上海旦鼎谈关于温度梯度PCR和降落PCR
关于温度梯度PCR和降落PCR的区别： 温度梯度PCR是指在退火温度不太明确时，为了找到优退火温度，在一台PCR仪上同时做多管PCR，每一管放在仪器内不同列（有的是不同行）上，分别进行PCR（如50℃~60℃可以分6管，分别为50，52，54，56，58，60度），后看看哪个温度的效果好。总之是用来进行退火温度优化的。 降落PCR是在同一个PCR管内进行PCR，只是每个循环的温度不同（如每个循环降1度）。一般兼并引物用这种方法多些。 降落PCR（touchdown PCR），一种PCR技术： 设计多循环反应的程序，以使相连循环的退火温度越来越低。由于开始时的退火温度选择为高于估计的Tm值，随着循环的进行，退火温度逐渐降到Tm值，并终低于这个水平，用于确保个引物—模板杂交事件发生在互补的反应物之间，即那些产生目的扩增产物的反应物之间。尽管退火温度终会降到非特异杂交的Tm值，但此时目的扩增产物已开......阅读全文
【分享】降落PCR的原理及常见问题解答
提问：降落PCR（Touchdown PCR）的原理？回答：Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度，直至达到“Touchdown”退火温度，然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度之间的任
伯乐T100pcr仪的使用方法
美国伯乐T100PCR仪是非常常用的PCR梯度PCR，上海旦鼎技术为您讲解使用方法样品管/板的放置 如果使用单个的PCR管，请把绿色支持框放到加 热模块上以防止PCR管受热变形。支持框的正反面可分别用于平顶或圆顶试管盖（详见图示）。如果不使用绿色支持框，在加热模块的四个顶角和边缘处均
免疫PCR(ImmunoPCR)概念和基础
（一） 免疫PCR技术的概念免疫PCR是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上，再用PCR方法将这段DNA扩增，然后用常规方法检测PCR产物。免疫PCR集PCR的高灵敏度与抗体和抗原反应的特异性于一体。其突出的特点是指数级的扩增效率带来了极高的敏感度，能检出浓度低至2ｎｇ
刚合成的引物用降落PCR的原因是什么？
因为理论计算的TM值用来确定退火的温度只是一个参考呀,最合适的退火温度会因为各种原因而有所差异,就连PCR仪都会有影响的,我们实验室就是,好多都是在一台能拉出条带,而在另一台上就拉不出条带,或者相反的。降落（TD）PCR代表了一种完全不同的PCR优化方法。由于开始时的退火温度选择高于估计的Tm值，随
免疫PCR(ImmunoPCR)概念、组成和免疫PCR产物的检测
（一） 免疫PCR技术的概念免疫PCR是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上，再用PCR方法将这段DNA扩增，然后用常规方法检测PCR产物。免疫PCR集PCR的高灵敏度与抗体和抗原反应的特异性于一体。其突出的特点是指数级的扩增效率带来了极高的敏感度，能检出浓度低至2ｎｇ
关于荧光定量PCR
实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号
多重pcr和多重荧光定量pcr的区别
正常啊，定量PCR很灵敏的，体系稍微变化就会误差很大，更何况你这样反应体系都不一样。所以一般定量结果只是作为佐证，最好别太相信。你想做好，就尽量保证每个体系是一致的，最后结果趋势是一致的就行了。
反向pcr和反式pcr一样么
反式PCR,或者称反转录PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)、逆转录PCR,是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形.在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增.P
反向PCR（Inverse－PCR）技术的定义和特点
1.概述：反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段，而常规PCR扩增的是已知序列的两引物之间DNA片段.实验时选择已知序列内部没有切点的限制性内切酶对该段DNA进行酶切，然后用连接酶使带有粘性末端的靶序列环化连接，再用一对反向的引物进行PCR，其扩增产物
巢式PCR(Nested－PCR)定义、原理和步骤
巢式PCR的定义巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部）结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片断短于第一次扩增。巢 式PCR的好处
pcr仪的选型分析
PCR仪主要应用于科研研究，教学，医学临床，检验检疫等机构。目前市场上PCR仪的品牌非常多，很多客户在选购上十分纠结。上海旦鼎作为PCR仪的专业供应商，为您提供各个品牌和各个规格的PCR仪产品，今天上海旦鼎来为大家推荐PCR仪推荐品牌，方便大家更好的选购！推荐品牌一、美国ABI美国ABI公司应用生
关于传统定量PCR内标对定量PCR的影响
若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标
关于PCR，你知道多少？（五）－几种特殊的PCR
关于PCR，你知道多少？（五） ----几种特殊的PCR本篇文章由专业生化试剂供应商上海岚兴生物为您提供。 1、锚定PCR（anchored PCR）通常采用的PCR反应必须知道欲扩增的DNA或RNA片段两侧的序列，而在大多数情况下对某些序列本身或其旁侧序列并不清楚，“锚定PCR”可以帮助克服序列未
