病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察鸡胚是否生活,根据①小血管是否清晰;②胚胎是否活动,观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动,血管昏暗模糊,变黑或苍白都表示已死亡。2. 接种用铅笔标明天然气室及鸡胚位置,然后在绒毛尿囊膜发育区〈照视时呈现红色〉近胚位处的气室边缘作一记号,定为注射入口。用碘酒消毒注射入口和天然气室端的蛋壳,再用电钻,口腔科用牙钻和小锉刀,于注射入口和天然气室端的蛋壳上锯一小孔,勿伤及卵膜。用大头针通过火焰消毒后刺穿气室端所开小孔的卵膜,这样可避免在注射时液体回流出来。将鸡胚横卧于蛋架上,用无菌l 毫升注射器抽取病毒液体,针头与卵......阅读全文
病毒的培养检测
病毒研究的发展常常与病毒培养和检测方法的进步有密切的关系,特别在脊椎动物病毒方面,小鼠和鸡胚接种、组织培养、超速离心、凝胶电泳、电子显微镜和免疫测定等技术,对病毒学的发展具有深刻的影响。 噬菌体的培养和检测方法最为简单。将噬菌体接种到易感细菌的肉汤培养物中,经18~24小时后,混浊的培养物重新
如何选择病毒细胞培养的病毒?
病毒会感染几乎每一种生物机体,无论是人、老鼠、跳蚤还是细菌,都逃脱不了病毒的攻击。但是这些寄生生物无法独立生活:它们需要进入宿主细胞内部,这也就是为什么病毒学家也需要培养细胞,不过要想掌握这种细胞培养技术,就必须对病毒和宿主细胞都有所了解。 因为这个过程并不是简单的把病毒和细胞都放到培养皿中就
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜
病毒的鸡胚培养
目的意义:了解禽源病毒鸡胚培养的意义及用途掌握病毒鸡胚培养的基本方法基本原理:鸡胚培养是培养某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分离、增殖、毒力滴定、中和试验及生产疫苗等。病毒接种鸡胚的途径有多种,主要有卵黄囊接种、绒毛尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、羊膜腔接种途径等,应根据需要选择适当的途径。器材
病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。
病毒的鸡胚培养
实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大量病毒。因此,在用羊膜腔接种分离病毒时,除可收获羊水以外,还可收获尿囊液。实验材料 鸡胚试剂、试剂
病毒的培养方法实验——鸡胚培养法
病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不
丙型肝炎病毒的形态培养
HCV病毒体呈球形,直径小于80nm(在肝细胞中为36~40nm,在血液中为36-62nm ),为单股正链RNA病毒,在核衣壳外包绕含脂质的囊膜,囊膜上有刺突。HCV仅有Huh7, Huh7.5, Huh7.5.1三种体外细胞培养系统,黑猩猩可感染HCV,但症状较轻。
正粘病毒培养和增殖
(1)培养〖HT5SS〗 甲型流感病毒虽能引起人和多种动物的疾病,但大多数毒株具有比较明显的宿主特异性。各型流感病毒都能在鸡胚内良好增殖。初代分离时最好应用羊膜腔接种法,但许多毒株也能适应于鸡胚尿囊腔,特别是已在羊膜腔内传代的毒株。丙型流感病毒只能在羊膜腔内增殖。多数流感病毒可在牛胚肾、鸡胚肾、猴
甲型肝炎病毒的病毒感染模型与培养
黑猩猩和狨猴对HAV易感,且能传代,经口或静脉注射可使动物发生肝炎,并能在肝细胞冻中检出HAV。在潜伏期和急性期的早期,HAV可随粪便排出,恢复期血清中能检出HAV的相应抗体 [2] 。 1979年Provost 等首次成功地将已适应在狨猴传代的毒株培养于原狨猴肝细胞或恒河猴胚肾细胞FPhK6
病毒的培养方法实验——传代细胞培养法
实验方法原理从人及动物某些组织,特别是肿瘤组织,经多次传代可建立传代细胞系,这种细胞能无限地传代,某些传代细胞对病毒敏感范围较广,可用作病毒的分离鉴定,如HeLa 细胞,Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞,HeLa 细胞来自子宫颈癌,Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上
病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养
实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法,其优点是①经济适用,结果正确且敏感;②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合
关于HIV病毒(艾滋病病毒)的培养方法介绍
HIV-1分离培养最常用的方法是分离感染者血浆和外周血单个核淋巴细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),与靶细胞共培养。但目前为止,我国的HIV-1分离成功率并不高。传统的PBMCs共培养方法需要培养28天。判为有病毒生长的标准是:连续两次抗原含量
关于登革病毒的培养特性介绍
登革病毒可以在多种昆虫和哺乳动物细胞培养中增殖,并引起培养细胞发生折光性增强、细胞变圆或细胞融合等不同程度的细胞病变。昆虫传代细胞系,如白纹伊蚊C6/36等对登革病毒敏感,可用于病毒分离。哺乳动物细胞系,如人细胞系、乳地鼠肾细胞(BHK21)、胎猕猴肺细胞(FRhL)、原代狗肾细胞(PDK)等可
