利用CORTECS实心核颗粒色谱柱进行HPLC梯度方法转换

简介将使用填充了大颗粒的大体积色谱柱的HPLC梯度方法转换至填充高效CORTECS 2.7 μm颗粒的小体积色谱柱,可轻松缩短分析时间、节省溶剂与样品消耗量,最终节约成本。在转换HPLC梯度方法时,可通过适当调整方法条件和选择相当的色谱柱填料来避免对色谱分离性能的影响。下述应用纪要展示了针对阿巴卡韦相关化合物的典型HPLC梯度方法进行适当的方法转换。阿巴卡韦(Ziagen®)是一种核苷类逆转录酶抑制剂,被用于抗HIV的治疗。该样品由五种化合物组成,其中四种为主要成分阿巴卡韦的相关物质,如图1所示。此类检测常用的色谱柱为全多孔C18, 5 μm, 4.6 x 150 mm色谱柱。通过转换为CORTECS C18, 2.7 μm色谱柱,可大大缩短该梯度方法的分析时间,同时还能保持目标峰的选择性和分离度。结果与讨论基于此类检测常用的色谱柱为全多孔C18, 5 μm色谱柱,因此选择CORTECS C18, 2.7 μm填料用于方......阅读全文

HPLC色谱柱柱压很高,什么原因

柱压的影响因素有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。甲醇和水混合后,黏度会升高,其最大黏度时两者比例差不多是50比50 。另外,固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。不过看你柱压这么高,八成是柱子堵了。。。把柱头的过滤套子拆下来放稀HNO3中超声一下,再放在超纯水

HPLC色谱柱柱压很高,什么原因

柱压的影响因素有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。甲醇和水混合后,黏度会升高,其最大黏度时两者比例差不多是50比50 。另外,固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。不过看你柱压这么高,八成是柱子堵了。。。把柱头的过滤套子拆下来放稀HNO3中超声一下,再放在超纯水

HPLC色谱柱柱压很高,什么原因

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HPLC色谱柱柱压很高,什么原因

甲醇和水以1:1的比例混合时,是压力最大值,所以你遇到的是正常现象,不用担心。你查看各种液相色谱的方法可以发现,基本上没有使用50:50的比例来等度分析的。

提高效率的方法转换从HPLC到UHPLC

从HPLC到UHPLC的方法转换来提高实验室工作效率,在科学研究和质量控制过程中常常要在HPLC高效液相色谱和UHPLC超高效液相色谱两种检测分析方法之间进行转换。现代化的HPLC高效液相色谱仪和它的控制软件支持用户将这种方法移植到其他系统中使用,接下来就和小析姐一起学习一下吧。 在制药和食品工

提高实验室工作效率的方法转换

通过从HPLC到UHPLC的方法转换来提高实验室工作效率。在科学研究和质量控制过程中常常要在HPLC高效液相色谱和UHPLC超高效液相色谱两种检测分析方法之间进行转换。现代化的HPLC高效液相色谱仪和它的控制软件支持用户将这种方法移植到其他系统中使用。 在制药和食品工业以及其他不同工业领域中,H

人血浆中缓激肽的SPE-LCMS/MS定量检测方法(四)

预分析收集和处理的重要性对血浆中的缓激肽进行准确定量十分困难,因为缓激肽可以在采血和样品制备中经蛋白水解过程而生成1,6,7。本研究特别注重血液收集方案,通过添加蛋白酶抑制剂以防止体外缓激肽的形成。在图6中,A图和B图显示出,如果采用同一供体和相同的收集方案,将血液收集到分别添加和未添加蛋白酶抑制剂

采用CORTECS-UPLC-HILIC色谱柱开发ACh、HA及其代谢产物...(二)

UPLC分离 ACh、Ch、HA、t-mHA和t-MIAA是以相对较低浓度存在的强极性小分子化合物,这使其难以通过常规的反相色谱进行检测。此外,由于共流出的相关分子(如盐类或其它低分子量内源性组分)的基质诱导干扰和离子抑制作用,导致对生物基质中的这些内源性分析物进行定量分析常常较为困难9。在本应用纪

