Westernblot电泳制胶时出现好多泡泡该怎么办？
有的同学跑Western-blot电泳制胶时出现好多泡泡，一时不知道什么原因，仔细分析后发现以下原因造成：1）首先，玻璃板一定要洗干净，用洗洁净洗，冲干净后再用双蒸水冲一，晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分，混匀的时候用手轻轻摇匀，如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。2）配胶时混匀要轻，尽量不产生气泡，上胶时要快，枪也不打到底。加完分离胶后用双蒸水封，待其凝固。即使在上胶时液面上有气泡，加水后也会浮上来。分离胶凝好后，倒掉里面的水，用吸水纸吸干，再加浓缩胶，迅速插梳子。3）倒胶的时候，用1ml的枪沿一侧缓缓加入，不要打到头，以免带入气泡！4）将胶在小烧杯里配好后，将电泳槽略微倾斜，将烧杯的嘴靠在玻璃边缘，直接倒进去，速度快，而且不容易产生气泡，不妨试试5）用双蒸水封时建议用200ul的枪加水，这样压力小，以免把胶冲起来！6）国产的只能是缓慢加样，别把气泡加进去。如果加进去了，小心把整个板在桌上敲敲可以让气泡浮上来。7）分离胶中......阅读全文
电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项
电泳时胶回收切胶的注意事项： 1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片好洗净，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳
电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项
电泳时胶回收切胶的注意事项：电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片好洗净，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3. 关于防护
电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项
电泳时胶回收切胶的注意事项： 1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。
24cm－IPG胶条二维电泳
实验概要本实验应用二维电泳(two-dimensional gel electrophoresis，2DE)技术对提取的2D大鼠视网膜组织蛋白进行分离，获得了分辫率高和重复性好的2DE图像，建立了2DE分离技术的平台，为进一步研究莫定了基础。实验步骤1. 清洗器具用品：清洗所有的干胶条套件，包括胶条
琼脂糖凝胶电泳，做胶加EB目的
染色啊。你agarose胶电泳跑DNA，根据大小不同电泳速度不同，可是最后你需要看啊，怎么看呢？可见光下看不见DNA的。所以加EB也好，SYBRgreen也好，我们实验室用的genefinder也好，都是将DNA染色，用特殊的化学分子与DNA结合，并且在特殊波长的激发光下发射荧光，荧光强度与DNA含
琼脂糖凝胶电泳，做胶加EB目的
在搜搜上找的同一问题的答案：“染色啊。你agarose胶电泳跑DNA，根据大小不同电泳速度不同，可是最后你需要看啊，怎么看呢？可见光下看不见DNA的。所以加EB也好，SYBR green也好，我们实验室用的genefinder也好，都是将DNA染色，用特殊的化学分子与DNA结合，并且在特殊波长的激发
RNA电泳跑胶为什么没有5S条带
生物体内一般含有核糖体rna（rrna）、信使rna（mrna）、转运rna(trna)三种主要的rna，其中rrna含量最多,提取组织总rna所得最多的就是rrna。真核生物中含有5s、5.8s、18s、28s,原核生物中有5s、16s、23s；而植物组织中一般较多的为5s、18s、28ss代表沉
制胶过程中需要注意的细节及操作指南
说到Western Blotting，估计所有技术员都会联想到蓝底上的黑色条带，或者是仪器扫描的白底黑条图片。经过了漫长的实验流程，得到的会是清晰的、符合实验理论的完美结果，或者更多的是其他让自己略感失望的结局。比起其他分子生物学实验，Western Blotting实验似乎更加冗长、更加考验技术，
SDSPAGE蛋白质电泳－配胶缓冲液系统对电泳的影响
在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介
聚丙烯酰胺凝胶(PAGE胶电泳)电泳的方法与银染方法
PAGE胶电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳 ）主要是以PAGE为介质，根据DNA分子大小和电荷分离DNA分子。PAGE胶电泳采用银染法进行显色。银染的原理：一、银离子（一般是AgNO3 )和DNA结合;二、还原剂甲醛把Ag+ 还原成银颗粒，最终DNA呈现为黑褐色。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持
westernblot操作注意事项
一．配胶 1． 注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。 2． 分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的
配胶缓冲液系统对电泳的影响有哪些？
在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子
PCR产物电泳做胶回收不也得到纯化的目的
PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶，收集其中的DNA片段。这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集。如果你的PCR产物具有非特异性条带，那么一定需要使用胶回收试剂盒。
如何防止聚丙烯酰胺垂直电泳漏胶现象
如何防止聚丙烯酰胺垂直电泳漏胶现象已成为实验室研究人员比较头疼的问题！1. 固定玻璃板时，先将厚薄玻璃板在桌面对齐后在垂直面上稍微向厚板倾斜20度，使底面薄板略高于厚板。2. 将固定好的玻板固定于放有海绵垫的制胶架上，固定时用手稍用力往下压，此时封闭的灌胶系统准备完毕。3.
