小鼠心脏组织蛋白样品的蛋白质组学分析
实验步骤1. 蛋白质双向电泳1) 第一向固相pH梯度等电聚焦电泳a. 上样：第一向等电聚焦采用胶内加样的方法进行。精确吸取一定量的蛋白样品(银染样品的蛋白上样量为140 ug计，考染样品为1.3 mg)加入重泡涨液(8 mol/L尿素，2%CHAPS，痕量滨酚蓝，20 mmol/L DTT，0.5 % IPG buffer)，使终体积达到350ul。混匀后均匀加在IPG胶条holder的正、负极之间。将预制IPG胶条(pH 3 -10 NL)除去保护膜，胶面向下，覆于holder中的样品之上；慢慢下压胶条，并前后移动，避免生成气泡。在胶条上方均匀封以1 ml覆盖油，盖上盖子。b. 等电聚焦：将装有样品和IPG胶条的strip holder置一向电泳仪(IPGphorTM Isoelectric Focusing System)上进行等电聚焦。等电聚焦参数：0V电压下泡涨3h，30V电压下泡涨10 h，500 V电......阅读全文
小鼠血清、血浆、或相关组织液中C反应蛋白(CRP)含量的测定
实验概要本实验应用双抗体夹心法测定标本中小鼠C-反应蛋白(CRP)水平。用纯化的小鼠C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP)，再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化
全自动组织处理器处理小鼠脾脏
注意：gentleMACSTM Dissociators的使用细节可参考厂家说明书注意：在本文所展示的结果中，每个gentleMACS C管解离一个脾脏 1. 将小鼠脾脏加入含有PEB缓冲液的gentleMACS C管中: 1-2个小鼠脾脏：3ml 3-4个小鼠脾脏：6ml 5-6个小鼠
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
干货！小鼠肝组织dna的提取详细步骤
实验原理 DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。在匀浆后提取 DNA 的反应体系中， SDS 可破坏细咆膜、核膜，并使组织蛋白与 DNA 分子分离， EDTA 抑制细胞中 DNase 活性，
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修复工作液（pH8.0，稀释50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀释10倍使用） DAB显色液（临用前配制：试剂盒A、B、C各50ul，于1ml水中混匀）。方法1. 石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜 2.
常见组织蛋白简介
组织蛋白酶B组织蛋白酶B（CTSB） 是溶酶体内半胱氨酸蛋白水解酶，其催化作用由Cys ，His 实现，易被巯基试剂抑制，又称巯基酶，属于木瓜蛋白酶家族，在pH 3.0 ～ 7.0 都具有活性， 碱性条件下会不可逆失活 。CTSB 存在于细菌、病毒、原生动物、植物和哺乳动物中，在肝、脾、肾、骨、神经
蛋白样品的定量
目前常用比色法测定样品蛋白的含量：Bradford法（考马斯亮蓝法）、Lowry法（Folin-酚试剂法）、 BCA法等。但各有优缺点，大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所
多样品组织研磨仪与组织研磨仪的详细介绍
多样品组织研磨仪与组织研磨仪的优势-产品介绍；多样品组织研磨仪与组织研磨仪两者均为实验室的常用的仪器工具、多样品组织研磨仪与组织研磨仪均为用来研磨物料，其进行试验后的成品颗粒比较小，为粉末状。 一、多样品组织研磨仪介绍 1、技术特点： 1.1、干磨，湿磨，冷冻研磨均适用；
新研究：干细胞如何修复心脏病发作后的心脏组织损伤
近日，一项刊登在国际杂志npj Regenerative Medicine上的研究报告中，来自梅奥诊所的科学家们通过研究发现了一种机体心脏病发作后干细胞激活的心脏愈合机制，研究者发现，干细胞能将心肌组织恢复到心脏病发作之前的状况，这或许就为后期研究者阐明这些干细胞的作用机制提供了新的线索和思路。
双向电泳操作步骤——组织来源的蛋白质样品的溶解和制备
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS尿素仪器、耗材离心管转子实验步骤1. 称重后将样品加入Dounch匀浆器。每100 mg 组织加入1.5~2.0 ml SDS/或尿素/溶解缓冲液，用B号研棒冲击50次，然后以A号研棒冲击50次。2. 放置几分钟后，取一小份样品于200 ul 离心管100 000
国际最新研究发现电子烟会影响小鼠正常心脏功能
中新网北京10月26日电 (记者 孙自法)电子烟危害小吗？有什么危害？施普林格·自然旗下学术期刊《自然-通讯》最新发表一篇生理学研究论文称，电子烟气溶胶会在小鼠中短暂扰乱正常心脏功能。 该论文介绍，电子烟不通过燃烧烟草来递送尼古丁。因此，电子烟气溶胶比之烟草烟雾含有较少的一氧化碳、焦油和致癌化合
多样品组织研磨机的性能
多样品组织研磨机是一种特殊的、快速的、高效率的、多试管的一致系统。它能将任何来源(包括土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等)的原始DNA、RNA和蛋白质进行提取和纯化。 多样品组织研磨机的产品性能： 1.操作数量多，效果好 快速的工作可以在1分钟内完成。省时省
电镜组织化学技术样品制备
良好的样品制备是电镜酶细胞化学技术成功的关键。酶电镜组织化学 样品制备要求既要保存酶的活性，同时又要保存细胞的超微结构。并能防止酶反应产物扩散。每种酶对固定液的要求和显示方法虽不尽相同。但电镜酶组织化学的基本程序相似，下面简要介绍其基本要求： 1．取材 组织标本的取材是样品制备的第一步，
FFPE组织样品的DNA和RNA纯化
福尔马林固定后石蜡包埋的组织简称为FFPE样品。将组织在 4–10% 的福尔马林中迅速固定。 固定时间限制在 14–24 小时 (越长的固定时间将越容易导致DNA的片段化，对下游实验不利)。将固定组织彻底脱水 (彻底脱去福尔马林残余，因为其阻碍蛋白酶K的作用)。 纯化DNA时，使用新鲜从石蜡块上切下
植物组织研磨样品典型实验方法
TL系列植物组织破碎仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂，通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦，在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨，最细可以达到5微米。对于不同的的样品，TL系列植物组织破碎仪需要用不同的条件来处理，这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠
动物组织研磨样品典型实验方法
TL系列动物组织研磨仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂，通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦，在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨，最细可以达到5微米。对于不同的的样品，TL系列动物组织研磨仪需要用不同的条件来处理，这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠
利用细菌归巢特性将干细胞引导到心脏组织中治疗心脏病
近日，一项发表于Chemical Science的研究报告中，来自布里斯托大学通过研究在世界上首次开发出了一种新方法，将干细胞直接引导到心脏组织中，这或许有望从根本上改善心血管疾病患者的治疗手段。图片来源：University of Bristol 在英国心血管疾病会引发超过四分之一的人群死亡
基于干细胞3D心脏组织的检测使心脏病药物更安全
ASTAR生物工程和纳米技术研究所（IBN）的研究人员设计了一种来自人类干细胞的三维心脏组织，以测试新药物在心脏上的安全性和有效性。 “心脏毒性可导致心力衰竭甚至死亡，是药物失去作用的主要原因，抗生素，抗癌药和抗糖尿病药物可能对心脏造成意想不到的副作用，因此尽早检测新开发的药物是否对人的心脏安
组织总蛋白提取原理
关键词：脑组织 目的：熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识：无 原理：无 具体内容： 脑组织总蛋白质提取方法 1．将低温保存的样本称重。 2．加入裂解液。样本与组织比例=1：3~3.5 w/v，一般为150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器，将组织
组织总蛋白提取原理
关键词：脑组织 目的：熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识：无 原理：无 具体内容： 脑组织总蛋白质提取方法 1．将低温保存的样本称重。 2．加入裂解液。样本与组织比例=1：3~3.5 w/v，一般为150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器，将组织
组织总蛋白提取原理
关键词：脑组织 目的：熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识：无 原理：无 具体内容： 脑组织总蛋白质提取方法 1．将低温保存的样本称重。 2．加入裂解液。样本与组织比例=1：3~3.5 w/v，一般为150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器，将组织
常见的组织蛋白简介
组织蛋白酶B组织蛋白酶B（CTSB） 是溶酶体内半胱氨酸蛋白水解酶，其催化作用由Cys ，His 实现，易被巯基试剂抑制，又称巯基酶，属于木瓜蛋白酶家族，在pH 3.0 ～ 7.0 都具有活性， 碱性条件下会不可逆失活。CTSB 存在于细菌、病毒、原生动物、植物和哺乳动物中，在肝、脾、肾、骨、神经细
弹性蛋白的组织分布
在体内，弹性蛋白通常与结缔组织中的其他蛋白质相关。体内的弹性纤维是无定形弹性蛋白和纤维原纤维的混合物。这两种成分主要由较小的氨基酸组成，例如甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸和脯氨酸。总弹性蛋白范围为正常犬动脉中干脱脂动脉重量的58%至75%。新鲜组织和消化组织之间的比较表明，在35%的应变下，至少48%的动脉
Western－Blot－蛋白样品制备
一、单层贴壁细胞总蛋白的提取：1.倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。2.每瓶细胞加 3 ml 4℃ 预冷的 PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动 1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次
研究发现大量饮酒悄无声息损伤心脏组织
杯酒言欢。新年期间，欢聚也好，应酬也罢，难免觥筹交错。 但从健康角度而言，饮酒无论多少都伤身，大量饮酒更是如此。美国心脏协会官方期刊近日发表的一项研究就再次警示：大量饮酒会导致心脏组织损伤，而且可能有症状表现之前，损伤就已经发生了。 这项研究在酒文化盛行的国度俄罗斯开展。研究从俄罗斯西北部纳
基因编辑小鼠助力心脏缺血再灌注损伤机制研究
冠心病是严重威胁人类健康和生命的重大疾病之一，其发病率、死亡率逐年升高,其中急性心肌梗死是冠心病中致死及致残率最高的一类疾病。尽管介入治疗的广泛开展,治疗缺血及再灌注（ischemia/ reperfusion, I/R）损伤的心肌仍是尚未解决的难题，大量患者在急诊介入治疗后一周内出现急性心衰、
Sema3aCreERT2小鼠用于特异靶向心脏Purkinje纤维
上个月，中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组又有新科研成果发表在 Scientific Reports 上啦，题为“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”，提供了一种新的遗传学工具——Sema3a-CreERT2
Sema3aCreERT2小鼠用于特异靶向心脏Purkinje纤维
上个月，中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组又有新科研成果发表在 Scientific Reports 上啦，题为“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”，提供了一种新的遗传学工具——Sema3a-CreERT2工具
Sema3aCreERT2小鼠用于特异靶向心脏Purkinje纤维
上个月，中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组又有新科研成果发表在 Scientific Reports 上啦，题为“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”，提供了一种新的遗传学工具——Sema3a-CreERT2