野菊花总黄酮的提取及萃取精制研究
野菊花是菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L)的干燥头状花序,具有清热解毒、清火明目、平肝降压、保护心血管等作用。黄酮类化合物是野菊花的主要活性成分之一。本文研究了野菊花黄酮的提取和萃取精制工艺,并对高速逆流色谱分离野菊花黄酮单体进行了探索。 主要研究内容包括: 1.研究了野菊花总黄酮的提取工艺,以总黄酮得率为优化目标,考察了乙醇浓度、液固比、温度、提取时间和提取次数五个主要因素对提取效果的影响,确定了较优的提取工艺条件。 2.研究了野菊花总黄酮的萃取工艺,以萃取率和萃取物纯度为优化目标,考察了萃取剂种类、萃取原料液浓度、相比和萃取次数四个主要因素对萃取效果的影响,确定了较优的提取工艺条件。此外,在多次萃取时还发现,第2、3次萃取物的总黄酮纯度较高(大于60%),可作为进一步分离提纯黄酮单体的原料。 3.利用高速逆流色谱(分析型和制备型)对萃取物进行进一步分离纯化探索。研究了正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂......阅读全文
野菊花栓的注意事项及贮藏
注意事项 1.肝郁气滞、肾阴不足,脾肾两虚所致的淋症不宜使用。 2.脾肾两虚,寒湿带下不宜使用。3.饮食宜清淡,忌饮酒,辛辣食物。 4.在使用本品前,如发现栓粒有软化现象,应先将塑片用湿毛巾覆盖或浸在冷水里片刻,即可使用,不减其效。 5.孕妇及哺乳期妇女遵医嘱。 贮藏 密闭保存。
多糖多酚植物总RNA快速提取试剂提取水稻胚乳总RNA
实验概要采用TAKARA的试剂提取水稻胚乳,主要是后期的胚乳RNA量偏少,不易提取!实验步骤1. 称量100mg的新鲜或者超低温冻结的植物RNA提取样品,迅速转移至用液氮预冷的研钵中,用研杵研磨组织,其间不断加入液氮,直至研磨成粉末状。2. 向研钵中加入1000μL RNAiso-mate for
植物总RNA的提取实验技术
一、实验目的 通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法 二、实验原理 RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的 RNA,必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使核蛋白与核酸分离,失活RNA酶,所以RNA从细胞中释
小麦黄化苗总DNA的提取
实验概要学习和掌握DNA的微量提取法。实验原理小麦黄化苗经液氮研磨,可使细胞壁破裂,加入去污剂(如SDS),可使核蛋白体解析,然后使蛋白和多糖杂质沉淀,DNA进入水相,再用酚、氯仿抽提纯化。本实验采用SDS法,其主要作用是破膜。SDS属阴离子去污剂,要溶解膜蛋白与脂肪,也可解聚核蛋白。SDS在溶液中
土壤总DNA的几种提取方法
SDS 高盐法(方案1) 具体步骤: 称取1 g 土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨;再倒入适量的液氮,研磨,重复3 次,使土壤颗粒研成粉末; 将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ,0.1 mol/L EDTA [pH 8.0 ] ,0.1 mo
小麦黄化苗总mRNA的提取
[实验原理]RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的RNA必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。本实验以小麦为材料,采用异硫氰酸胍—苯酚—氯仿抽提法或CTAB法提取总RNA。异硫氰酸胍是高浓度变性剂,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,所以R
真核细胞总RNA的分离提取
RNA是基因表达产物,由以下几类分子组成,rRNA(占细胞总RNA的80%~85%)、tRNA和核内小分子RNA(占10~15%)、mRNA(占1~5%)。其中mRNA是分子生物学的主要研究对象,分离制备mRNA是克隆基因,分析基因表达以及建立cDNA文库的首要步骤。真核细胞总RNA分离提取的目的是
细胞总RNA的提取操作步骤
一、准备1、 物品:Trizol、氯仿(三氯甲烷)、异丙醇、75%灭酶异醇、冷PBS、1.5ml灭酶EP管、灭酶枪头、一次性手套、EP管架、吸管 2、 打开冷冻离心机4℃预冷 二、操作步骤: 将Trizol、氯仿、冷PBS、EP管、灭酶枪头、一次性手套、EP管架、吸管等物品带入细胞室。
细菌总DNA的提取和鉴定
