常见蛋白标签6xHis标签

6xHis标签,也称为多组氨酸标签(polyhistidine ),His6标签或hexa组氨酸标签,这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列,它的序列如下所示:相对小的分子量,低的免疫原性,亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性,因此在天然和变性的条件下,多组氨酸标签是被公认为最广泛使用的亲和标签用于一系列的蛋白纯化目的。可以检测和纯化重组蛋白而无需使用蛋白特异性的抗体或探针,同时抗His标签抗体的存在用于His标签蛋白的检测中使6xHis标签更加的普遍和受欢迎。6xHis标签通常在重组蛋白的纯化中使用,这是因为组氨酸残基的序列可以在特定的缓冲液条件下结合到几种类型固定的离子上(比如镍,钴和铜),从而达到容易检测和纯化His标签蛋白的目的。例如在大肠杆菌和其他原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白通常使用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为IMAC,IMAC的全称是 imm......阅读全文

常见蛋白标签6xHis标签

6xHis标签,也称为多组氨酸标签(polyhistidine ),His6标签或hexa组氨酸标签,这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列,它的序列如下所示:相对小的分子量,低的免疫原性,亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性,因此在天然

形形色色的蛋白标签(二)

  体内标记   对于in vivo标记,人们通常用化学标记的营养物喂养细胞,让它们掺入新合成的蛋白、核酸或代谢物。之后收获细胞,分离出这些分子,从整体上查看细胞行为,或利用抗体或其他捕获试剂来研究某个蛋白。   蛋白质组研究人员常用的方法是SILAC,即细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记。两

形形色色的蛋白标签(一)

  一提到蛋白研究,首先跳入脑海的当然是抗体。的确,很多蛋白实验都离不开抗体。然而,即使抗体公司时不时推出新产品,但许多蛋白还是没有相应的抗体,我们只能望电脑兴叹。而且,也有很多抗体无能为力的情况,比如观察蛋白在细胞内的运输。所幸,各种各样的蛋白标签让我们能够从容应对这些挑战。   遗传标签  

GST标签蛋白纯化介质使用介绍

GST标签蛋白纯化介质 Affinity Resin for GST-tag Protein一、GST标签蛋白纯化介质简介:     GST标签蛋白纯化介质专为GST(谷胱甘肽硫转移酶)标签融合蛋白的纯化而设计,采用该产品可快速从细胞发酵液中提取含有GST标签的目标蛋白,上海惠诚生物提供GST标签蛋

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤 一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素 亲和力和可溶性的选择 在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启

Myc标签融合蛋白检测,封闭应用数据

Myc 标签融合蛋白 - 检测,封闭Myc Tag来源于c-myc基因表达产物,其序列为EQKLISEEDL。以高亲和力闻名的Myc Tag的单克隆抗体(克隆号2D5),可以检测天然和变性的Myc融 合蛋白,被广泛用于WB、IF、IP实验。在天然洗脱条件下,使用Myc标签多 肽来与重组蛋白进

轻松纯化His标签胞外分泌蛋白

从真核细胞上清液中纯化蛋白是一项繁琐的工作。通常情况下胞外分泌蛋白的浓度很低,且蛋白很容易被细胞上清液中的蛋白酶降解。当然,Cube Biotech实验室也面临同样的问题。然而一天,Cube Biotech的科学家想到是否我们可以把磁珠直接加入溶液,从平衡体系中分离出带His标签的蛋白?通过

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素亲和力和可溶性的选择在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正

研究GST标签蛋白,原来可以这么简单

为什么要研究GST标签蛋白?谷胱甘肽巯基转移酶(GST)是在真核细胞中天然存在的大小26KDa的蛋白。GSTs可以催化外源性物质结合到谷胱甘肽(GSH)上,因而对诸多环境毒素包括化疗药物、残留的药物、除草剂及致癌物起到解毒作用。许多研究人员将GST的DNA序列整合到表达载体上来生产带有GST标签的融

Flag标签蛋白检测抗体实验应用说明

Flag标签蛋白检测抗体Abbkine提供可用于WB,IF,IP应用的Flag抗体,特异性检测Flag标签融合蛋白,Flag标签抗体可识别在细胞内表达的Flag标记重组蛋白,包括Flag位于氨基末端、中段以及羧基末端的重组蛋白。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽( DYKDDDDK)融

Biotin标签蛋白纯化工具的应用类型

Biotin 标签与其它标签的球形蛋白不同,生物素(Biotin)要小得多,这使蛋白质间的干扰更小;同时可以多个生物素偶联在单个蛋白质上,利用链霉亲和素,可使检测效果最大化。此外,生物素含有戊酸侧链,很容易与其它基团反应偶联生成相关衍生物,且不影响链霉亲和素与生物素的结合功能,极大拓展了生物素的应用

