小鼠脾脏树突状细胞的分离方法
小鼠脾脏DC是研究最多的淋巴组织DC，其特征为组成性表达MHC-II类分子和CD11c。该细胞群可进一步分为三群：主要分布于边缘区的CD4+CD8-CD11b+DC，主要分布于T细胞区的CD4-CD8+CD11b-DC和双阴性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中，CD8+DC表达CD1d和DEC-205。我们可以根据需要选择不同的方法将脾脏DC分选出来。(一)贴壁法小鼠脾脏DC在体外可黏附于玻璃或塑料表面，但培养18-24h后，其黏附能力丧失，借此可与巨噬细胞分离。该方法无需特殊试剂，不需要进行密度梯度离心，操作简单、省时。但用此方法获取的DC数量少，纯度低，而且分离所得的DC处于不同的分化阶段，无法满足精细实验的需要。(二)磁珠分选法CD11c表达于所有已知小鼠DC表面，所以将包被了磁珠的CD11c抗体与小鼠淋巴组织或非淋巴组织悬液共孵育并置于磁场后，结合了CD11c抗体的细胞将留在分选柱中，脱离磁场后可分离得到CD......阅读全文
小鼠脾脏树突状细胞的分离方法
小鼠脾脏DC是研究最多的淋巴组织DC，其特征为组成性表达MHC-II类分子和CD11c。该细胞群可进一步分为三群：主要分布于边缘区的CD4+CD8-CD11b+DC，主要分布于T细胞区的CD4-CD8+CD11b-DC和双阴性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中，CD8+DC表达CD1d和
从小鼠脾脏分离小鼠天然杀伤细胞
实验步骤 基本方案 12.为 检 验 细 胞 纯 度 ，可 加 入 终 浓 度 为 lOug/ml 的 抗 C D 3- F I T C 和 P K 136-PE (抗N K 1. 1 ) 抗体，进 行 流 式 分 析（第四章）。 展
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（一）
【经典的 BMDC 制备方法简图】 DC 是「Dendritic Cells」的缩写，中文全称为「树突状细胞」，因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名。DC是由2011年诺贝尔奖获得者、加拿大 籍科学家 Ralph M.Steinman于1
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（三）
【经典的BMDC培养法】-Inaba法（改良）[3,10]¾ 背景：1. Inaba法获得的BMDC数目为5-7 x 106个/小鼠；2. Inaba原法操作比较复杂，需要将骨髓中的淋巴细胞等用抗体+补体法预先去除， 后来的改良法均省却了这个步骤，其实Inaba后来自己也说这个步骤虽然可提高BM
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（二）
1. 这些工作均是在 Ralph M.Steinman的参与下完成的；2. Inaba培养的BMDC来源于小鼠股骨和胫骨中的骨髓；3. Inaba先用抗体+补体法去除骨髓中的淋巴细胞，以防淋巴细胞对BMDC培养的影响；4. 在诱导分化过程中，为防止粒细胞的干扰，Inaba通过每2天轻摇培养板并3/4
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（六）
【注意事项】1. 小鼠品系和性别： 多数研究表明，所使用的小鼠品系与获得 BMDC 的数量和成熟度关系不大[9]，但也有研究表明C57BL/6小鼠可能更好。 Lutz表示从C57BL/10,DBA/2,C3 H/J和129等小鼠品系均可获得足够数量和纯 度的 BMDC,但 Lutz
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（七）
4. 培养方法的选择 本文列出迄今为止最常用的三种BMDC培养方法，我们从下表中可以更清楚地看出这三种方法的异同，相信您能根据您的需要作出正确的判断。 注：1. 该表是从文献[8]修改和添加而来； 2. 这里的Inaba法指的是其原法[2
小鼠骨来源树突状细胞(BMDC)的培养步骤
1.取小鼠股骨胫骨，小鼠要年轻！(6W-8W，以前用只年把的养出来外形也张牙舞爪，但流式检测没有CD11c表达，很奇怪啊；性别方面公母不限，经典版本说公的好，公的壮实，骨头大)2.冲骨髓细胞，我冲出来的骨髓细胞永远没有文献上说的那样多，但不影响大局，我一次用两只，怕出意外少了细胞，论坛里有战友说不要
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（五）
¾ 培养步骤：1. 小鼠骨髓细胞的获得见Inaba法（改良）中的相应步骤，注意省去溶血步骤。2. BMDC 的大量制备2.1 步骤1中获得的小鼠骨髓细胞计数后用含 10% FBS的RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为2 x 105/ml;2.2 铺至100 mm细菌培养皿（Petri
小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC）的培养（四）
3. BMDC的完全成熟注：步骤2中获得的BMDC并非完全成熟的DC,若想得到完成成熟的DC,还需LPS,CD40L或TNF-a等的诱导。3.1 步骤2.4或2.9中获得的BMDC以1200rpm离心5 min,弃上清；3.2 用含重组小鼠GM-CSF（20ng/ml）和IL-4（10ng/ml）的
树突状细胞特点
树突状细胞是一类形状不规则的非单核吞噬系统细胞，特点是胞浆有许多长突起呈触须状，使整个细胞的形态象一个蜘蛛。树突状细胞分散于全身的上皮组织和实质性器官，其细胞数量不超过局部细胞总数的1%；也可迁移到血液和淋巴，其数量不超过血液有核细胞总数的0.1%.在不同组织中，树突状细胞有不同名称，例如血液中的树
树突状细胞简介
1973年，Steinman和Cohn在小鼠脾脏中发现具有树枝状突起的独特形态的细胞，并将之命名为树突状细胞（dendritic cell，DC）。随着对不同组织来源DC研究的深入，目前已知的DC的亚群包括存在于淋巴组织、血液和非淋巴组织的经典DC（conventional DC，cDC
树突状细胞的类型
树突状细胞： 1.滤泡树突状细胞（folliculardendritic cell，FDC） FDC定居于淋巴结浅皮质区淋巴滤泡生发中心内。FDC与抗原抗体复合物高度亲合力，能够捕获和滞留抗原，并在记忆B细胞发育中起重要作用，是参与再次免疫应答的APC. 2.淋巴样树突状细胞（Lymphoi
树突状细胞的功能
人体内大部分DC处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞增殖反应的能力较低，但未成熟DC具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗原(包括体外加工)或受到某些因素刺激时即分化为成熟DC，而成熟的DC表达高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织
