微生物学技术：病毒的鸡胚培养
一、目的要求掌握鸡胚尿囊腔接种培养新城疫病毒的操作技术。二、器材1.鸡胚 应选用健康鸡群的受精蛋，接种鸡的鸡胚应无母源抗体，以免影响病毒在胚胎中的增殖。实验用的鸡胚多采用9—10日龄的活胚。2.接种材料 新城疫I系疫苗3.各种器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml结核菌素注射器、41/2号注射针头、镊子、3%碘酊、75%酒精棉球、铅笔、酒精灯、剪刀、眼科镊子、灭菌的疫苗瓶、灭菌滴管和固体石蜡等。三、内容和方法（一）接种前的准备1.鸡胚的准备本实验选择9—10日龄的鸡胚，在照蛋时以铅笔勾划出气室，于气室稍下方胚胎活跃而血管明显的区域中，在血管之间的间隙划上记号，作为接种部位；用0、 1%新洁尔灭把蛋壳搽洗干净并抹干，再以2%碘酊对接种部位进行消毒，用75%酒精再擦一遍，在接种定位出打孔，气室向上竖放于蛋架上。2.病毒接种材料的准备要分离培养的病毒材料应是无菌的，因此为达到材料无菌的目的，可在每ml接种物质中加青霉素和链霉素......阅读全文
分离鸡胚背根神经节实验
分离鸡胚背根神经节 试剂、试剂盒 酶溶液 DRG
纯化鸡胚细胞疫苗的概念和功能
中文名称纯化鸡胚细胞疫苗英文名称purified chick embryo cell vaccine;PCEC定 义取鸡成纤维细胞原代培养的狂犬病毒，经β-丙内酯灭活而制成的一类用于接触前或接触后预防狂犬病的冻干制剂。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫预防（三级学科）
分离鸡胚背根神经节实验
试剂、试剂盒 酶溶液DRG仪器、耗材 离心管培养皿解剖显微镜实验步骤 1. 解剖前在 15 ml 离心管中配制酶溶液，置 37℃ 水浴特用。2. 解剖胚胎，解剖全过程保持组织湿润。(1) 杀死胚胎，去腿，放于 100 mm 培养皿。(2) 用钝头剪刀沿腹中线作一切口，将皮肤向两侧卷缩至能取出内脏。(
分离鸡胚背根神经节实验
试剂、试剂盒 酶溶液 DRG 仪器、耗材 离心管 培养皿 解剖显微镜
新生大鼠、新生小鼠及鸡胚背根神经节分散细胞培养
背根神经节（DRG）细胞起源于神经嵴，NGF Levi-Montalcini的实验表明，外原性NGF能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。在体外，分离培养的神经节在NGF存在的情况下，神经突起的生长在一天之内可长达数毫米，因此，利用培养的DRG细胞，进行轴突生长发育的研究，是最为经典而
病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便，适用于流感病毒，痘病毒，疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种，即绒毛尿囊膜接种法，羊膜腔（羊水囊）接种法，尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9～11 日龄鸡胚置于检卵器上，照视观察
关于甲型H1N1流感疫苗的生产流程介绍
单批疫苗生产需经历病毒接种、病毒培养、病毒灭活、纯化、裂解、配比、分包装及批签发等步骤才能最终投入使用。 在国家应对甲型H1N1流感联防联控保障组以及海关总署和国家质检总局等部门的大力支持下，来自美国CDC的甲型H1N1流感疫苗生产用毒株NYMCX-179A于6月8日晚送抵北京科兴。北京科兴拿
幼胚培养的技术特点
中文名称幼胚培养英文名称culture of larva embryo定 义将子叶期以前的具胚结构的幼小胚从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
成熟胚培养的技术特点
中文名称成熟胚培养英文名称culture of mature embryo定 义将子叶期以后的胚从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
胚状体培养的概念
中文名称胚状体培养英文名称embryoid culture定 义从外植体上直接或间接诱导出胚状体的培养技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
