轻松纯化His标签胞外分泌蛋白
从真核细胞上清液中纯化蛋白是一项繁琐的工作。通常情况下胞外分泌蛋白的浓度很低，且蛋白很容易被细胞上清液中的蛋白酶降解。当然，Cube Biotech实验室也面临同样的问题。然而一天，Cube Biotech的科学家想到是否我们可以把磁珠直接加入溶液，从平衡体系中分离出带His标签的蛋白？通过尝试，整个纯化过程变得比以前更加容易。因此，我们开发了一个新的方法来纯化分泌在胞外的His标签蛋白。当然，新的方法能够成功也是因为Cube Biotech所有的亲和纯化磁珠：NTA，IDA，和新的INDIGO系列产品都可以通过高温蒸汽灭菌锅处理。有兴趣尝试我们新方法用于下一次表达的His标签胞外分泌蛋白？请参看我们如下的操作流程。 1、拿一小瓶PureCube His标签亲和磁珠（Ni-INDIGO、Ni-NTA、Ni-IDA）移去保护液并添加同体积PBS后用高温蒸汽灭菌处理。2、在培养瓶中装入细胞培养液并接种细......阅读全文
轻松纯化His标签胞外分泌蛋白
从真核细胞上清液中纯化蛋白是一项繁琐的工作。通常情况下胞外分泌蛋白的浓度很低，且蛋白很容易被细胞上清液中的蛋白酶降解。当然，Cube Biotech实验室也面临同样的问题。然而一天，Cube Biotech的科学家想到是否我们可以把磁珠直接加入溶液，从平衡体系中分离出带His标签的蛋白？通过
蛋白纯化的首选标签Histag的优势及应用
His标签蛋白纯化工具-蛋白纯化必备在大肠杆菌和别的原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白一般运用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个进程中，支撑物 (一般是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用适宜的耦合试剂来进行衍生，比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA
基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
。。。等待高人回答txstbbm(站内联系TA)可能情况：1，ORF不完整或者不是预期的ORF，His没表达出来2，His被空间结构所掩盖，建议变性后再过柱cloudy3197(站内联系TA)同一ls，可能跟蛋白空间结构有关，变性后再上柱。2. 柱子是新的还是以前用过的,旧的应该很好的处理一下,3.
His标签蛋白纯化试剂盒操作步骤（以大肠杆菌为例）
使用说明：对于用镍柱纯化大肠杆菌中His标签蛋白比较熟悉的使用者可以直接参考“4. 简化的操作流程”。否则请参考如下详细内容：如下以最常见的大肠杆菌中表达纯化His标签重组蛋白为例，说明本产品的使用方法。在其它体系中表达时，请参考该表达体系的相关使用说明，并借鉴大肠杆菌中纯化His标签重组蛋白的使用
Histag蛋白纯化技术解读（二）
实验流程对比展示通过实验流程的对比发现，可以看出BeaverBeads™与金属传统离子鳌和琼脂糖预装柱纯化组氨酸标签蛋白操作流程的优化与效率的提升。图：磁性分离器图：BeaverBeads™ IDA-Nickel产品包装形式Cat. 70501-K10产品包含实验过程及磁珠再生所需要的各种试剂，更方
Histag蛋白纯化技术解读（一）
随着基因组学和基因工程技术的发展，快速获得目标蛋白的基因已相对容易。将目标基因构建到原核或真核细胞系统中进行蛋白质的重组表达是获得目的蛋白的有效方法。今天，小海狸就为大家来详细说一说。His-tag蛋白纯化技术在进行基因重组时，通常将目的蛋白和一个亲和纯化标签进行融合表达，然后借助亲和层析方法实现蛋
His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标
his蛋白分离纯化时用咪唑的原因
是因为his含有咪唑基团，咪唑环可以与二价金属阳性子结合。呃，完整的解释是这样的： his含有咪唑基团，可以与二价金属阳性子结合，当带His标签的蛋白质结合在特殊的阳离子柱上的时候，可以被咪唑竞争下来。。。
如何选择合适的His标签抗体？
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标
GST标签蛋白纯化介质使用介绍
GST标签蛋白纯化介质 Affinity Resin for GST-tag Protein一、GST标签蛋白纯化介质简介： GST标签蛋白纯化介质专为GST(谷胱甘肽硫转移酶)标签融合蛋白的纯化而设计,采用该产品可快速从细胞发酵液中提取含有GST标签的目标蛋白，上海惠诚生物提供GST标签蛋
带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题
蛋白的保存很大程度上依赖于蛋白本身的结构稳定性，其次和保存条件优化有关；尽量避免蛋白的反复冻融，这会对蛋白的结构和活性造成破坏；像你说到的第二天就要用，根本没必要放在-70℃低温，一般来讲，尽量安排好实验周期，在3天内用完蛋白（4℃保存）是理想条件；如果不得不保存，要分装，留下马上就用的放在4℃，其
带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题
1.蛋白的保存很大程度上依赖于蛋白本身的结构稳定性，其次和保存条件优化有关；2.尽量避免蛋白的反复冻融，这会对蛋白的结构和活性造成破坏；像你说到的第二天就要用，根本没必要放在-70℃低温，一般来讲，尽量安排好实验周期，在3天内用完蛋白（4℃保存）是理想条件；3.如果不得不保存，要分装，留下马上就用的
亲和偶联－－组氨酸标签（Histag）
亲和层析法（IMAC）是目前最广泛使用的纯化技术，该技术是基于蛋白表面残基（组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等）与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合，该过渡金属 / 蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上，通常通过降低 pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。 低耐压ABT 提供两种螯合微球，使
Biotin标签蛋白纯化工具的应用类型
Biotin 标签与其它标签的球形蛋白不同，生物素（Biotin）要小得多，这使蛋白质间的干扰更小；同时可以多个生物素偶联在单个蛋白质上，利用链霉亲和素，可使检测效果最大化。此外，生物素含有戊酸侧链，很容易与其它基团反应偶联生成相关衍生物，且不影响链霉亲和素与生物素的结合功能，极大拓展了生物素的应用
BIORAD－采用－Profinity－eXactTM－纯化无标签的重组蛋白
BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白 亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性，就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合，从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方
BIORAD－采用－Profinity－eXactTM融合标签表达系统纯化－重组蛋白
BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白 亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性，就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合，从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方
His抗体的简介
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融
BIORAD－采用－Profinity－eXactTM融合标签表达系统纯化无标签...
BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性，就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合，从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方法不同之处在于
轻松搞定新型冠状病毒核酸纯化
众所周知，核酸提取是做下游任何分子检测的基础，高质量的核酸也是保证下游检测结果的必要前提。在本次新型冠状病毒疫情中，不管QIAGEN经典的基于硅胶膜法病毒核酸提取技术还是基于磁珠法的自动化核酸提取平台均受到了广大客户的信赖和喜爱。在美国，QIAGEN多种用于RNA提取的自动化设备和试剂也被囊括在FD
重组蛋白表达的几种常用标签介绍
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。本文将简要介绍几个常用载体标签及其功能和优点。一. GST标签GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶，它的天然大小为26KD。将它应用在原
常见蛋白标签6xHis标签
6xHis标签，也称为多组氨酸标签（polyhistidine ），His6标签或hexa组氨酸标签，这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列，它的序列如下所示：相对小的分子量，低的免疫原性，亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性，因此在天然
【分享】几种常用的蛋白标签的功能和优点
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。本文将简要介绍几个常用的蛋白标签及其功能和优点。 一. GST标签 GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶，它的天然大小为26KD。
原核表达之目的基因克隆
1. 了解实验课题对目的蛋白的要求包括：目的蛋白分子量有多大，表达目的（是蛋白结晶、药剂结合还是制备抗体，不同目的对蛋白要求不同）；是否要其可溶；是胞内表达还是分泌表达，是组成型表达还是诱导型表达；另外，还要了解蛋白表达后需要采用什么样的方式进行纯化，纯化标签有多大，蛋白纯化后是否需要将标签去除（即
用固化－Ni2+吸收色谱纯化带组氨酸标签的蛋白实验
多聚组氨酸能与多种过渡金属和过渡金属螯合物结合，因此带暴露的 His-6 的蛋白能结合于固化 Ni2+树脂，用适当缓冲液冲洗去除其他蛋白后，再用可溶的竞争性螯合剂洗脱可以回收靶蛋白。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达带多聚组氨酸标
用固化－Ni2+吸收色谱纯化带组氨酸标签的蛋白实验
用固化 Ni2+吸收色谱纯化带组氨酸标签的蛋白实验 实验材料 表达带多聚组氨酸标签的蛋白的大肠杆菌细胞
用固化－Ni2+吸收色谱纯化带组氨酸标签的蛋白实验
实验材料 表达带多聚组氨酸标签的蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 结合缓冲液咪唑洗脱缓冲液TritonX-100洗涤缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Sorvall SS-34 转头或相当的转头层析柱固化 Ni2+层析树脂摇床实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录 1。贮存
镍柱纯化蛋白没有挂柱是什么原因
可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。例如：因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签；纯化工艺不利于结合作用发挥，例如咪唑；蛋白不稳定，标签掉落。
镍柱纯化蛋白没有挂柱是什么原因
可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。例如：因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签；纯化工艺不利于结合作用发挥，例如咪唑；蛋白不稳定，标签掉落。
－离心机+PD－SpinTrap，让小体积样品不再覆水难收
在全世界都在谈论互联网+的时候，小编看到了实验室里朴(ri)实(chang)无(bi)华(bei)的离心机。如果离心机和各种小神器强强联手，除了普通的样品分离还会发生什么？我们还是从蛋白脱盐说起。 “我拿什么拯救，样品覆水难收……”让小编略微平复下心绪。几十微升小体积蛋白样
蛋白的表达与纯化
蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了，没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列，查阅相关文献，看目的基因在那些细胞或者组织中高表达，进而设计该基因的引物，扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建