Mirrorball高通量抗体筛选平台的应用:一步法检测,抗...1

Mirrorball高通量抗体筛选平台的应用:一步法检测,抗体药筛选研发的新模式以抗体技术为基础的免疫检测应用和相关的疾病治疗领域如癌症,自身免疫系统疾病等一直推动着抗体筛选的研究。单克隆抗体由特定的细胞系分泌到上清液中,而对上清液中特异性抗体的筛选则成为了药物初期研发的核心领域。 均相结合实验尽管ELISA和流式细胞仪等传统手段被广泛应用,但是这两种检测手段都存在各自的局限性,特别是对细胞表面低表达抗原的检测。同时,这两种平台需要很繁琐的洗板和孵育的步骤而且耗费大量细胞和时间才能获取数据。为了解决这些技术瓶颈,我们开发了Mirrorball这个高灵敏度检测平台和“混合及读数之一步法检测”的实验方案,这样就大幅度地提高了抗体筛选的通量并且避免了繁琐的实验步骤。您所需要进行的实验仅仅是将所有的反应物一次性地加入到孔中并孵育一段时间。这里待检测的可以是结合在微球上的可溶性抗原也可以是细胞表面表达的抗原,一旦反应达到平衡状态......阅读全文

Mirrorball高通量抗体筛选平台的应用:一步法检测,抗...1

Mirrorball高通量抗体筛选平台的应用:一步法检测,抗体药筛选研发的新模式以抗体技术为基础的免疫检测应用和相关的疾病治疗领域如癌症,自身免疫系统疾病等一直推动着抗体筛选的研究。单克隆抗体由特定的细胞系分泌到上清液中,而对上清液中特异性抗体的筛选则成为了药物初期研发的核心领域。 均相结合实验尽管

Mirrorball高通量抗体筛选平台的应用:一步法检测,抗...2

数据结果 为了比较Mirrorball和ABI 8200在EGFR检测灵敏度方面的差异性,将A431细胞与梯度稀释的EGFR一抗以及AlexaFluor647标记的goat anti-mouse IgG二抗共同孵育。在用Mirroball分析时,用CFSE对细胞进行染色,预先定位细胞并进

双转盘共聚焦技术:长时间活细胞3D动态观察和分析...1

一、ELISA和流式的痛点 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,具有特异性强、灵敏度高、重复性好等众多优点。单克隆抗体技术的问世经历了人鼠嵌合单抗、人源化单抗阶段,这些工程改造抗体不仅为免疫学领域带来了一次革命,而且在生物医学的各个领域得到极广泛的应用。如今在临

ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-3

图3 Mirrorball允许不依赖荧光抗体的结合量来测量CFSE标记的细胞。而在ABI 8200平台上,细胞必须有荧光抗体的结合才能被检测的到不仅Mirrorball提供了和ABI 8200一样的高灵敏度,而且与ABI 8200只能扫描1 mm2的区域相比,它能够扫描整个孔内的细胞并且不受细胞分布

高通量筛选平台(HTS)在抗体药物开发中的应用

细胞株开发和培养基优化是生物药物的开发的第一步,工业界一直致力于寻找一个高效快速的解决方案,我们将分两期给大家介绍一下默克提供的解决方案。这一期将分享HTS技术。HTS全称为高通量筛选(High Throughput Screen ),这里要划一下重点:1)高通量,是指通过大量不同的培养基筛选,

ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-1

ABI 8200 FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式,给您带来不用于ELISA和流式的抗体筛选新体验以抗体技术为基础的免疫检测应用和相关的疾病治疗领域如癌症,自身免疫系统疾病等一直推动着抗体筛选的研究。单克隆抗体由特定的细胞系分泌到上清液中,而对上清液中特异性抗体的筛选则成为了药物初

双转盘共聚焦技术:长时间活细胞3D动态观察和分析...2

可导出直观的hot map 2. 多重检测(multiplex):mirrorball可以在一个孔内同时检测阴性和阳性对照并进行多指标分析。具体方法为,用蓝色的染料如Hoechst标记阴性细胞,用绿色染料如Dio标记阳性对照细胞,将两种细胞混在一起后,在加入待测的抗体以及相应的荧光二抗。mirror

一种针对细胞表面受体进行抗体筛选的多重分析方法--一

本文以人EGFR抗体与细胞表面EGFR抗原结合为例,描述TTP Labtech的mirrorball仪器作为一种“mix-and-read”方法在在抗体筛选中的应用。EGFR配体的蛋白家族参与了细胞迁移,粘附和分化等活动,包括乳腺癌,肺癌,结肠癌在内的许多疾病都和EGFR的过度表达有着密切的关系

