免疫学技术专题：组织病理实验（二）
（7）切成的蜡带到20~30 cm 长时，右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。（8）用单面刀片切取蜡片一小段，放在载玻上加水一滴，置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。（9）切片工作结束后，应将切片刀取下用氯仿擦去刀上沾着的石蜡，把切片机擦拭干净妥为保存。9. 展片、贴片打开水浴锅，使水温维持在40~45℃，另准备30%乙醇溶液。（1）切片时，将一碗30%乙醇溶液放于切片机旁的桌面上。（2）用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带，放在乙醇溶液的水面上，使切片展开。（3）小镊子轻轻地将连在一起的切片分开，用一个载玻片将切片完整，已展开的切片捞至温水中，使之充分展开。（4）另取洁净的载玻片，捞起展开的切片，使其位于切片1/3处，另一端（磨边，粗糙的一端）磨面上标记或贴上标签，放于切片架上。10. 脱蜡复水（1）将水浴锅温度调至60℃，待水温......阅读全文
免疫学技术专题：组织病理实验（二）
（7）切成的蜡带到20~30 cm 长时，右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。（8）用单面刀片切取蜡片一小段，放在载玻上加水一滴，置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。（9）切片工作结束后，应将切片刀取下用氯仿擦去刀上沾着的
免疫学技术专题：组织病理实验（一）
标签： 组织病理组织学技术包括、组织学制片技术、胚胎学制片技术、组织化学技术、荧光组化及免疫组化技术、组织培养技术、各种特殊显微技术、电镜组织学技术。组织学技术不但应用于组织学本学科，并且广泛应用于其他多学科，如生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等。实验方法石蜡切片法冰冻切片实验方法
组织病理实验（二）
9. 展片、贴片打开水浴锅，使水温维持在40~45℃，另准备30%乙醇溶液。（1）切片时，将一碗30%乙醇溶液放于切片机旁的桌面上。（2）用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带，放在乙醇溶液的水面上，使切片展开。（3）小镊子轻轻地将连在一起的切片分开，用一个载玻片将切片完整，已展开的切片捞至温水中，使之
组织病理实验（一）
实验方法原理 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。实
免疫学技术专题：非标记抗体免疫电镜技术
一、原理标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织中的
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等
病理制片技术——组织脱水
组织经固定后会有大量水分，组织脱水是用某些溶剂逐渐将组织内的水分置换出来，以利于透明剂和石蜡的渗入。 一、手工脱水 1．器械准备：大标本缸6个，浸蜡用金属缸3个，脱水篮，恒温烤箱。 2．日常工作程序见表5．1。 表5．1 手工脱水日常工作程序
免疫学技术专题：雌二醇的免疫胶体金试纸法检测
雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，为防止儿童性早熟等问题，食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显变化，所以它可以取代酶标记抗体〔1，2〕
组织病理实验_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。实验
病理制片技术——组织石蜡切片
组织经石蜡包埋后制成的蜡块，用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1．切片前的准备：清洗过的载物片(或免清洗的)，毛笔，铅笔，小竹片，水槽，雾化器，摊片器，切片刀，刀架。2．切片制作步骤：刀架的粗削部放在头端，在切片机
细胞技术专题：细胞传代实验
根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（二）
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长，正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利，传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代，经第8
免疫学技术专题：斑点金免疫渗滤测定法（DIGFA）
基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上，改用胶体金标记物代替酶，省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜（NC膜）为载体，将试剂及标本滴加在膜上，通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成，阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置：为一塑料小盒（4x3x0.6cm
免疫学技术专题：中性粒细胞吞噬功能的测定
中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等，是机体天然免疫力的重要组成部分。试剂及材料1. 白色葡萄球菌2. 肉汤培养基3. 硷性美蓝液操作方法1. 菌液的制备 将白色葡萄球菌接种于中，放37℃温箱内培养12h左右；置水浴中加热10
细胞技术专题：细胞生长曲线实验
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部
免疫学实验免疫病理检查介绍
