如何选择合适的His标签抗体?

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而,目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。如何选择合适的His标签抗体?我们在选择His抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了,His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测?是否可以用于免疫荧光IF实验?我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体?我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的H......阅读全文

His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标

如何选择合适的His标签抗体?

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标

His抗体的简介

  His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融

亲和偶联--组氨酸标签(Histag)

亲和层析法(IMAC)是目前最广泛使用的纯化技术,该技术是基于蛋白表面残基(组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合,该过渡金属 / 蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上,通常通过降低 pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。 低耐压ABT 提供两种螯合微球,使

轻松纯化His标签胞外分泌蛋白

从真核细胞上清液中纯化蛋白是一项繁琐的工作。通常情况下胞外分泌蛋白的浓度很低,且蛋白很容易被细胞上清液中的蛋白酶降解。当然,Cube Biotech实验室也面临同样的问题。然而一天,Cube Biotech的科学家想到是否我们可以把磁珠直接加入溶液,从平衡体系中分离出带His标签的蛋白?通过

常用内参抗体和标签抗体

Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生产高品质的对特定表位有特异性的小鼠单克隆抗体,与其他公司生产的同类产品相比,具有最高的灵敏度和最高的特异性,并且性价

蛋白纯化的首选标签Histag的优势及应用

His标签蛋白纯化工具-蛋白纯化必备在大肠杆菌和别的原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白一般运用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个进程中,支撑物 (一般是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用适宜的耦合试剂来进行衍生,比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA

基因带六个his标签,蛋白纯化时为何挂不上镍柱

。。。等待高人回答txstbbm(站内联系TA)可能情况:1,ORF不完整或者不是预期的ORF,His没表达出来2,His被空间结构所掩盖,建议变性后再过柱cloudy3197(站内联系TA)同一ls,可能跟蛋白空间结构有关,变性后再上柱。2. 柱子是新的还是以前用过的,旧的应该很好的处理一下,3.

His标签蛋白纯化试剂盒操作步骤(以大肠杆菌为例)

使用说明:对于用镍柱纯化大肠杆菌中His标签蛋白比较熟悉的使用者可以直接参考“4. 简化的操作流程”。否则请参考如下详细内容:如下以最常见的大肠杆菌中表达纯化His标签重组蛋白为例,说明本产品的使用方法。在其它体系中表达时,请参考该表达体系的相关使用说明,并借鉴大肠杆菌中纯化His标签重组蛋白的使用

GST标签抗体GST标签与IFIP等多种应用

近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍,它的来源是日本血吸虫的25kDa大小的GST蛋白。GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。G

HA抗体推荐—选择合适HA标签抗体的因素

HA标签系统利用一个HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA 标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签

如何选择合适的Myc标签抗体?

随着蛋白质组学的迅猛发展,重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等,可用于辅助目标蛋白的纯化,这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEED

如何选择合适的CBP标签抗体?

CBP标记的蛋白在低浓度钙缓冲液中能够异性的被钙调蛋白树脂捕捉吸附,并且在中性环境中能够被2 mM EGTA洗脱,这与6组氨酸亲合标签纯化体系相比反应条件要温和许多。仅有4-kDa 大小的CBP tag 与26-kDa GST 标签相比对蛋白分子的影响非常小。在所表达的蛋白分子上包含一个凝血

如何选择合适的MBP标签抗体?

大肠杆菌麦芽糖结合蛋白( Maltose Binding Protein,MBP)来源于大肠杆菌malE基因编码的蛋白,是细菌麦芽糖转运系统的成员之一,主要负责麦芽糖的摄取及分解代谢。malE基因产物能与多种蛋白融合,是进行表达研究的有效媒介,由于MBP融合蛋白原核表达载体具有表达效率高,易于纯

如何选择合适的HA标签抗体?

HA标签系统利用一个HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA 标签抗体能特异识别C末端或N末端带有

Flag标签蛋白检测抗体实验应用说明

Flag标签蛋白检测抗体Abbkine提供可用于WB,IF,IP应用的Flag抗体,特异性检测Flag标签融合蛋白,Flag标签抗体可识别在细胞内表达的Flag标记重组蛋白,包括Flag位于氨基末端、中段以及羧基末端的重组蛋白。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽( DYKDDDDK)融

Myc抗体推荐—高品质Myc标签单克隆抗体

随着蛋白质组学的迅猛发展,重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等,可用于辅助目标蛋白的纯化,这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEED

如何选择合适的VSVG标签抗体?