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病毒(
简述免疫缺陷病毒的培养特性
将病人自身外周或骨髓中淋巴细胞经PHA刺激48~72小时作体外培养(培养液中加IL2)1~2周后,病毒增殖可释放至细胞外,并使细胞融合成多核巨细胞,最后细胞破溃死亡。亦可用传代淋巴细胞系如HT-H9、Molt-4细胞作分离及传代。 HIV动物感染范围窄,仅黑猩猩和长劈猿,一般多用黑猩猩做实验。
艾滋病毒的培养方法
常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。 将病人自身外周或骨髓中淋巴细胞经PHA刺激48~72小时作体外培养(培养液中加IL2)1~2周后,病毒增殖可释放至细胞外,并使细胞融合成多核巨细胞,最后细胞破溃死亡。亦可用传代
病毒-DNA-的提取实验——培养细胞中病毒-DNA-的提取
实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液,加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中,2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液,用 PBS 悬浮细胞,离心洗涤 2~3次,用 PBS
简述人类免疫缺陷病毒的培养方法
HIV-1分离培养最常用的方法是分离感染者血浆和外周血单个核淋巴细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),与靶细胞共培养。但目前为止,我国的HIV-1分离成功率并不高。传统的PBMCs共培养方法需要培养28天。判为有病毒生长的标准是:连续两次抗原含量
病毒的培养方法实验——动物接种法
实验方法原理注意选择动物种类,年龄。按病毒侵袭部位的不同,选择适宜的接种途径,例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期,动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现,器官病理改变,受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代,并排除其他微生物污染的可能性等,即可证明有病毒的增殖。实验材料小白鼠实
病毒的鸡胚培养_卵黄囊接种
实验方法原理卵黄囊接种法主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖。这些大的病原体主要在卵黄囊的内皮细胞生长,且生长速度很快,立克次体在染色后也可看到。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等实验步骤1. 接种步骤与方法(1
病毒的鸡胚培养_羊膜腔接种
病毒的鸡胚培养可用于:(1)某些病毒分离、增殖;(2)病毒的毒力测定、中和试验;(3)生产疫苗等。实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大
简述水疱性口炎病毒的培养特性
VSV在大多数脊椎动物、鸟类、爬行动物、鱼类及昆虫的细胞培养上可以生长。一般说来,VSV属的病毒在感染脊椎动物细胞后,可以很快引起明显的细胞病变,18~24 h即可引起细胞快速圆缩、脱落,在动物的原代肾细胞单层产生不同大小的蚀斑。而感染昆虫细胞则引起持续性感染,无细胞病变。 VSV繁殖的两个显
用活鸡胚培养病毒的原理
物病毒(见脊椎物病毒)培养自宿主、实验物、鸡胚或细胞培养进行死亡、发病或病变等作病毒繁殖直接指标或血细胞凝集、抗原测定等作间接指标收获发病物组织磨悬液或病变细胞培养液即粗制病毒测定病毒数量采用空斑其原理与噬斑相同易物单层细胞代替细菌接种适稀释病毒用含培养液性红琼脂覆盖使病毒染局限面积内形病变区衬底健
关于疱疹病毒的培养特性介绍
HSV可在多种细胞中生长,常用的细胞系有BHK细胞,Vero细胞、Hep-2细胞等。病毒初次分离时,原代乳兔肾细胞、人胚肺细胞较敏感。HSV感染动物范围广泛,多种动物脑内接种可引起疱疹性脑炎,小白鼠是足垫接种可引起中枢神经系统致死性感染,家兔角膜接种引起疱疹性角膜炎,豚鼠阴道内接种可引起宫颈炎和
流感诊断“金标准”-分子检测取代病毒培养
宾夕法尼亚州大学儿科及病理学教授、费城儿童医院临床病毒科主任Richard L. Hodinka博士提出分子检测是流感诊断的“金标准”,理由是常用的流感快速诊断检测准确性极低,而较新型分子检测在灵敏度、特异性以及速度方面远远优于原有的金标准——病毒培养。 Hodinka博士指出,分子技术领域的
病毒的鸡胚培养_尿囊腔接种
实验方法原理尿囊腔接种法广泛应用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养,这些病毒被注射到尿囊腔后,可在内皮细胞中复制,复制的病毒被释放到尿囊液中,因此,在尿囊液中含有大量的病毒。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开
丙肝病毒一种新颖的培养方法
丙肝病毒一种新颖的培养方法是检验技师考试中所包含的内容。医学教育网收集整理了部分相关信息供学员参考。 华盛顿医学院的研究人员通过设计出一种新颖的病毒培养系统,从而为丙肝病毒研究开启了新路子。这种培养系统能够在非转化肝细胞中复制从患者分离获得的病毒。 丙肝病毒(HCV)感染影响着全球大约1.7亿