PCR操作范例和PCR反应系统的组成(3)
（四）Taq DNA聚合酶的量 典型PCR反应混合物中，所用酶浓度为2.5U/μl，常用范围为1～4U/100μl。由于DNA模板的不同和引物不同，以及其它条件的差异，多聚酶的用量亦有差异，酶量过多会导致非特异产物的增加。 由于生产厂家所用兵配方、制造条件
PCR操作范例和PCR反应系统的组成(1)
一、PCR操作范例 在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2+和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃ 变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次
原位PCR和原位RTPCR操作规程
（一）、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 （二）、操作流程 1、原位PCR步骤 1）预处理： （1）切片常规脱蜡； （2）0.2mol/L HCl处理10min； （3）5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10m
原位PCR和原位RTPCR操作规程
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。一、仪器设备英国Thermo Hybaid原位PCR仪。二、操作流程1、原位PCR步骤（1）预处理
PCR操作范例和PCR反应系统的组成(2)
二、PCR反应系统的组成（一）PCR缓冲液（PCr Buffer）用于PCR的标准缓冲液见PCR操作范例。于72℃时，反应体系的pH值将下降1个单位，接近于7.2。二价阳离子的存在至关重要，影响PCR的特异性和产量。实验表明，Mg2+优于Mn2+，而Ca2+无任何作用。1．Mg2+浓度Mg2+的最佳
巢氏PCR（Nested－PCR）技术的定义和特点
1.定义：也称套式PCR是指利用两套PCR引物（巢式引物）进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。在这种技术中，首先用一对外引物进行第1轮PCR，然后再使用第1对引物扩增的DNA 序列内部的一对引物再次扩增。2.优点：由于巢式PCR反应
分析基因扩增仪的技术特性
基因扩增仪是由上海旦鼎国际贸易有限公司代理销售的优质产品之一。上海旦鼎国际贸易有限公司是中国实验仪器权威的基因扩增仪商。下面旦鼎就为您介绍一下基因扩增仪技术特性。 基因扩增仪的技术特性： 1、加热模式：立体膜加热技术 2、制冷技术：新一代“peltier”效应“半导体热泵制冷”[1]
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
PCR简介/PCR仪
PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
Troubleshooting－for－PCR－and－multiplex－PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
重叠PCR—overlap－PCR
1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理：变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后，再进行指数扩增的PCR过程。 2、基本原理*步：PCR产生两个或者几个片段，这几个片段之间必须有重叠区。 第二步：以两个片段为例，见上图，*步产生的两个片段，A D链之间有互补，B
关于PCR技术的介绍
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，[1]PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大
关于PCR技术那些事
什么是PCR？聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）是一种分子生物学技术，用于体外扩增特定的DNA片段。PCR技术发展简史PCR之父 Kary MullisPCR反应基本原理和反应过程基本原理：反应过程：变性——将被复制的DNA片段在高于其Tm的条件下（94~9
关于PCR你了解多少？
实验原理 PCR是体外人工选择性扩增DNA的一种方法，它类似于生物体内DNA的复制。在生物体内DNA复制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs；而体外PCR反应同样需要类似的成分，有模板、引物、PCR Buffer、Taq酶、dNTPs。其中引物是人工设计的特定序列，实现对特
普通PCR梯度PCR－原位PCR－荧光定量PCR仪的区别
普通PCR仪： 一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，称之为普通PCR仪，也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。如；（ABI 2720） 梯度PCR仪： 一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称
标记PCR和彩色PCR技术的定义及特点介绍
标记PCR(Labelled Primers，LP-PCR) 是利同位素或荧光素对PCR引物的5‘端进行标记，用来检测靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR，CCAPCR)，是LP-PCR的一种，它用不同颜色的荧光染料；标记引物的5'端，因