关于高通量筛选应用的介绍

  充分利用药用资源 由于高通量筛选依赖数量庞大的样品库,实现了药物筛选的规模化,较大限度地利用了药用物质资源,提高了药物发现的几率,同时提高了发现新药的质量。  微量筛选系统 由于高通量筛选采用的是细胞、分子水平的筛选模型.样品用量一般在微克级(μg),节省了样品资源,奠定了“一药多筛”的物质基础

抗核抗体(AND)检测的临床应用

抗核抗体(ANA)是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白、DNA、可提取核抗原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称,是自身免疫病最重要的诊断指标之一,包括但不限于抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗U1-RNP抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗核糖体

关于高通量筛选的基本-应用介绍

  1、充分利用药用资源  由于高通量筛选依赖数量庞大的样品库,实现了药物筛选的规模化,较大限度地利用了药用物质资源,提高了药物发现的几率,同时提高了发现新药的质量。  2、微量筛选系统  由于高通量筛选采用的是细胞、分子水平的筛选模型. 样品用量一般在微克级(μg),节省了样品资源,奠定了“一药多

ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-2

EGFR实验抗EGFR抗体在培养基中梯度稀释,并添加20ul到384孔板中(Costar#3712)。对于Mirrorball系统,暂停用CFSE标记A431细胞含有1 ×105个细胞/ mL和6nM抗鼠IgG AlexaFluor647二抗。对于ABI的8200平台,准备A431细胞的悬浮液包含4

高通量基因分型检测平台及其应用案例

Agripheno™高通量基因分型检测平台包括高通量Oktopure DNA提取仪、Nexar®模块化内联液体处理与分析系统、Soellex®高通量PCR水浴热循环系统和Araya®内联荧光检测系统。Oktopure DNA提取仪采用磁珠的方法提取DNA,通量达到800个样本/3小时。同时,适用于多

llumina高通量测序平台的应用

  Illumina公司的新一代测序仪Genome Analyzer最早由Solexa公司研发,利用其ZL核心技术“DNA簇”和“可逆性末端终结(reversible terminator)”,实现自动化样本制备及基因组数百万个碱基大规模平行测序。Illumina公司于2007年花费6亿美金的巨资收

llumina高通量测序平台的应用

  Illumina公司的新一代测序仪Genome Analyzer最早由Solexa公司研发,利用其ZL核心技术“DNA簇”和“可逆性末端终结(reversible terminator)”,实现自动化样本制备及基因组数百万个碱基大规模平行测序。Illumina公司于2007年花费6亿美金的巨资收

抗核小体抗体的检测及应用

  凋亡细胞是核小体的重要来源,当SLE患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低,导致核小体在患者体内大量存积,多聚核小体与活化的单核细胞结合后被抗原递呈细胞呈递给CD4+Th2细胞,Th2细胞增殖活化,激活B细胞产生抗核小体抗体(AnuA)。  AnuA特异性高,与SLE病情活动性相关,通常采

自身抗体检测项目介绍抗PM1抗体

抗PM-1抗体介绍: 抗PM-1抗体是出现于多发性肌炎、皮肌炎或进行全身性硬化症/多发性肌炎(PSS/PM)重叠综合征患者的一种抗核抗体,又称抗PM-Sol抗体。Gelpi等(1990)用35S蛋氨酸标记Hela细胞抗原与抗PM-1抗体阳性的患者血清做免疫沉淀反应,证实被抗PM-1抗体沉淀的抗原是1

llumina高通量测序平台的应用(二)

3、可逆化学阻断技术测序        利用边合成边测序(Sequencing by synthesis)的原理,加入改造过的DNA聚合酶和带有4种荧光标记的dNTP。这些核苷酸是“可逆终止子”,因为3’羟基末端带有可化学切割的部分,每个循环它只容许掺入单个碱基。去除其他多余的dNTP后,用激光扫描

llumina高通量测序平台的应用(一)

Illumina公司的新一代测序仪Genome Analyzer最早由Solexa公司研发,利用其ZL核心技术“DNA簇”和“可逆性末端终结(reversible terminator)”,实现自动化样本制备及基因组数百万个碱基大规模平行测序。Illumina公司于2007年花费6亿美金的巨资收购了