水泡性口炎病毒( VSV)属于有包膜RNA病毒,以出芽的方式从宿主细胞的质膜上释放出来。来源于水泡性口炎病毒的融合性外壳G糖蛋白( VSV-G)已被用于逆转录病毒和慢病毒载体中作为基因转移的重要手段。VSV-G标签(序列:YTDIEMNRLGK)来源于VSV-G蛋白的一部分,经常被用于融合在目的

如何选择合适的KT3标签抗体?

标签抗体的效价如何考察?KT3表位标签经常被重组到目标蛋白的的N末端或C末端,以实用免疫组织化学或荧光化学技术来实现可视化观察和定位。KT3标签的氨基酸序列为KPPTPPPEPET。Abbkine特异性的KT3单克隆抗体能识别来源于来自猿猴病毒40大T抗原( SV40)序列的KT3融合蛋白。如何

GFP抗体—绿色荧光蛋白的单克隆和多克隆标签抗体

GFP(Green Fluorescent Protein,绿色萤光蛋白)是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛 应用于各种细胞

蛋白上的标签是否会影响抗体制备?

通常重组蛋白上的GST(谷胱甘肽S-转移酶)或MBP(麦芽糖结合蛋白)标签分子量较大,含有许多抗原位点,在免疫时会成为抗原从而影响特异性抗体的制备。所以作为抗原的重组蛋白最好不带有GST或MBP标签。一些小分子量的标签,如His、Myc、Flag基本不会影响特异性抗体的制备。NovoPro用于制备抗

常见蛋白标签6xHis标签

6xHis标签,也称为多组氨酸标签(polyhistidine ),His6标签或hexa组氨酸标签,这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列,它的序列如下所示:相对小的分子量,低的免疫原性,亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性,因此在天然

大鼠组胺(HIS)酶联免疫分析

大鼠组胺(HIS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中组胺(HIS)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠组胺(HIS)水平。用纯化的大鼠组胺(HIS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中

关于免疫沉淀实验一抗的选择介绍

  某些目的蛋白因为没有对应的特异性抗体而无法进行免疫沉淀,如抗体所识别的抗原表位被相互作用所遮蔽,无法与目的蛋白相互作用或抗体选择不合适,所选抗体不能识别处于天然构象的蛋白等,可以采用一个表位标记蛋白质,再选择针对此表位的标签抗体来进行免疫沉淀。(铭研生物提供的标签抗体用于IP实验,涉及FLAG、

如何选择合适的高灵敏度RFP(DsRed)标签抗体?

红色荧光蛋白(RFP)是从太平洋与海葵相关的 (Discosomasp)中分离出来的一种能在紫外线的照射下可发射红色荧光的蛋白。在细胞中荧光转换效率高.是目前发现的具有最长激发波长与发射波长的自然发光荧光蛋白,RFP基因编码的蛋白质由225个氨基酸组成,相对分子质量(Mr)为25.9ku.RFP

Abbkine新上市标签内参直标抗体染料细节及优势

标签抗体和内参抗体在生命科学研究中被广泛使用,是WB, IF, IHC等实验必不可少的关键试剂,但尽管如此,研究者们还是需要为他们的实验配上一个合适二抗(HRP或者荧光基团),这不仅增加了实验试剂的采购成本,而且增加了额外的操作步骤和时间消耗,更增加了非特异性信号的潜在可能性。Abbkine凭借

重组蛋白表达的几种常用标签介绍

 重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。本文将简要介绍几个常用载体标签及其功能和优点。一. GST标签GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在原

标签酶消化释放标签实验

试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTE仪器、耗材Eppendorf 试管实验步骤实验方案 A1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.时收集上清液(含有释放的 cDNA 标签)4.用 LoTE 扩容到 200mL。5.等体积的

标签酶消化释放标签实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE 仪器、耗材 Eppendorf 试管 实

标签酶消化释放标签实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTE仪器、耗材 Eppendorf 试管实验步骤 实验方案 A1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.时收集上清液(含有释放的 cDNA 标签)4.用 LoTE 扩容到 200mL。5.等体