骨髓瘤细胞SP2/0培养过程中遇到的问题及对策

1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;② 接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净。2,细胞形态异常正常生长情况下,细胞浑圆,透亮,成对数生长,生长越好,贴壁多,悬浮少。对策:①培养基配方不对;② 接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净。......阅读全文

马传贫病毒(EIAV)单克隆抗体的制备

材料与方法 1.抗原动物及免疫方法抗原为哈尔滨兽医研究所保存的马传贫病毒株培养物制备的可溶性抗原。免疫动物为6~8周龄的Balb/c鼠。初次免疫用含完全佐剂抗原0.2ml(病毒含量为1.0×108/ml制备的可溶性抗原)腹腔接种,经2周再次免疫接种,应用不完全佐剂抗原0.2ml腹腔接种,再经3周强化

血培养假阳性的原因及对策

 色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理,监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度(PH)改变,从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料(Liquid Emulsion Sensor , LES)颜色变浅,通过

血培养假阳性的原因及对策

色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理,监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度(PH)改变,从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料(Liquid Emulsion Sensor , LES)颜色变浅,通过照射感应器

单克隆抗体技术

实验原理  B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后,用一特殊选择培养 基(HAT)阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路,而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存,且既能产生抗体,又能无限增殖,并以此生产抗

单克隆抗体技术

实验概要显微镜下观察血片或骨髓片,找出异常细胞。实验原理B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后,用一特殊选择培养基(HAT)阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路,而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存,且既能产

单克隆抗体技术

实验概要显微镜下观察血片或骨髓片,找出异常细胞。实验原理B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后,用一特殊选择培养基(HAT)阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路,而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存,且既能产

低温恒温循环器使用过程中遇到的问题及解决方案

1、水循环以前使用都很正常,现在发现噪音比以前大很多,这是什么原因?解决:前面提到过水循环的日常维护工作,这个问题也与之有关。大家都知道,水里面有很少部分的杂质,就是蒸馏水在加到水箱后也不可能完全保证一点杂质都没有。对于水循环而言,一般温度都设置在20℃,特别适应微生物的生长和繁衍。时间长了以后这些

使用高效液相色谱过程中会遇到哪些峰异常问题?

峰型问题是液相的主要问题,在做液相过程中,我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰,要区别对待,从主要问题出发,一个一个加以解决。  1、色谱图中未出峰。解决方法:系统未进样或样品分解;泵未输液或流动相使用不正确;检测器设置不正确;针对以上情况成因作相应调整即可。  2、一个峰

使用高效液相色谱过程中会遇到哪些柱压问题?

压力过高 这是高效液相在使用中最常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。  (1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸

基层食品快速检测存在的问题及对策

一、基层食品快速检测工作中存在的问题    1.快速检测设备功能自身的局限。一是食品快速检测箱检测范围过窄。现行食品快速检测箱的设施功能基本上只限于对蔬菜的农药残留以及部分食品中的二氧化硫等快速检测,不能对流通环节的诸多食品种类进行全覆盖检测。二是配套设施不全,工具简陋,检测准确性不高。三是快速检测

关于单克隆抗体制备骨髓瘤细胞的介绍

  骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。  选择骨髓瘤细胞的条件:  ①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原一致;  ②骨髓瘤细胞必须是静息状态,不产生γ球蛋白

单克隆抗体细胞选择骨髓瘤细胞

骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。选择骨髓瘤细胞的条件:①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原一致;②骨髓瘤细胞必须是静息状态,不产生γ球蛋白或不分泌到细胞外

细胞融合实验的设备材料介绍

  超净工作台、二氧化碳恒温培养箱、倒置生物显微镜、离心机、恒温水浴箱、冰箱、细胞混匀器、荧光显微镜或流式细胞仪等。培养器皿及其它:96孔、24孔培养板、培养瓶、离心管、平皿、保温杯、培养液过滤装置、不锈钢网及手术剪刀、镊子等。Balb/c小鼠。SP2/0细胞(骨髓瘤细胞)。

细胞杂交与选择培养的介绍

  (1)融合:细胞杂交之前,要分别准备好脾脏的B细胞悬液和小鼠骨髓瘤细胞(如SP2/0—Agl4细胞株)。免疫后的小鼠脾脏在无菌条件下破碎,将B细胞悬浮在没有血清的培养液中(通常使用RPMIl640商品配制),并洗涤3次去掉小鼠的血清。SP2/0细胞是用加有10%胎牛或小牛血清培养的,每天更换新鲜