免疫病理检查介绍： 免疫病理检查是利用免疫学的原理进行的一种检查，如：皮肤斑贴试验、癣菌素试验、过敏原筛选等。 免疫病理检查正常值： 皮肤有光泽且没有病变。免疫检查未检出有感染或者过敏现象。 免疫病理检查临床意义： 异常结果：1. 皮肤斑贴试验：阳性反应表示患者对
细胞技术专题：大鼠视神经少突胶质细胞培养实验（二）
2. 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色 GC 蛋白阳性，未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富，互相形成蜘蛛网状(图 3)。苏木素复染，异质细胞较少，90%以上为阳性细胞(图 4)。 Figure 1 Cells migrated from opti
免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（二）
⑤主机设定：一般是已设定好的适合测定淋巴细胞的条件，包括探测器的电压。探测器的电压是调空光电倍增管所能检测荧光密度的范围。⑥选择检测的波长和表达方式（plot）：如果用一种荧光抗体，一般选直方图（histogram）；如果用两种荧光抗体，常选点状二维图（dot plot）或轮廓线图（contour
免疫组化技术专题：MTT（四唑盐比色实验）大汇总（二）
二、实验步骤 （一）贴壁细胞 1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100 ul，铺板使待测细胞调密度至1 000-10 000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2. 5%CO2，37 ℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板），加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，
免疫学实验二硝基氯苯（DNCB）介绍
二硝基氯苯（DNCB）介绍： 二硝基氯苯（DNCB）是一种化学制剂，属半抗原，能与上皮蛋白的可溶部分共价结合成为完全抗原。 DNCB是淡黄色结晶粒末，可溶于丙酮。用0.1 毫升（含1-2mgDNCB）滴于2cm直径的圆环内上臂内侧皮肤表面，使之均匀涂布，待丙酮挥发后取下圆环。14天后再将0.1
免疫学实验二硝基氯苯试验介绍
二硝基氯苯试验介绍： 二硝基氯苯试验主要用于干燥综合征、咽部麻风、麻风病等病的辅助诊断方法。 二硝基氯苯试验正常值： 正常为阳性。试验后24-72小时，可出现水肿性红斑、丘疹或水疱。 二硝基氯苯试验临床意义： 异常结果：(1)升高：①OT、PPD：结核病时强阳性为多
植物成熟组织观察实验（二）
二、薄壁组织1. 吸收组织取萝卜根尖制作压片，置显微镜下观察根毛的形态和结构特点。2. 贮藏组织取马铃薯块茎一小块，用双面刀片进行徒手切片，选取较薄的切片放在载玻片上，加1滴蒸馏水后盖上盖玻片置显微镜下观察淀粉贮藏细胞的结构特点。3. 同化组织取夹竹桃叶片做徒手横切片，制成临时切片标本，置显微
结缔组织观察实验（二）
（二）高倍镜观察胶原纤维束较粗大，纤维束内由许多平行排列的胶原纤维组成，但在切片上不易区分。在纤维束之间分布有排列成单行细长的腱细胞（成纤维细胞），但在切片上只能看到染成蓝紫色椭圆形或杆状的胞核。两个邻近细胞的胞核常常很靠近。胞质不易显示。脂肪组织（一）小肠或气管切片（H－E染色）的观察1．低倍镜观
免疫学技术专题：染色质免疫沉淀芯片（ChipChip）
该技术能够快速在目标基因组的染色体中确定特异DNA结合蛋白的准确结合位点，ChIP芯片也可以在一个基因组的任何感兴趣的区域内寻找染色体的结构改变。一、ChIP-Chip的用途（1）在基因组范围内确定基因转录因子的DNA结合位点和其他DNA结合蛋白或蛋白复合体的DNA结合位点。（2）染色体活性状态的定
免疫学实验免疫浊度技术介绍
免疫浊度技术介绍： 免疫浊度技术早期主要用于血清、尿和脑脊液中蛋白质含量的测定。免疫浊度技术是利用可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，与一系列的标准品对照，即可计算出
免疫学实验细胞组织化学染色介绍
细胞组织化学染色介绍： 免疫细胞组织化学染色是利用已知的抗体与细胞抗原特异性相结合的特性，通过化学反应使标记在抗体上的显示剂显示一定的颜色，并借助显微镜、荧光显微镜或电镜进行观察，以达到对组织、细胞结构中化学成分进行定量、定位分析的目的。 细胞组织化学染色正常值： 检测结果呈阴
细胞技术专题：大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验－二
三、 脑微血管段的分离与脑微血管内皮细胞原代培养 1. 大鼠颈椎脱臼处死后浸泡于75%乙醇中消毒3~5 min后断头置于玻璃培养皿中，打开颅腔后取出全脑置于盛有冷D-Hanks'液的玻璃培养皿中解剖去除小脑、间脑(包括海马)。2. 随后将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以吸除软脑膜及脑膜大
蛋白质技术专题：凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析（gel filtration chromatography）法又称排阻层析或分子筛方法，主要是根据蛋白质的大小和形状，即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖类物质，使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤
细胞技术专题：肿瘤细胞原代培养实验
肿瘤细胞原代培养可以：（1）研究癌变机理；（2）研究抗癌药检测；（3）研究癌分子生物学；（4）用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清
免疫学实验非二硝基氯苯（DNCB）介绍
二硝基氯苯（DNCB）介绍： 二硝基氯苯（DNCB）是一种化学制剂，属半抗原，能与上皮蛋白的可溶部分共价结合成为完全抗原。 DNCB是淡黄色结晶粒末，可溶于丙酮。用0.1 毫升（含1-2mgDNCB）滴于2cm直径的圆环内上臂内侧皮肤表面，使之均匀涂布，待丙酮挥发后取下圆环。14天后再将0.1