野菊花总黄酮的提取及萃取精制研究
野菊花是菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L)的干燥头状花序,具有清热解毒、清火明目、平肝降压、保护心血管等作用。黄酮类化合物是野菊花的主要活性成分之一。本文研究了野菊花黄酮的提取和萃取精制工艺,并对高速逆流色谱分离野菊花黄酮单体进行了探索。 主要研究内容包括: 1.研究了野菊花总黄酮的提取工艺,以总黄酮得率为优化目标,考察了乙醇浓度、液固比、温度、提取时间和提取次数五个主要因素对提取效果的影响,确定了较优的提取工艺条件。 2.研究了野菊花总黄酮的萃取工艺,以萃取率和萃取物纯度为优化目标,考察了萃取剂种类、萃取原料液浓度、相比和萃取次数四个主要因素对萃取效果的影响,确定了较优的提取工艺条件。此外,在多次萃取时还发现,第2、3次萃取物的总黄酮纯度较高(大于60%),可作为进一步分离提纯黄酮单体的原料。 3.利用高速逆流色谱(分析型和制备型)对萃取物进行进一步分离纯化探索。研究了正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂......阅读全文
细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤:1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol,冰上放置5min,枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中,加入氯仿0.2ml/管,用力振摇15s。15-30℃下孵育2-3min,离心(4℃,12,000g,15min)。3) 离心后液体分为三层(上层-无色
总RNA提取实验
实验方法原理 一些公司推出的总RNA 提取试剂盒,可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RNA 酶抑制剂,异硫氰酸弧(GTC)和β-巯基乙醇,加上整个操作都在冰浴下进行,这样就能显著降低RNA 的
总RNA提取实验
实验方法原理 GTC和N-十二烷基肌氨酸钠的联合使用,将促使核蛋白复合体的解离,使RNA 与蛋白质分离,并将RNA 释放到溶液中。而进一步从复合体中纯化RNA ,则根据Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法进行,采用酸性酚-氯仿混合液抽提。低pH值的酚将使RNA 进入水相
如何提取总蛋白?
大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取(如 RIPA 裂解液),但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分,即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中。也就是说
中和提取精制法制备谷氨酸钠
谷氨酸发酵以15%左右的葡萄糖为碳源,并加适量的无机盐和生物素配成发酵培养基,经连消并冷却至40℃后送入已灭菌的发酵空罐;以流加的液氨为氮源,接种经二级扩大培养的谷氨酸产生菌。提取现一般采用冷冻等电一离子交换法。发酵液在等电罐中一边用冷冻盐水缓慢搅拌冷却降温至5℃,一边用硫酸调Ph值至3.22(等电
银杏黄铜超声提取方法
银杏叶提取物化学成分复杂,主要活性成分为黄酮类化合物及萜类内酯。目前国际上公认的银杏叶制剂的含量标准为黄酮类化合物≥24%,银杏内酯≥6%。现代药理研究表明,黄酮苷能有效地清除体内有毒过氧自由基的作用,具有降低血脂、促进血液循环及脑代谢功能;银杏萜类内酯除了具有扩张冠状动脉血管、增加血流量、改善脑营
罗马洋甘菊和箬竹叶中精油和黄酮的萃取、鉴定及应用
我国烟叶的主产区在云南,而云南烟叶是典型的清香型烟叶,是高档卷烟的主要烟叶原料。随着社会进步和生活水平的提高,对于高档卷烟的需求也显著增加,然而云南烟叶的产量有限,限制了高端卷烟的发展,因此开发清香型香料,修饰卷烟香气,提高卷烟感官质量是卷烟行业发展的必然需求。本课题优化了罗马洋甘菊和箬竹叶精油超临
亚临界萃取的提取精华