关于病毒血清学检测—病毒中和实验的简介
病毒中和实验是指病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况，也可用来鉴定病毒或研究其抗原结构。病毒中和实验可以在细胞培养、鸡胚或动物上进行，一般将抗体做稀释，与一定量的病毒混合，然后检测其在细胞培养、鸡胚或动物上的感染性。
中和试验(neutralization－tests)检测应用
病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力，谓之中和试验。本试验主要用于：（1）从待检血清中检出抗体，或从病料中检出病毒，从而诊断病毒性传染病；（2）用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型；（3）测定抗病毒血清或抗毒素效价；（4）新分离病毒的鉴定和分型，中和试验不仅可在易感的实验
简述人用狂犬病纯化疫苗（鸡胚细胞）的禁忌
a) 暴露前免疫 对于患有需要治疗的急性病的个体建议暂不进行暴露前接种（预防接种）。 免疫接种后发生并发症者，在查明引起并发症的原因之前不应再接种此疫苗。 已知对本品中任一成分有过敏的人，禁忌使用本品。 b) 暴露后免疫 事实表明狂犬病是致命的，所以暴露后没有禁忌症（见“特殊预防的用法
关于人用狂犬病纯化疫苗（鸡胚细胞）的简介
人用狂犬病纯化疫苗(鸡胚细胞)，适应症为狂犬病的主动免疫。活性物质：灭活狂犬病毒 1小瓶含1 免疫剂量（1ml）的冻干疫苗粉末和溶剂，成分包括： 灭活狂犬病毒（Flury LEP毒株），效价 ≥2.5 IU. 培养系统：原代鸡胚成纤维细胞培养扩增 其他成分： Tris－ (羟甲基) -
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则7
（3）对于放射性核素的免疫结合物： ①动物生物分布的资料可被用于对初始人用剂量的评估。 ②如可能，表达靶抗原的动物模型更有可能发现抗原"减少"或带有在生物分布和/或毒性方面表现意外抗原的组织。 ③异源移植模型可以组织定位和抗原非特异放射性免疫结合物分布问题，但对确定一般组织交叉反应范围没有帮助。
病毒滴度的概念
也即病毒的毒力，或毒价，衡量病毒滴度的单位有最小致死量（MLD）、最小感染量（MID）和半数致死量（LD50），其中以LD50最常用。它是指在一定时间内能使半数实验动物致死的病毒量。然而，病毒对实验动物的致病作用不一定都以死亡为标志，例如以感染发病作指标，则可以半数感染量（ID50）测定；此外，当实
口蹄疫病毒检验
口蹄疫病毒检验Foot-and-mouth disease virus，FMDV口蹄疫病毒(Food and mouth disease virus，FMDV)是牛、猪、羊等偶蹄动物口蹄疫的病原。FMD：OIE A类传染病之一，是全球性最重要的动物健康问题之一。1898年，德国科学家Loeffler
鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF1)及操作规程
细胞介绍该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养；传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明这些细胞是永生化而没有转化。该细胞可作为病毒增殖、重
鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF1)及操作规程
鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1) 细胞介绍 该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养；传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增
病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养
