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一、实验目的掌握植物总RNA提取的原理和方法二、实验原理RNA的提取：破坏细胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去盐离子。RNase是一类生物活性极其稳定的酶类，能耐高温、耐酸、耐碱，高压灭菌处理也不能使其完全失活。在提取RNA实验中，要尽量抑制RNase的活性。•DEPC（焦磷酸二乙酯）是很强的RNase抑制剂，可以使RNase的活性丧失。实验中使用的 枪头、 EP管、溶液都要利用0.1%的DEPC处理，Tris不可以用DEPC处理。耐高温的玻璃器皿等要在250℃烘烤4小时以上。•内源的 RNase一般利用蛋白质变性剂除去。如苯酚、氯仿、胍、SDS、十二烷基肌氨酸钠等。无水乙醇、高浓度的盐溶液和异丙醇中可以沉淀RNA或 DNA，前两者利于沉淀大片段的核酸。 注意：DEPC是一种具有致癌嫌疑的有机物！相关操作要在通风橱中完成。 另外DEPC对单链的 DNA或RNA具有破坏作用，利用DEPC处理过的溶液和物品都要经过高温灭活处理......阅读全文
植物组织RNA提取的难点及对策 从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析，纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库，RT-PCR及差示分析等分子生物学研究，都需要高质量的RNA。因此，从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究
从植物组织中提取RNA 是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析，纯化mRNA 以用于体外翻译或建立cDNA文库，RT-PCR及差示分析等分子生物学研究，都需要高质量的RNA 。因此，从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA 是顺利进行上述研究的关键所在。从文献报道上看
填补Qiagen空白、不用DNA酶消化的植物RNA提取试剂盒 一般公司多糖多酚植物RNA提取试剂盒失败原因和解决方案 很多植物RNA的样品由于含有大量的多糖、多酚、代谢产物、色素等成分，造成RNA提取过程中氧化、褐化、降解、由于植物品种的多样性造成情况更加复杂。手工的CTAB类的
植物小RNA究竟有没有进入人的血液?这个热点起源于2011年南京大学生命科学学院教授张辰宇的研究。 小RNA是?19～24个核苷酸的非编码RNA，可调控蛋白质表达。2011年，张辰宇在国内《Cell research》(细胞研究)杂志上发表研究称，稻米中有一种含量丰富的植物微小RNA(
众多文献报道，许多植物由于未能有效地分离纯化出其组织中的RNA， 而阻碍了其分子生物学方面的研究进展。比如Northern杂交分析，体外翻译分析或建cDNA文库，RT-PCR及差异显示分析等研究，都需要高质量的RNA。因此，提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。RNA提取的常见难
RNA沉默是指在真核生物中发现的由小RNA(21-30nt)介导的、以序列特异性方式引起靶标基因表达受抑的现象。在植物中，除了能调控其生长发育，RNA沉默在植物抵抗病毒的入侵中同样起着非常重要的作用。一些植物病毒侵染常伴有卫星RNA的复制，并影响辅助病毒在寄主中的致病性。 在国家重点基础研
一些样本来源在其RNA或内含物方面存在着显著不同，可能导致RNA的分离和分析过程出现问题。当操作这些样本来源时需要一些特别注意事项。本节将针对大量不同样本来源的操作进行探讨。植物从植物材料中分离RNA会遇到一些特殊困难，常规技术在用于植物样本之前一般要先经过条件优化。一些植物代谢产物的化学性质与核酸
近日，美国《国家科学院院刊》在线发表了南京农业大学植物病毒学实验室教授陶小荣团队的最新研究成果。他们成功拯救出番茄斑萎病毒，在全球首次建立植物多分体负义链 RNA 病毒的反向遗传学体系，攻克了植物多分体负义链 RNA 病毒研究中的 “卡脖子” 难题。 论文通讯作者陶小荣介绍，负义链 RNA 病
过去的几十年里，常规农药在提高作物产量上取得不可思议的成就，但是其对于环境的危害也越来越多的被大众所熟知。为此，来自赫尔辛基大学和法国国家科学研究中心(CNRS)的科学家正在研究一种更加环保的解决方案。研究人员正在开发一种RNA疫苗，能够专一性的作用于特定的病害，而不会对作物产生危害。图片来源于
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
近日，国家重点研发计划蛋白质机器与生命过程调控重点专项“植物非编码RNA-蛋白质复合机器的功能和作用机制” 项目和“高分辨率冷冻电镜新技术新方法的发展及在结构生物学中的应用”项目的实施启动会在清华大学召开。教育部科技司、清华大学科研院、科技部高技术研究发展中心和项目参与单位相关人员参加了启动会。
一、RNA 制备 模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人
作为农业领域实力最强的高校之一，华中农业大学在作物遗传育种、微生物学、果树学、分子化学与分子生物学、遗传学、细胞生物学等学科领域一直很有优势。 近几年，华中农业大学的这些优势学科发展也都非常迅速。继上个月一周连发3篇Nature子刊后，4月11日，华中农业大学3个研究团队又同时发表了3篇顶尖论