我国地域辽阔,复杂的地理环境与多变的气候条件造就了我国物种的多样性,尤其是具有医疗保健作用的特种油脂、香精香料、色素等天然资源相当丰富,如银杏、丁香、生姜、大蒜、洋葱、枸杞籽、沙棘、红辣椒、花椒、桂花、玫瑰花和茉莉花等。天然产物的提取物可被广泛地用于医药、食品、化妆品、保健品及生物制品等产品中。受到
亚临界萃取的提取精华
我国地域辽阔,复杂的地理环境与多变的气候条件造就了我国物种的多样性,尤其是具有医疗保健作用的特种油脂、香精香料、色素等天然资源相当丰富,如银杏、丁香、生姜、大蒜、洋葱、枸杞籽、沙棘、红辣椒、花椒、桂花、玫瑰花和茉莉花等。天然产物的提取物可被广泛地用于医药、食品、化妆品、保健品及生物制品等产品中。受到
植物总RNA的提取实验
研磨法 实验方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂
小麦总RNA的提取方法
实验步骤1. 所有容器高温灭菌两次,DEPC高温灭菌,所有的试剂用DEPC配制,高温灭菌。2. 在一灭菌2mL管中加入:5mol/L异硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 称取0.2g小麦黄化苗的叶片,迅速在液氮中研磨成粉末,转入已准备好的离心管中,剧烈震荡。
植物总RNA的提取实验
实验方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。本实验旨在了解和掌握植物总RNA 的分离和纯化方法。实验材料 植物RNA试剂、试剂盒 尿素Tris-HClN
植物组织总RNA的提取
实验概要由于RNA分子的结构特点,容易受RNA酶的攻击反应而降解,加上RNA酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA酶,人的皮肤、手指、试剂、容器等均可能被污染,因此全部实验过程中均需戴手套操作并经常更换(使用一
总细胞RNA的提取方法
实验概要总细胞RNA的提取在建库过程中,由于cDNA合成这一步将使用通用引物oligo dT,因此在总RNA提取这一步中,提取纯化mRNA不是非常必要的。提取高纯度的总细胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板,目前提取RNA的方法很多,也有不少商业化的试剂盒。实验步骤1. TRIZOL法 1)
植物总RNA的提取规程
一、实验目的掌握植物总RNA提取的原理和方法二、实验原理RNA的提取:破坏细胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去盐离子。RNase是一类生物活性极其稳定的酶类,能耐高温、耐酸、耐碱,高压灭菌处理也不能使其完全失活。在提取RNA实验中,要尽量抑制RNase的活性。•DEPC(焦磷酸二乙酯)是很强的RNas
关于黄酮类物质的微波提取法介绍
微波提取技术又称微波萃取技术,其最大的优点是耗能耗材少、无污染,尤其对特定的药材提取具有高选择性。闫蕊采用微波法从芦荟中提取黄酮类化合物,其最终工艺为微波功率560W,乙醇浓度80%,料液比1:5,提取时间30s,提取率为0.052%,比较超声波提取法的提取率提高了0.15倍。董良云等利用微波辅
高速逆流色谱与微波辅助萃取纯化侧柏中的黄酮类化合物
实验过程中:微波辅助萃取,温度80℃,时间29min,功率800W高速逆流色谱提取,对溶剂系统和参数条件进行系统的优化获得较好的分离条件溶剂系统:正丁醇-乙酸乙酯-正己烷-水6∶1∶1∶12 V / V 上相有机相 为固定相下相水相 为流动相反相洗脱;进样浓度:20mg/ mL ;进样体积:
组织总蛋白提取原理
关键词:脑组织 目的:熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识:无 原理:无 具体内容: 脑组织总蛋白质提取方法 1.将低温保存的样本称重。 2.加入裂解液。样本与组织比例=1:3~3.5 w/v,一般为150~170mg:500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器,将组织
组织总蛋白提取原理