自身抗体检测项目介绍抗U1RNP抗体

抗U1RNP抗体介绍: 和Sm抗原一样,U1RNP(U1核糖核蛋白)也属于可提取性核抗原(ENA)。1972年Sharp等报道了一组新的风湿病,称其为混合性结缔组织病(MCTD),在这组患者血清中发现了抗U1RNP抗体。它的靶抗原由U1 snRNA与70kD、A、C以及少量B'/B、D、E、

高通量筛选的FLIPR荧光检测法介绍

  近年来,光学测定技术在美、英两国研究人员在高通量筛选检测中,努力进行了光学测定方法的研究,建立了大量的非同位素标记测定法,如用分光光度检测法筛选蛋白酪氨酸激酶抑制剂、组织纤溶酶原激活剂等,均获得成功。  放射性检测技术美国学者GanieSM在高通量药物筛选研究中,应用放射性测定法,特别是亲和闪烁

ANA抗核抗体检测的临床应用

1957年Holborow等建立间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)检测ANA,对ANA检测的临床应用具有里程碑意义。临床上ANA常见于系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)等系统性(非器官特异性)A

细胞高通量药物筛选平台,必用透析胎牛血清

高通量药物筛选是当今时髦的新药研发方法。一方面,有机化学的飞速发展使得小分子的化合物库种类越来越多,另一方面,分子生物学为靶蛋白的筛选提供了荧光报告技术。同时,以细胞学为基础分子生物学方法还可用于筛选出的化合物的生物活性检测。 高通量药物筛选作为药物筛选的一个快捷途径,可在三个平台上进行应用:分别为

基于高通量Peggy-Sue系统建立高效药物筛选平台

高通量生物医药筛选高精尖仪器应用交流会,在兰州留学人员创业园成功召开,ProteinSimple苏倩博士报告了:“基于高通量Peggy Sue系统建立高效药物筛选平台”。报告内容包括:Peggy Sue基于分子量和等电点分离的技术原理;Peggy Sue的独特优势;Peggy Sue应用于高

强磁场中心建成高通量药物筛选和测试技术平台

  近日,由中国科学院强磁场科学中心刘青松研究员课题组承担的中科院合肥物质科学研究院“一三五”战略规划重点支持项目——高通量药物筛选和测试技术平台一期建设初步完成,进入实用阶段。该平台是目前安徽省内少数高水平的高通量药物筛选测试技术平台,也是国内少数以组合药物筛选为主要任务的应用平台,它的建成使用将

基于高通量Peggy-Sue系统建立高效药物筛选平台

  高通量生物医药筛选高精尖仪器应用交流会,在兰州留学人员创业园成功召开,ProteinSimple苏倩博士报告了:“基于高通量Peggy Sue系统建立高效药物筛选平台”。报告内容包括:Peggy Sue基于分子量和等电点分离的技术原理;Peggy Sue的独特优势;Peggy Sue应用于高效新

抗PMScl抗体(抗PM1抗体)的介绍

  PM-1抗体是出现于多发性肌炎、皮肌炎或进行全身性硬化症/多发性肌炎(PSS/PM)重叠综合征患者的一种抗核抗体,又称抗PM-Sol抗体。Gelpi等(1990)用35S蛋氨酸标记Hela细胞抗原与抗PM-1抗体阳性的患者血清做免疫沉淀反应,证实被抗PM-1抗体沉淀的抗原是11~16种蛋白质组成

一种针对细胞表面受体进行抗体筛选的多重分析方法-三

多激光扫描mirrorball的三激光使得用户可以利用多种荧光标记的标志物进行细胞计数分析。在该研究中,A549细胞被DiO标记(488nm激光激发),同时利用EGFR抗体和AlexaFluor 647标记物进行多重分析。经过过夜的孵育,利用488nm和640nm双重激光进行细胞数和EGFR

关于高通量筛选的AlphaScreen检测法分析介绍

  高通量筛选的AlphaScreen assay应用广泛且拥有众多优点,更优化药物筛检试验的效果。其操作硬体之限制,导致这实验方法虽然已研发数年,大多数研究人员并未知晓或广泛应用它。  化学生物学研究项目的研究重点是在我们的平台上执行的筛选与蛋白质相互作用的高通量检测。为了这个目的,我们采用Alp

高通量测序技术的原理及各平台优势和实践应用的分析-1

随着人类基因组计划(human genome project )在2003年顺利完成,基因组测序技术取得了长足的进步,这直接导致了每兆基因组成本的大幅下降以及检测的基因组数量越来越多。人们对基因组的复杂性深感震惊,这也引导着测序技术的进一步发展。最近的一些突破性技术使得测序技术在更短的时间内可以