蛋白转移电泳槽开启式转移胶架，操作简便
产品介绍：转移电泳槽是用来对少量核酸及蛋白质样品进行转移电泳的装置。开启式转移胶架，操作简便。槽内制冰盒，可预制冰块置于槽内，在转移电泳过程中起降温作用。可同时转印二块83×73mm胶，做到一槽多用，可节省实验空间和实验经费。产品特点：1.槽体采用高强度高透明度聚碳酸脂材料注塑成型，免除液体渗漏、便
选择合适的PCR胶浓度、电泳电压及时间的教程
基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异，以小鼠基因组DNA为模板进行PCR，并以凝胶电泳比对比不同基因型特异产物的大小，根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。上期我们讲述了PCR反应体系的选择，今天我们就开始学习PCR胶浓度、电泳电压及时间的选择。
WB电泳浓缩胶没压成一条线
第一、样本本身含有高盐。第二、积层胶长度不足，一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。第三、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣，如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液，反之用3次就丢弃吧！第四、上样量有关。dxylark已经叙述。第五、电
蛋白胶染色，您还在用考马斯亮蓝？
无需加热，2分钟显色，10分钟完成染色，无需脱色即可观察！聚合美蛋白染色试剂“染立显”超敏超速无毒不加热蛋白染胶液（货号：MF767），不含甲醇乙酸，安全无毒，灵敏度高，可用于SDS-PAGE胶（变性）及Native胶（非变性），也可以用于Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的染色。 蛋白
电泳系统Biometra
Biometra为您提供各种核酸/蛋白质电泳设备，其中TGGE系统是独家生产的新一代产品，并享受ZL保护。该系统能够产生稳定而有效的温度梯度，基于生物大分子在不同温度下分子构象发生变化，进而发生电泳行为变化的原理，用于研究生物大分子突变、分子内或分子间相互作用、蛋白热稳定性及其他相关研究。
电泳系统Biometra
Biometra为您提供各种核酸/蛋白质电泳设备，其中TGGE系统是独家生产的新一代产品，并享受ZL保护。该系统能够产生稳定而有效的温度梯度，基于生物大分子在不同温度下分子构象发生变化，进而发生电泳行为变化的原理，用于研究生物大分子突变、分子内或分子间相互作用、蛋白热稳定性及其他相关研究。
westernblot操作注意事项（二）
五．封闭及杂交1．封闭：将膜从电转槽中取出，去离子水与PBST或TTBS稍加漂洗，浸没于封闭液中缓慢摇荡一小时。必要时可先用丽春红染色（2%乙酸，0.5%丽春红的水溶液）观察蛋白条带，再用去离子水和TTBS将丽春红洗脱后封闭，如用蛋白marker则可省略此步。2．结合一抗：一抗的准备：使用反贴法时每
蛋白质印迹(westernblot)
实验原理印迹法一般由凝胶电泳；样品的印迹和固定化；各种灵敏的检测手段如抗体、抗原反应等三大实验部分组成。生物大分子凝胶电泳分离 蛋白质印迹法的第一步一般是将蛋白质进行SDS聚丙烯酰胺平板凝胶电泳，使待测蛋白质在电泳中按相对分子质量大小在板状胶上排列。2.分子区带的转移和固定 第二步就是反凝胶电泳已分
westernblot操作注意事项（一）
一．配胶1． 注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。2． 分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气
DYCPI琼脂糖水平电泳槽
DYCP-I 琼脂糖水平槽是用来对少量核酸样品进行快速琼脂糖电泳的装置。制胶可在倒胶槽中完成。配备的多用途倒胶槽可以倒制6×6cm的小胶，也可以倒制12×6cm的宽胶，或6×12cm的长胶，还可以倒制12×12cm的大胶。本电泳槽还配有8种不同齿数和厚度的梳子供选择，包括大数量样品梳（25齿）、
DYCPI琼脂糖水平电泳槽使用说明书
DYCP-I 琼脂糖水平槽是用来对少量核酸样品进行快速琼脂糖电泳的装置。制胶可在倒胶槽中完成。配备的多用途倒胶槽可以倒制6×6cm的小胶，也可以倒制12×6cm的宽胶，或6×12cm的长胶，还可以倒制12×12cm的大胶。本电泳槽还配有8种不同齿数和厚度的梳子供选择，包括大数量样品梳（25齿）、标准
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。
变性凝胶电泳实验——缓冲液梯度测序胶
实验方法原理在本实验方案，测序胶底部的缓冲液浓度大于其顶部浓度，使得短寡核苷酸片段（胶底部）的迁移率相对比长寡核苷酸（顶部）的迁移率要慢一些，这洋凝胶可电泳更长的时间而不至于短核苷醆从底部走失并改善了长核苷酸链的分离度。实验材料DNA试剂、试剂盒TEMEDSDSTBE仪器、耗材烧杯电泳仪实验步骤1.
变性凝胶电泳实验——电解质梯度测序胶
实验方法原理通过简单地提高下槽缓冲液的盐浓度，使凝胶底部的离子強度得以提高，在电泳过程中，盐离子可以电泳进入凝胶并产生重复性好的及有效的梯度。实验材料DNA试剂、试剂盒TBE乙酸钠仪器、耗材电泳仪实验步骤1. 按基本方案步骤1~22灌制凝胶及进行预电泳，但上槽缓冲液为0.5×TBE，下槽为1×TB
变性凝胶电泳实验——含甲酰胺的测序胶
实验方法原理聚丙烯酰胺凝胶加人甲酰胺可以使造成条带压缩的测序产物的二级结构不稳定。实验材料DNA试剂、试剂盒甲酰胺甲醇乙醇TEMEDSDS仪器、耗材电泳仪实验步骤1. 按基本方案步骤1~5组装凝胶平板夹层。 2. 按所需浓度配制甲酰胺凝胶溶液，加热轻轻挽拌使之溶解，冷却至30℃以下。3. 加入
10％SDS－在上层胶中加多了对电泳会有什么影响
SDS在蛋白电泳中的作用是变性，即将所有蛋白质的性状都变成短棒状，这样在电泳时候就不用考虑蛋白分子性状及电荷的问题了。上层胶主要作用是聚集，使蛋白在相同起跑线开始在分离胶中抛开。所以SDS加多了影响应该问题不大。