔和啮6类常用的脱毛剂处方为:
实验动物染毒途径和技术3
经皮肤染毒的目的有两种。一种是经皮染毒毒性试验,如经皮Lao测定常用大鼠,皮肤致癌试验常用小鼠‘另一种是皮肤刺激和致敏试验,皮肤刺激试验常用兔和豚鼠,皮肤致敏试验用豚鼠。 被毛的去除:试验前用机械法(剪剃毛)或化学法(硫化胸或硫化钡)脱毛。对兔和啮6类常用的脱毛剂处方为:①硫
实验动物染毒途径和技术2
实验动物 呼吸量 最低呼吸量 静式染毒2h可放动物数
光学轮廓仪优化的硬件设计提高的性能
光学轮廓仪优化的硬件设计提高的性能 饿测量性能,行业大视场上的高垂直分辨率 放大倍率0.5×到200×,实现各种不同的表面形状及材质的测量 在任何放大倍率下都有亚埃级到毫米级的垂直测量范围,实现的测量灵活性 可选的高分辨率照相机提升横向分辨率,进一步改善测量的重复性和再现性
Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-1
方法简介化学品引起的呼吸道过敏反应,不论是体内还是体外,目前尚缺少有效的评价方法。因此,新实验方法的开发收到极大的关注,特别是考虑到REACH(《化学品注册、评估、许可和限制》)新的法规规定。应注意的是,REACH指导方针明确指出,应尽量避免动物实验,其中,化妆品材料应在2013年全面禁止动物实验。
体外DNA重组技术1
在体外将两个或多个来源相同或不相同的DNA片段连接成新的重组DNA分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA重组技术的基本程序包括:(1)获得外源DNA:外源DNA是进行DNA重组的目的DNA片段,一般采用 DNA聚合酶链式反应(PCR)或逆转录-DNA聚合酶链
细胞气液界面暴露方法的一个重要问题及CULTEX的解决方案
关于细胞气液界暴露,由于欧盟关于化学物质的毒性风险评估(REACH EC No. 1907/2006)法规的改变,以及目前不断发展的替代方法的需求,以取代动物实验为目标,在体外模型基础上进行肺毒性的评估的技术,显然是非常有必要的。迄今为止,国内外的细胞体外毒性测试实验研究中,仍多采用浸没式细
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧 实验步骤 本节讨论盘绕螺旋特异性设计所涉及的几个不同方面。我们的目标是在核心处和
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验
虽然表观上简单,盘绕螺旋(coiled coil ) 模体是高度专一的,并在理解三级结构及其形成方面具有重要意义。最常观察到的盘绕螺旋形态——平行二聚态,其一般的结构类型仍有待全面的描述。尽管如此,其结构已呈现出在某些特定位置需要某些特定类型氨基酸的严格规则。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德
如何提高单细胞分析技术的可重复性?
要提高单细胞分析技术的可重复性,可以考虑以下几个方面:标准化实验流程:制定详细且明确的实验操作手册,包括样本采集、处理、细胞分离、标记、检测等各个环节的具体步骤和操作条件。对实验人员进行严格的培训,确保他们能够熟练且一致地执行实验流程。质量控制:定期检测和校准实验仪器,确保仪器性能的稳定性和准确性。
IL1的体外诱生实验
实验概要IL-1主要由活化的单核/巨噬细胞产生,具有广泛的生物学活性。IL-1包括IL-1α和IL-1β,两者分子量相近,且均能与IL-1R结合,故具有相似的生物学活性,常用的IL-1生物活性检测法对两者均适用。常用的IL-1生物活性检测法包括:小鼠胸腺细胞增殖法、L929细胞增殖法、D10G4.1
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验(一)
本节讨论盘绕螺旋特异性设计所涉及的几个不同方面。我们的目标是在核心处和边沿位置选择氨基酸以得到期望的寡聚态( 见 3. 2.1)、特异性(见 3. 2. 2 ) 和螺旋取向 ( 见 3.2.3 )。这里,我们也把针对特定稳定性的不同设计方案联系起来。第 4 小节(见 3. 2.4 ) 涉及整
实时荧光定量PCR实验体系的设计与优化
实时荧光定量PCR以其精确、快速、方便,越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验,不仅要求在实验前有比较完整的实验设计方案,而且实验的条件对实验结果的影响也非常大。这些都是很多老师与学生非常关心的问题,下面分别从这两个方面来对定量PCR实验做一些阐述。