关键词:脑组织 目的:熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识:无 原理:无 具体内容: 脑组织总蛋白质提取方法 1.将低温保存的样本称重。 2.加入裂解液。样本与组织比例=1:3~3.5 w/v,一般为150~170mg:500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器,将组织
总RNA提取实验步骤
一、细胞或组织破碎 1. 微生物材料 (1)发酵3~4天(或对数生长期)的菌体,离心收集菌丝体(动植物材料无需此步处理)。 (2)用经DEPC处理的水洗菌丝体2~3次,并尽量除去残存的水。 (3)加液氮充分研磨,使其成为粉末,以释放RNA。 (4)研磨后的样品转移至12 ml 变性液的容器中匀浆。
组织总蛋白提取原理
关键词:脑组织 目的:熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识:无 原理:无 具体内容: 脑组织总蛋白质提取方法 1.将低温保存的样本称重。 2.加入裂解液。样本与组织比例=1:3~3.5 w/v,一般为150~170mg:500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器,将组织
土壤微生物总DNA提取及纯化
实验概要从土壤微生物中提取总DNA并纯化,高质量的DNA可用于后续文库构建。主要试剂TENP缓冲液(50 mmol/L Tris, 20 mmol/L EDTA, 100 mmol/L NaCl, 1% PVP, pH 10.0)PBS缓冲液(137 mmol/L NaCl, 2.7 mmol/L
Trizol法提取总RNA提取的注意事项
1.杜绝外源酶的污染。(1)严格戴好口罩,手套。(2)实验涉及的离心管,Tip头,移液器杆,电泳槽,实验台面等要彻底处理。(3)实验所涉及的试剂/溶液,尤其是水,必须确保RNase-Free。2.阻止内源酶的活性。(1)选择合适的匀浆方法。(2)选择合适的裂解液。(3)控制好样品的起始量。
黄酮的结构及特性
黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B-环)通过中央三碳原子 相互连结而成的一系列化合物,其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外,它还常与糖结合成苷。多数科学家认为黄酮的基本骨架是由三个丙二酰辅酶A和一个桂皮酰辅酶A生物合成而产生的
常见中药材中黄酮超声提取法
黄酮超声提取法黄酮的功效是多方面的,它是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,抗氧化抗衰老,黄酮可以改善血液循环,可以降低胆固醇,黄酮可以抑制炎性生物酶的渗出,可以增进伤口愈合和止痛,由于具有强抗组织胺性,可以用于各类敏感症。因此受到多国科学家的追捧,分别都在研究从植物中怎么才能更多的提取黄酮
真菌菌丝的总RNA的提取
试剂:RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)。由于在高温灭
野菊花注射液的成分及性状
成份 野菊花。 性状 本品为浅棕黄色或棕黄色的澄明液体。
野菊花栓的禁忌及注意事项
禁忌 尚不明确。 注意事项 1.肝郁气滞、肾阴不足,脾肾两虚所致的淋症不宜使用。 2.脾肾两虚,寒湿带下不宜使用。3.饮食宜清淡,忌饮酒,辛辣食物。 4.在使用本品前,如发现栓粒有软化现象,应先将塑片用湿毛巾覆盖或浸在冷水里片刻,即可使用,不减其效。 5.孕妇及哺乳期妇女遵医嘱。
野菊花栓的注意事项及贮藏
注意事项 1.肝郁气滞、肾阴不足,脾肾两虚所致的淋症不宜使用。 2.脾肾两虚,寒湿带下不宜使用。3.饮食宜清淡,忌饮酒,辛辣食物。 4.在使用本品前,如发现栓粒有软化现象,应先将塑片用湿毛巾覆盖或浸在冷水里片刻,即可使用,不减其效。 5.孕妇及哺乳期妇女遵医嘱。 贮藏 密闭保存。
野菊花栓的注意事项及包装
注意事项 1.肝郁气滞、肾阴不足,脾肾两虚所致的淋症不宜使用。 2.脾肾两虚,寒湿带下不宜使用。3.饮食宜清淡,忌饮酒,辛辣食物。 4.在使用本品前,如发现栓粒有软化现象,应先将塑片用湿毛巾覆盖或浸在冷水里片刻,即可使用,不减其效。 5.孕妇及哺乳期妇女遵医嘱。 包装 2.4克×7枚