【目的和要求】1.学会CTAB法提取细菌总DNA。2.掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳法。【实验原理】DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核蛋白复合物后,必须将其中蛋白质去除。CTAB(溴代十六烷基三甲胺)是一种去污剂,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中可溶并且稳定存在,若
Trizol法提取总RNA的原理
Trizol试剂的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是对细胞进行裂解,从而使细胞当中的蛋白质以及核酸物质解聚而得以释放。苯/酚虽然可以有效的使蛋白质变性,但它不能完全抑制RNA酶的活性,因此Trizol中还加入了8-羟基喹/啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(即RNA酶)。Tr
索氏提取器的萃取方法
萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后,将固体物质放在滤纸包内,置于提取器中,提取器的下端与盛有浸出溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过连接管上升,进入到冷凝管中,被冷凝后滴入提取器中,溶剂和固体接触进行萃取,当提取器中溶剂液面达到虹吸管的最高处时
索氏提取器的萃取方法
萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后,将固体物质放在滤纸包内,置于提取器中,提取器的下端与盛有浸出溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过连接管上升,进入到冷凝管中,被冷凝后滴入提取器中,溶剂和固体接触进行萃取,当提取器中溶剂液面达到虹吸管的最高处时,含
索氏提取器的萃取方法
萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后,将固体物质放在滤纸包内,置于提取器中,提取器的下端与盛有浸出溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过连接管上升,进入到冷凝管中,被冷凝后滴入提取器中,溶剂和固体接触进行萃取,当提取器中溶剂液面达到虹吸管的最高处时
索氏提取器的萃取原理
索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的,提取管两侧分别有虹吸管和连接管,各部分连接处要严密不能漏气。提取瓶内加入石油醚,加热提取瓶,石油醚气化,由连接管上升进入冷凝器,凝成液体滴入提取管内,浸提样品中的脂类物质。优点:从固体物质中萃取化合物的一种方法是,用溶剂将固体长期浸润而将所需要的物质
人参有效成分超临界萃取法提取与纯化的研究
本文以5年生人工种植人参作为原料,以超临界CO2流体萃取作为关键技术提取人参有效成分:即人参脂溶性成分、人参皂苷、人参多糖,人参淀粉,研究人参有效成分超临界CO2萃取的最佳工艺参数,并对相应萃取物进行纯化与鉴定,以便期望实现高效萃取人参有效成分的现代化工艺。本文主要研究结果如下: (1)采用超临界C
食用菌活性成分中超临界CO2流体萃取技术的应用
1.萜类的提取。萜类化合物种类繁多,在自然界中的分布十分广泛,有20000余种之多。从结构看,它是异戊二烯聚合体及其衍生物,一般以5个碳为基本单元,萜类通式可写为C5H8。异戊二烯间大多按头尾相接的顺序相聚合。萜类极性小,在SCF-CO2中有良好的溶解性能,大多数都可用CO2直接萃取得到,所需的操作
关于黄酮类物质的酶解法提取法介绍
酶解法是一种较好的辅助提取方法。酶具有高度的选择性,因此对不同提取材料,选择合适的酶对提取率影响较大。林宣贤在提取金樱子黄酮过程中,分别用单一酶处理和复合酶处理进行对比实验发现,复合酶的处理效果要明显好于单一酶,且复合酶辅助处理后,金樱子总黄酮产率提高了26.2%。
黄酮类化合物的提取方法
1、醇提取法黄酮类化合物提取最常用一种方法,常用的有机溶剂主要有乙醇、乙醚、甲醇和乙酸乙酯等,其中乙醇是最常用的。2、微波提取法微波提取技术又称微波萃取技术,其最大的优点是耗能耗材少、无污染,尤其对特定的药材提取具有高选择性。3、超临界萃取技术超临界萃取是一种较广泛使用的药物提取、分离手段,其最大的
植物基因组DNA及总RNA提取技术1
幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段,核较大而胞质较少,核酸浓度高,且内含物少、次生代谢产物少,蛋白质及多糖类物质相对较少,在SDS或 CTAB物质存在时,经机械研磨,使细胞破裂并释放出内含物,提取的DNA、RNA的产量高,纯度好。 提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活DNase。R
植物基因组DNA及总RNA提取技术2
(二)植物总RNA提取 (1)65°C水浴中预热15 mL CTAB提取液。 (2)液氮中研磨2~3 g新鲜或-70°C冷冻的材料。 (3)转移样品至有CTAB提取液的离心管中,立即激烈涡旋30s,短时放回 65°C水浴中(4~5 min)。 (4)加入等体积的氯仿/异戊醇并涡旋混合,10000 r
线虫总RNA提取及RTPCR实验方法
C. elegans RNA Isolation and RT-PCRReagents Needed:M9 (common stock)Trizol (stored at 4ºC)chloroform2-propanol70% EtOHRNase-free H2OiScript cDNA Synth
紫外分光光度法测定荔枝核抗乙肝成分的含量
荔枝核是无患子科植物荔枝的干燥成熟种子,主要分布在福建、台湾、广西、广东等省。我国古代药典记载荔枝核性温,归肝、肾经, 能祛寒止痛。现代临床实验研究显示荔枝核能够降低血糖、调节血脂和提高抗氧化能力、抑制乙肝病毒的作用[1,2]。徐庆等[3]发现荔枝核中黄酮类化合物具有很好的抑制乙肝病毒表面抗原HBs
总RNA提取实验——CsCl法
实验材料RNA试剂、试剂盒PBS异硫氰酸胍CsClDEPC无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤一、 用于单层培养细胞 1. 室温下用PBS冼涤细胞,每平皿用5 ml,洗2次。2. 在不超过108细胞中加入异硫氰酸胍溶液,并使之遍布整个平皿。3. 用橡皮细胞刮子擦刮平皿,回收粘稠的
CTAB法提取植物总DNA
实验概要CTAB法是一种快速简便的提取植物总DNA的方法,通过实验掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法。 实验原理CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特
脂肪测定仪提取桔梗总皂苷测定方法研究
桔梗为桔梗科多年生双子叶草本植物桔梗Platycodon grandiflorum (Jacq.)A.DC. 的干燥根,是传统大宗类常用中药材之一,性味苦、辛、平,归肺经,有宣肺、利咽、祛痰、排脓之功效。临床常用于咳嗽痰多,胸闷不畅,咽肿,音哑,肺痈吐痰,疮疡脓成不溃等症。《中国药典》2
比色法测定柿叶中总黄酮的含量
利用黄酮类化合物可与金属离子形成有色螯合物的原理,建立柿叶中总黄酮含量测定方法,并且对供试品制备方法进行选择。通过正交试验设计选取供试品制备条件,采用分光光度法,KAc-AlCl3体系与供试品中黄酮提取物反应,选择最大吸收波长,以芦丁为对照品制作标准曲线,并做方法学考察。供试品制备:提取液70%乙醇
植物中如何对黄酮类进行细提取
传统的萃取芝法有有机溶剂萃取,热水萃取,碱性水或碱性稀醇萃取体系溶剂萃取法。乙醇和甲醇是提取黄酮类化合物最常用的溶剂,糖原的提取宜采用浓度较高的酒精(如9% ~ 9%),糖原的提取宜采用浓度约为%的乙醇或甲醇溶液,乙酸乙酯和丙酮也常用来提取黄酮类化合物,萃取过程包括冷浸、渗滤和回流。超声提取是一种新
高速逆流色谱
高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)是由美国国家医学院Yiochiro Ito博士于1982年首先开始的。到目前为止,此项技术已用于生物化学、生物工程、医学、药学、天然产物化学、有机合成、化工、环境、农业、 食品、材
高速逆流色谱在植物有效成分分离中的应用
高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)是由美国国家 医学院Yiochiro Ito博士于1982年首先开始的。到目前为止,此项技术已用于生物化学、 生物工程、医学、药学、天然产物化学、有机合成、化工、环境、农业、 食品、材料等
高速逆流色谱在植物有效成分分离中应用
高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)是由美国国家医学院Yiochiro Ito博士于1982年首先开始的。到目前为止,此项技术已用于生物化学、生物工程、医学、药学、天然产物化学、有机合成、化工、环境、农业、 食品、材料等领域