HPLC中常用色谱柱类型

极性,非极性,弱极性是气相色谱柱常用的分类方法。液相色谱柱一般是分为如下几类:尺寸排阻色谱法(SEC)色谱柱 反相液相色谱法(RPLC或RPC)色谱柱离子交换(IEC)色谱柱 亲合作用(HILIC)色谱柱疏水作用(HIC)色谱柱正相液相色谱(NPC)色谱柱

良好的HPLC色谱柱使用规范

1、在使用前过滤溶剂2、完全润湿在运输中变干的色谱柱3、了解溶剂对样品的溶解性及分离的影响4、对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理5、清除柱填料的局限性:pH、温度、化学兼容性6、使用新鲜的水溶液,并考虑使用生物稳定剂(如叠氮化钠)7、定期用强极性的溶剂清洗色谱柱8、储存色谱柱时,应冲净缓冲

HPLC中常用色谱柱类型

极性,非极性,弱极性是气相色谱柱常用的分类方法。液相色谱柱一般是分为如下几类:尺寸排阻色谱法(SEC)色谱柱 反相液相色谱法(RPLC或RPC)色谱柱离子交换(IEC)色谱柱 亲合作用(HILIC)色谱柱疏水作用(HIC)色谱柱正相液相色谱(NPC)色谱柱

HPLC色谱柱的分类以及选择

现代液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中,现如今多采用细粒径以获得高分辨率。但是,细粒径填料的流体阻力往往很大,必须采用高压泵以将流动相强制输运通过柱子。所以,柱子必须能承受高压而不泄漏、不破坏才行。色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。常用的HPL

核壳类色谱柱与全多孔类色谱柱相比有哪些特点

核壳类色谱柱(Fused-Core)的填料,一般是由内部的实心球(其材质以及形成方式与厂家有关、不同厂家,其技术存在不同)以及包裹在实心球上的多孔性硅胶或杂化颗粒型硅胶组成。核壳类色谱柱与全多孔类色谱柱相比,同等粒径的填料的情况下,具有更高的柱效、更低的背压以及更高的分析效率,但是其与全多孔类色谱柱

HPLC液相色谱柱柱压升高原因

HPLC液相色谱柱柱压升高原因    色谱柱是液相色谱的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。格莱普多年从事色谱行业,积累了一些经验,您可按照以下建议,逐项排除原因:1、流动相的前处理 。

快速方法转换,助力制药QC实验室提升效率(一)

蓄能2020药典系列|快速方法转换,助力制药QC实验室提升效率经过多年的发展,超高效液相色谱UHPLC技术,因其能获更高的柱效和更快的分析速度,且在多数情况下可替代常规HPLC方法,目前已经得到一定范围内的普及。但是,由于缺乏公认方法转换规则,制药行业的质控QC,大多数还在使用HPLC 方法。202

色谱柱篇:如何延长色谱柱的利用寿命

色谱柱的利用寿命,除了与所分析的样品和流动相及利用频率有关系外,主要的是与日常的委会密切相关。为延长色谱柱的利用寿命,维护您的利益,请仔细阅读此部分。 色谱柱的利用寿命主要是分局柱效和柱压两个指标来衡量,假设一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱利用寿命的关键是,

HPLC常见问题和解决方法色谱柱漏液

色谱柱漏液原 因解决方法1、尾端接头松动1、拧紧接头2、卡套内有填料2、拆下、清洗卡套、重新安装3、筛板厚度不合适3、使用合适的筛板(参考下表)筛板选择指导物质粒径筛板孔径3-4u0.5u5-20u2u