用于蛋白质表达的标签实验2

三、标签的去除由于蛋白标签可能会干扰目标蛋白质的正常功能,所以在完成其促进溶解或亲和纯化的作用后,标签的去除对于生物学和功能研究很有帮助,对 GST 或 MBP 这样的大标签尤其如此,尽管有一些例子显示融合了标签的蛋白质更易结晶 (Smythetal.,2003)。大多数用来向目标蛋白质添加标签的商

重组蛋白表达的几种常用标签介绍

 重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。本文将简要介绍几个常用载体标签及其功能和优点。一. GST标签GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在原

用于蛋白质表达的标签实验(二)

二、可溶性标签在重组蛋白表达中,特别是当在细菌中表达真核蛋白时,主要的瓶颈在于蛋白质的正确折叠与可溶性。一些可溶性蛋白已被作为标签用来改善目标蛋白质的折叠。这些标签应该与其他方法共同使用来促进蛋白质的折叠,如诱导后降低培养温度或者共表达伴侣蛋白(BaneyxandMujacic,2004;deMar

用于蛋白质表达的标签实验(一)

一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素亲和力和可溶性的选择在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正

全新的蛋白质标签实现灵敏且定量的蛋白检测

  Promega的科学家近日开发出一种新方法,可对细胞内的蛋白质进行轻松检测。这种称为HiBiT的多肽标签可与任何蛋白质相连接,从而实现高度定量且极其灵敏的生物发光检测。这样无需使用抗体,即可利用生物发光对蛋白进行定量。  HiBiT只有11个氨基酸,因此很容易与CRISPR/Cas9基因编辑技术

标签酶消化释放标签实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE 仪器、耗材 Eppendorf 试管 实

标签酶消化释放标签实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTE仪器、耗材 Eppendorf 试管实验步骤 实验方案 A1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.时收集上清液(含有释放的 cDNA 标签)4.用 LoTE 扩容到 200mL。5.等体

标签酶消化释放标签实验

试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTE仪器、耗材Eppendorf 试管实验步骤实验方案 A1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.时收集上清液(含有释放的 cDNA 标签)4.用 LoTE 扩容到 200mL。5.等体积的

非蛋白质新标签可追踪细胞过程

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504716.shtm 图片来源:俄罗斯卫星通讯社科技日报莫斯科7月13日电 (记者董映璧)俄罗斯研究人员使用一种新开发的非蛋白质光学标签,可在不改变基因组的情况下标记单个细胞。使用该项技术能在任何

蛋白上的标签是否会影响抗体制备?

通常重组蛋白上的GST(谷胱甘肽S-转移酶)或MBP(麦芽糖结合蛋白)标签分子量较大,含有许多抗原位点,在免疫时会成为抗原从而影响特异性抗体的制备。所以作为抗原的重组蛋白最好不带有GST或MBP标签。一些小分子量的标签,如His、Myc、Flag基本不会影响特异性抗体的制备。NovoPro用于制备抗

VSVG标签融合蛋白检测,封闭实验手册

VSV-G,来源于水泡性口炎病毒的融合性外壳G糖蛋白,常被用于逆转录病毒和慢病毒载体的生物医学研究。VSV-G标签通常融合于目的蛋白的N-或者C-端,以便使用免疫组化方法来进行观察和分析。Fig.1.Immunofluorescence staining (1:1,000) of VSV-G fus

【分享】几种常用的蛋白标签的功能和优点

  重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。本文将简要介绍几个常用的蛋白标签及其功能和优点。  一. GST标签  GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。

使用酶标仪的细胞成像系统检测标签蛋白的表达

优势:   带细胞成像系统的功能模块扩展了微孔读板机的检测应用2.   方便检测每个细胞或每孔的标签蛋白的表达水平3.   按照一般微孔读板机的简单流程4.   细胞可视化数据输出,增加了数据可信性某些细胞蛋白存在或不存在,可代表着细胞对某些刺激的反应、某种分化的状态或特定细胞类型的独特特征或者基因

BIORAD-采用-Profinity-eXactTM-纯化无标签的重组蛋白

  BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白   亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性,就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合,从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方

方案9-蛋白质的同位素亲和标签实验

实验材料 透析或沉淀处理蛋白样品 试剂、试剂盒 DTTEDTAICAT 试剂三丁基膦Tris胰酶 实验步骤 第一阶段 ICAT 标记蛋白 第二阶段 阳离子交换清洗 ICAT 样品 第四阶段 ICAT 标记多肽的质谱分析 展开

BIORAD-采用-Profinity-eXactTM融合标签表达系统纯化-重组蛋白

  BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白   亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性,就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合,从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方

蛋白纯化的首选标签Histag的优势及应用

His标签蛋白纯化工具-蛋白纯化必备在大肠杆菌和别的原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白一般运用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个进程中,支撑物 (一般是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用适宜的耦合试剂来进行衍生,比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA

补平标签实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 BSA LoTE cDNA标签 实验步骤

补平标签实验

是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验 现代神经科学研究技术 作者:U.Windhorst & H. Johansson  翻译:赵志奇 陈军 实验步骤 实验方案 A 1.向两个含有释放的 cDNA 标签的试管中加入: 2.在 37°C