DC(树突状细胞)的制备方法（一）
【背景】DC 是「Dendritic Cells」的缩写，中文全称为「树突状细胞」，因其成熟时伸出 许多树突样或伪足样突起而得名。DC 是由 2011 年诺贝尔奖获得者、加拿大 籍科学家 Ralph M. Steinman 于 1973 年发现的，是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞 (A
DC(树突状细胞)的制备方法（二）
【注意事项】1.DC 的来源：DC有多种来源，包括外周血单核细胞（Monocyte）、脐带血 CD34+细胞、骨髓和胎 肝等，但因外周血单核细胞最容易获取、数量也最多，所以临床上被广泛用作 DC 的来源细胞。2.DC 的成熟度：我们知道，DC 有未成熟和成熟两种状态，即 iDC 和 mDC，而 DC
DC(树突状细胞)的制备方法（三）
3. DC 细胞的培养及鉴定3.1 步骤 1 中获得的 PBMC 用无血清培养液调整细胞浓度至 2 x 106/ml，置于培养瓶内；3.2 37℃，5% CO2 培养箱中孵育 2h，以使单核细胞贴壁；3.3 洗去悬浮细胞，在贴壁细胞中加入含重组人 GM-CSF(500-1,000U/ml
什么是树突状细胞？
树突状细胞（英语：dendritic cell）又称树突状细胞、树突状细胞，是一种存在于哺乳动物的一种白细胞。它存在于血液和暴露于环境中的组织中，如皮肤和鼻子、肺、胃和小肠的上皮组织。它们的作用是调节对当前环境刺激的先天和后天免疫反应。它的其中一个最重要的功能就是将抗原处理后展示给免疫系统的T细胞，
树突状细胞的功能研究
人体内大部分DC处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞增殖反应的能力较低，但未成熟DC具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗原(包括体外加工)或受到某些因素刺激时即分化为成熟DC，而成熟的DC表达高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织
树突状细胞的功能特点
人体内大部分DC处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞增殖反应的能力较低，但未成熟DC具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗原(包括体外加工)或受到某些因素刺激时即分化为成熟DC，而成熟的DC表达高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织迁移
树突状细胞的分布范围
它们通常少量分布于与外界接触的皮肤(黏膜)部位，主要为皮肤(在皮肤上的，称为Langerhans细胞[注：Paul Langerhans (1847-1888), German anatomist])，和鼻腔、肺、胃与肠的内层。 血液中也可发现他们的未成熟型式。他们被活化时，会移至淋巴组织中与T
树突状细胞的分布范围
它们通常少量分布于与外界接触的皮肤(黏膜)部位，主要为皮肤(在皮肤上的，称为Langerhans细胞[注：Paul Langerhans (1847-1888), German anatomist])，和鼻腔、肺、胃与肠的内层。 血液中也可发现他们的未成熟型式。他们被活化时，会移至淋巴组织中与T
树突状细胞的分布情况
它们通常少量分布于与外界接触的皮肤(黏膜)部位，主要为皮肤(在皮肤上的，称为Langerhans细胞[注：Paul Langerhans (1847-1888), German anatomist])，和鼻腔、肺、胃与肠的内层。 血液中也可发现他们的未成熟型式。他们被活化时，会移至淋巴组织中与T细胞
树突状细胞的生物来源
人树突状细胞起源于造血干细胞(hemopoieticstemcell)。DC的来源有两条途径：①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也称DCl，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞；包括朗格汉斯细胞（Langerhan
树突状细胞的生物来源
人树突状细胞起源于造血干细胞(hemopoieticstemcell)。DC的来源有两条途径：①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也称DCl，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞；包括朗格汉斯细胞（Langerhan
树突状细胞的来源途径
人树突状细胞起源于造血干细胞(hemopoieticstemcell)。DC的来源有两条途径：①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也称DCl，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞；包括朗格汉斯细胞（Langerhans
树突细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年，其间只经过了微小的修改（Steinman衫aZ.， 1979)材 料（带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液（见辅助方案）高密度牛血清白蛋白（BSA) 溶液R P M
树突状细胞分化主要途径
分化主要有两条途径:①髓样干细胞在 GM-CSF的刺激下分化为DC,称为髓样DC( myeloid dendritic cells,MDC),也称DC1,与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞;②来源于淋巴样干细胞,与T细胞和NK细胞有共同的前体细胞,称为淋巴样DC( Lymphoid dendriti
树突状细胞物种起源
树突状细胞( dendritic cell,DC)因其表面具有星状多形性或树枝状突起而得名,是科学家 Ralph M. Steinman于1973年首先发现的。DC尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。DC起源自骨髓多
关于树突状细胞的功能简介
人体内大部分DC处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞增殖反应的能力较低，但未成熟DC具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗原(包括体外加工)或受到某些因素刺激时即分化为成熟DC，而成熟的DC表达高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织