超高效液相色谱(UPLC)的特点

超高效液相色谱(UPLC),与传统的HPLC技术相比,提供了更高的效率,因而具有更强的分离能力。作为世界第一个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLCTM 超高效液相色谱系统,利用创新技术进行整体设计,大幅度地改善了液相色谱的分离度、样品通量和灵敏度。UPLC的商品化,是分

Thermo-Scientific-Syncronis-HPLC-液相色谱柱

  开发新方法时,色谱工作者最重要的目标之一就是实现一致的、可重现的分离。为此,就需要选择重现性高的HPLC 色谱柱。   新一代Thermo Scientific Syncronis HPLC 色谱柱通过选用超纯硅胶、自动装填工艺、严格的检测和控制程序帮助色谱工作者达到满意的

简述反相HPLC色谱柱的再生步骤

  1.取下色谱柱,然后重新连接到色谱仪上,让液体/气体反方向流过色谱柱。   2.用HPLC级水冲洗掉盐/缓冲液。以1毫升/分钟的速度把25毫升水泵入色谱柱。   3.用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。   4.用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。   5.用25毫升正己烷冲洗色谱柱。

高效测定红参的活性成分

本文采用Rigol Compass C18、Rigol Compass C18 (2)和Agilent Poroshell 120 EC C18三种色谱柱分离测定红参中的人参皂苷Rg1、Re和Rb1。方法准确、重复性好,均可达到药典要求。 红参的主要活性成分包括人参皂苷Rg1、Re和Rb1

赛默飞色谱柱与消耗品新产品介绍

  色谱柱与消耗品   了解最新的色谱柱和消耗品,我们一直立志于所有色谱相关耗材新技术的研发。现在,我们使用最先进的材料和技术为广大客户提供最优秀的产品。我们认识到精密度和重现性是可靠结果的基本保证,因此,我们为您提供了丰富,可靠的色谱耗材,满足您在色谱分离中的所有要求。   产品:

HPLC液相色谱柱中常用的专用色谱柱有哪些

从原料上分,分有机填料和无机填料,首先做成微米级的微球作为母粒,至于想要实现特殊的功能主要是在微球表面键合特殊的官能基团,专用柱这个应该不存在。

PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理

pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...

eXtended-Performance(XP)分离解决方案

解决方案为了彻底分离有关物质同时避免大量的HPLC方法开发,应当选择具有更高分离能力的高效色谱柱。XP色谱柱采用2.5 µm颗粒、在超高效色谱硬件中于高压下完成填装,其背压范围也适用于在HPLC系统上使用。为了证明使用XP色谱柱可提高分离性能,我们使用100 mm 3.5 µm, XSelect® 

HPLC与UHPLC转换检测三聚氰胺

图1.  HPLC方法的谱图。 本文开发了HPLC和UHPLC方法用于食品中三聚氰胺的检测分析,两个方法都能提供极好的线性,并能方便地实现方法的转换。 2007年事件和近期三聚氰胺污染事件爆发后,大众迫切需要能够对食品中可能存在的三聚氰胺污染物定性定量的检测方法。最近的三聚氰胺检

核壳色谱柱该如何保养?

 核壳色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护核壳色谱柱。  1.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使核壳色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速

沃特世推出新一代UPLC和HPLC色谱柱

  ACQUITY CSH和XSelect色谱柱采用表面带电杂化颗粒(Charged Surface Hybrid)技术重新定义了最广泛的分离选择性和最佳的性能   马萨诸塞州米尔福德市-2010年6月21日  沃特世(NYSE:WAT)公司推出新的ACQUITY®超高效液相色谱(U

快速分析盐酸胃复安制剂中的杂质

图1.  从Agilent 1200系列LC系统到Agilent 1290 Infinity LC系统的方法转换。 本文对Agilent 1290 Infinity液相色谱系统用于测定盐酸胃复安药物制剂中的杂质和有关物质的性能进行了评价。1200系列HPLC系统上的常规LC方法很

利用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞

实验概要本实验用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化了外周血单个核细胞。实验原理常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是  1.077±0.001  的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,犌W水性高,平均分子量