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小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（四）

3. BMDC的完全成熟注：步骤2中获得的BMDC并非完全成熟的DC,若想得到完成成熟的DC,还需LPS,CD40L或TNF-a等的诱导。3.1 步骤2.4或2.9中获得的BMDC以1200rpm离心5 min,弃上清；3.2 用含重组小鼠GM-CSF（20ng/ml）和IL-4（10ng/ml）的RPMI完全培养液重悬沉淀，计数后调整细胞浓度为1x106/ml；3.3 加入24孔培养板中，并加入成熟诱导剂，如TNF-α（250U/ml），LPS（1μg/ml）、或 CD40L（1μg/ml）等；3.437℃，5% CO2培养箱培养2天；3.5 收集悬浮细胞及疏松贴壁生长的细胞即为成熟树突状细胞。【BMDC大量制备法】-Son法[9]背景：1. 该法可在7天内获得30-40x106个DC/小鼠，是Inaba 经典方法的7-10 倍。DC经14.5%甲泛葡胺（Metrizamide）梯度离心后，纯 &nbs......阅读全文