早在1989年研究人员就在植物中发现了RNA编辑的现象。2005年，第一个参与RNA编辑的蛋白因子被鉴定出来，发现它是一个PLS-type的PPR蛋白。近期来自华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室的研究人员报道了RNA编辑关键因子MORF蛋白可以和PLS-type PPR蛋白相互作用形成复报道
8月15日《科学》杂志精选 勒死草植物的混杂RNA 据一项新的研究报告，一种像一个饥饿的吸血蝙蝠那样钩在其他植物茎干上的寄生性植物会与这些植物交换大量的RNA。菟丝子类也被称作勒死草，它们会用被称作吸根的专用器官从其不同的植物宿主那里获取食物与水。吸根会穿透宿主组织并建立联系，这些联系
第一节 概 述 从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工
植物病毒俗称植物上的癌症，其流行和爆发严重威胁着粮食生产和人类食品安全。据不完全统计，全世界每年因植物病毒病造成的农业损失占粮食作物总产量10%。传统的植物病毒检测方法包括血清学检测、电子显微镜观察、指示植物接种、通过PCR或RT-PCR进行的DNA扩增、芯片杂交等，使用这些方法的一个重要前提是
高通量植物（转）基因检测的利器---植物材料直接PCR技术 摘要： 北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒（RP3301）成功解决了各种难提植物RNA的问题后，新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒（PR7501），该试剂盒不需要
其植物基因抑制研究在全球得到广泛应用，可培育出蓝玫瑰 据www.abc.net.au网站2007年9月20日报道，通过揭露如何抑制植物基因，澳大利亚两名科研人员王明波博士和彼得·沃特豪斯博士使蓝玫瑰的培植成为可能，他们因此荣膺“澳大利亚总理科学奖”。 王明波博士和彼得·沃特豪斯
摘要： 北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒（RP3301）成功解决了各种难提植物RNA的问题后，新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒（PR7501），该试剂盒不需要液氮和研磨杵研磨，也不需要钢珠破碎，更不借助任何特殊的仪器设备，方法及
摘要： 北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒（RP3301）成功解决了各种难提植物RNA的问题后，新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒（PR7501），该试剂盒不需要液氮和研磨杵研磨，也不需要钢珠破碎，更不借助任何特殊的仪器设备
摘 要： RACE是一种快速克隆cDNA末端的方法，目前, 该方法被广泛应用于未知碱基序列基因的克隆，尤其是SMART RACE技术更为人们所青睐。本文总结了我们实验室用SMART RACE技术克隆基因的一些心得体会，希望对用RACE方法克隆基因的同行有些帮助。关键词： RACE; RN
西红柿、草莓、葡萄……放上几天就要被灰霉菌侵染长毛，哪怕在冰箱中冷藏也无法避免。灰霉菌为何如此厉害?美国加州大学河滨分校金海翎教授实验室为解答这一问题提供了新线索，他们发现灰霉菌会借助一种特殊手段攻破果蔬的免疫防线。 灰霉菌是空气中大量存在的一种真菌，迄今未发现有植物对其产生抗性。金海翎等
西红柿、草莓、葡萄……放上几天就要被灰霉菌侵染长毛，哪怕在冰箱中冷藏也无法避免。灰霉菌为何如此厉害?美国加州大学河滨分校金海翎教授实验室为解答这一问题提供了新线索，他们发现灰霉菌会借助一种特殊手段攻破果蔬的免疫防线。 灰霉菌是空气中大量存在的一种真菌，迄今未发现有植物对其产生抗性。金海翎等
第三节 植物病毒RNA 提取大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。一、材料提纯TMV病毒液（10mg/ml）。二、设备冷冻台式离心机，低温真空干燥仪，电泳仪，电泳槽。三、试剂TE-饱和酚:氯仿（1:1），氯仿
高通量测序技术已广泛应用于植物研究中，但植物材料中较多的蛋白质、多糖以及酚、脂类等次生代谢物质，提取核酸的难度往往比动物或原核生物样本大，因此如何从植物样本中得到高质量的核酸进行后续的测序，成为在植物高通量测序应用中的首要因素。根据核酸类型，可有如下制备方法可参考： 1. 植物基因组 DNA
在真核生物中，RNA沉默是一个具有核苷酸序列特异性的，能够导致RNA降解、DNA甲基化，异染色质形成，以及蛋白翻译抑制的调控机制。在植物中，诱发高效的RNA沉默还包括siRNA和甲基化在靶序列上的漂移、沉默信号在细胞间和整株植物的扩散并产生由信号诱导的RNA沉默（非自主性沉默）。植
借助 CRISPR/Cas 系统介导的 HDR，实现优异等位基因替换和基因定点插入，进而创制农作物新种质，是农作物基因组编辑研究的热点和重要课题之一。但目前这一技术的广泛应用仍十分具有挑战性，主要原因在于：1）CRISPR/Cas系统引起的基因组靶位点DNA序列双链断裂（Double-stran
第一节 概 述 从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了
由来自宾夕法尼亚州立大学的化学家和植物生物学家领导的一个研究小组开发出了一种分子技术，将有助于科学团体以从前不可能达到的规模，来分析在基因表达调控中起重要作用的分子。 科学家们开发出了一种方法，能够更精确预测在活细胞内核糖核酸分子(RNAs)的折叠情况，由此阐明植物以及其他的活体生物对环境