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验(三)
( 9 ) Ji 等突变了 gp41—— 来自猿猴免疫缺陷病毒的 6 螺旋束包膜蛋白,与 gp120 一起,负责病毒与 CD4+ 细胞的融合 [ 34 ] 。在结构上,它是由反平行杂二聚体组成的三聚体蛋白。在这一研究中,为核心氢键和盐桥负责的(两个 Gln 和两个 Thr 残基)4 个被掩埋
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验(五)
3.2.4.1 螺旋长度一般来说,在盘绕螺旋链长度增加时,观察到稳定性的(线性)增加 [61] 。这是因为盘绕螺旋的序列将会起到额外的重要作用。例如,Lau 和 Hodges 构建了一个比原肌球蛋白( 284 残基盘绕螺旋)还稳定的 29 聚体(见 注 25;参考文献 [ 62] )。在
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验(六)
3.2.5.1 简并密码子使用简并密码子,可在希望改变的位点上编码若干氨基酸的混合密码。同样,在仔细选择要随机化的对应位点引入简并密码子,不仅可以引入期望的碱基,而且可以引人期望的氨基酸。如已经讨论过的,盘绕螺旋在不同位置对氨基酸类型有偏好。例如,e 和 g 残基常是极性且互补的(表 3. 4)
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验(二)
( 3 ) 在研究设计好的反平行盘绕螺旋核心位置的丙氨酸的位置效应时(见注 3 ),Monera 等发现,当丙氨酸残基在适当位置(即在同一个环上)时,会形成二聚体 [ 20 ] 。如果丙氨酸残基不同步,会形成四聚体。对此,最可能的解释是,四聚体中同步丙氨酸形成的孔穴高度地不稳定,因而倾向
盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验(四)
( 5 ) Arndt 等设计了一个多肽库。此库的设计基于 Jim-Fos 杂二聚,库中 b、c 和 f 残基来自于各自的野生型蛋白,a 位和 d 位为 Val 和 Leu ( 带有 a3Asn 在核心的插入例外,此插入引导期望的螺旋取向和寡聚态),e 和 g 残基则用三核苷酸作改变以得
siRNA体外转染——GenMuteTM-siRNA体外转染的优化
GenMuteTM siRNA转染试剂(Cat#SL100568)是市场上最有力的siRNA传递工具之一。最佳的siRNA浓度范围是1.0nM到10nM,过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”。我们实验室已经使用GenMuteTM转染试剂成功敲除了内源表达的生长因子。以24孔板为例,如下步
采用Cultex技术研究电子香烟(ecigarette)对支气管上皮...
采用Cultex技术研究电子香烟(e-cigarette)对支气管上皮细胞暴露染毒效应采用Cultex技术研究电子香烟(e-cigarette)对支气管上皮细胞暴露染毒的效应。自电子香烟于2003年问世以来,其售出的数量急剧上升。比如, 2013年至2014年,电子香烟在英国年销售量增长了2
寡核苷酸的优化设计
关键词:寡核苷酸;优化设计中图分类号:Q524 在核酸分子杂交、DNA序列测定和通过PCR放大DNA片段等实验中,都需要使用寡核苷酸作为探针或引物,而对这些反应的质量起最重要影响作用的,就是这些寡核苷酸探针或引物。用优化的寡核苷酸进行实验能够很快得到好的结果,而用不够合适的寡核苷酸时,常常得
BioTechniques:如何提高iPS研究的重复性
生命科学中的重复性一直都是个敏感话题。至于诱导多能干细胞(iPS),因未来可能涉及到临床应用,其重复性更加引人关注。在这一期的《BioTechniques》上,Jeffrey Perkel就介绍了研究人员通过哪些方式来应对这一问题。 Perkel首先谈到了试剂困境。没有人会怀疑iPS过程本身,
急性毒性试验的实验动物染毒方法介绍
1、急性毒性试验的实验动物染毒方法— 经口(胃肠道)接触目的是研究外来化合物能否经胃肠道吸收及求出经口接触的致死剂量(LD50)等。由于外来化合物可以污染饮水及食物,因此,此种染毒方式在卫生毒理学中占有重要地位。 灌胃是将液态受试化合物或固态、气态化合物溶于某种溶剂中,配制成一定浓度,装入注