实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法，其优点是①经济适用，结果正确且敏感；②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法，是指动物（包括脊椎动物和无脊椎动物）的组织自机体取出后，经胰酶或其他细胞分散剂消化处理，得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中，加入细胞生长所必需的营养液，置合
简述流行性感冒病毒的繁殖方式
流感病毒能在鸡胚羊膜腔和尿囊腔中增殖。增殖的病毒游离于羊水或尿囊液中，用红细胞凝集试验即可检出。 流感病毒虽可在组织培养细胞（人羊膜、猴肾、狗肾、鸡胚等细胞）中增殖，但不引起明显的CPE，可用红细胞吸附试验判定有无病毒增殖。易感动物为雪貂，病毒在小鼠中连续传代可提高毒力，使小鼠肺部发生广泛的实质
正粘病毒分离和鉴定
正粘病毒诊断 根据流感的典型临床症状及其高度的接触传染性、急性发作和迅速传播等特点，常可作出初步诊断。但为了弄清是由哪一型或哪一亚型病毒引起的，则必须进行实验诊断，即必须进行病毒分离和鉴定或作血清学检查，才能获得确诊，尤其是在首次发现疫情的地区。 (1)病毒的分离和鉴定 A.标本的采集和处理〓
跳跃病的诊断方法
单凭临床症状、病理变化和流行病学资料很难作出诊断，必须靠实验室诊断才能确诊。 1．标本采集 主要采取病山羊初次发热期的血液，濒死期的脑和脊髓作10%一20%病毒悬液分离标本。采急性发病期和恢复期双份血清做血清学诊断的标本。 2．病毒分离 经鸡胚绒尿膜和卵黄囊接种或乳鼠脑内接种做病毒分离。
50％终点法测定病毒滴度实验
实验方法原理50% 终点 (50% endpoint) 法是将病毒悬浮液经一系列稀释后，接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞，将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做成曲线，找出造成 50% 动物、鸡胚死亡或细胞病变的终点稀释度。 LD50 (50 % Lethal dose) 为造成 50%动
流感疫苗表面抗原的高密度繁殖培养
流感疫苗的生产： I. 什么是流感疫苗：流感疫苗是无菌的灭活病毒悬液，由 A（甲）型或 B（乙）型流感病毒的一株或多株或二型混合液组成，病毒在鸡胚中分别单独培养。流感疫苗分为三种：用适当方法灭活的全病毒悬液；用物理化学方法部分或完全裂介处理病毒颗粒的无菌悬液（裂介疫苗）经处理后主要由血凝素和神经氨基
关于麻疹腮腺炎风疹减毒活疫苗的简介
麻疹腮腺炎风疹减毒活疫苗，适应症为用于预防麻疹、腮腺炎和风疹。 本品为三联减毒活疫苗，其主要组成成份：麻疹、腮腺炎、风疹活病毒。 本品包括 ①ATTENUVAX*（麻疹活病毒疫苗），一种从Enders减毒Edmonston 株衍生而来的进一步减毒的麻疹病毒株，在鸡胚细胞培养中增殖； ②M
使用人用狂犬病纯化疫苗（鸡胚细胞）的不良反应
如果产生不良反应，特别是以下未提到的不良反应，应于医生或药师联系。 注射部位可能有轻微反应，如疼痛、红肿、肿胀或硬化。偶尔可能发生较严重的局部反应、发热、头疼、肌痛、淋巴结肿大、疲乏、关节炎、胃肠功能紊乱。罕见循环系统反应、出汗、寒战、感觉异常和过敏反应；这些反应在特殊情况下需要治疗（见“使用
跳跃病的病理变化及诊断方法
病理变化 本病没有特征性病理变化。组织病理学检查可见弥漫性非化脓性脑炎。神经细胞，特别是小脑浦肯野氏细胞变性，血管周围出现单核细胞和少数多形核细胞构成的浸润灶—血管套。延脑和脊髓也有神经细胞变化，脑膜充血。 诊断方法 单凭临床症状、病理变化和流行病学资料很难作出诊断，必须靠实验室诊断才能确
马流感病毒
马流感是早有报道的疾病。Short(1749年)最早认为马流感与人类疾病可能有关。他谈到1688年在英格兰和爱尔兰发生人流感前，马就有类似人流感的症状。Thompson(1852年)也报道了1732年在英国爱丁堡发生人流感之前，有不少马匹发生咳嗽、流鼻涕等症状。Gibson(1754年)对这次马流感
胚性愈伤组织培养的概念
中文名称胚性愈伤组织培养英文名称embryogenic callus culture定 义将母体植株上的一部分切下，形成外植体，接种到无菌的培养液上进行胚性愈伤组织的诱导、生长和发育的技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）