细胞杂交与选择培养

  (1)融合:细胞杂交之前,要分别准备好脾脏的B细胞悬液和小鼠骨髓瘤细胞(如SP2/0—Agl4细胞株)。免疫后的小鼠脾脏在无菌条件下破碎,将B细胞悬浮在没有血清的培养液中(通常使用RPMIl640商品配制),并洗涤3次去掉小鼠的血清。SP2/0细胞是用加有10%胎牛或小牛血清培养的,每天更换新鲜

细胞杂交和选择培养

     融合:细胞杂交之前,要分别准备好脾脏的B细胞悬液和小鼠骨髓瘤细胞(如SP2/0—Agl4细胞株)。免疫后的小鼠脾脏在无菌条件下破碎,将B细胞悬浮在没有血清的培养液中(通常使用RPMIl640商品配制),并洗涤3次去掉小鼠的血清。SP2/0细胞是用加有10%胎牛或小牛血清培养的,每天更换新鲜

细胞培养相关问题及解答(一)

  小牛血清和胎牛血清有何区别?应用注意事项?   来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。   组份与比例不同:两者所含的促细

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策

   良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组

高亲和力单克隆抗体制备问题及对策

1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;② 接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净

氮气发生器在使用过程中会遇到哪些问题?

出现的状况很可能的原因纠正措施氮气发生器不运转电压低检查电源断路器故障重新设定电路断路器保险丝烧断更换保险丝主电源关闭打开氮气发生器电源开关PLC没电,低电压检查PLC故障指示器LEDs空气压力低压缩机故障线路缺陷检查线路连接氮气发生器持续运转压力设置太高降低设置压力压力开关或电连接压力表故障更换开

气体发生器在使用过程中遇到问题

气体发生器在使用过程中遇到的问题有两个比较常见,一.可靠性难以保证,二.安全性存在问题。其可靠性难以保证具体表现在有部分发生器的纯度不够,氮气和氢气中含水量高而且还带有一定的腐蚀性,如果操作不当会有返液现象发生。上述情况会造成色谱仪不容易稳定及色谱柱柱效降低等现象,严重时可使气路及色谱柱报废,甚至导

生产过程中露点仪测量时所遇到问题

一:生产锂电为什么测量露点?1、通过测量的露点值能判断出设备是否运行正常;2、电池材料需要保持一定干燥;3、通过了解箱子中的露点值,才能确保产品质量;4、生产过程中检测和控制湿度(露点)可提高产品合格率,降底成本,提高产量,同时提高品质。5、锂金属对水气及氧气具有极高的氧化性,因此,生产锂离子高分子

电子天平使用中存在的问题及对策

  电子天平是通过作用于物体上的重力来确定该物体质量,并采用数字指示输出结果的计量器具。使用方便快捷,广泛应用在工业生产,食品安全,医疗卫生,以及贸易结算等领域。秤量的准确性直接影响着数据结果的准确性,因而操作人员的正确使用对确保数据结果的准确性非常关键,在实际检测工作中,最常见存在的问题有以下几方

医院检验科感染管理的问题及对策

    检验科是医院感染管理的重点部门之一。检验科检验的标本是患者的血液、体液、分泌物、排泄物等。工作人员直接接触这些带有不同种类病原微生物的标本,很有可能造成自身感染甚至交叉感染,并导致病人的医源性感染。因此,加强医院检验科的感染管理十分重要。    1 存在问题    1.1 规章制度不

我国食品安全检测的现状、问题及对策

  摘要:近年来,我国食品安全领域问题频发,严重影响着人们的生命健康安全。这就要求检验机构提高检测技术水平以便及早发现食品安全问题,并采取措施将其消灭在萌芽之中。因此,做好食品安全的检验检测工作意义十分重大。本文试从目前我国食品安全检测的现状出发,剖析食品检测过程中存在的诸多问题及原因,并据此提出具

浅谈河道综合治理中的问题及对策

  引言  随着我国城镇化发展进程的持续性加快,城市当中人口数量不断增多,同时污染废水的排放也在随之提升,如果无法及时对这一些污染物形成有效控制,必然会导致城市污染问题的持续加重,最终影响城市居民的生活质量以及城市形象。对此,在城市发展进程中,河道的综合治理工作显得非常重要,属于文明城市、和谐社会建

我国环境监测技术存在的问题及对策

  当前,随着我国社会经济的高速发展,环境问题逐渐凸显,受到社会和人们的普遍关注,我国为了充分了解和掌握环境的当前状况,采用了多种监测技术,动态跟踪环境实际情况。但是在应用环境监测技术的同时,也存在一些问题,本文针对这些问题进行分析和阐述,并且提出相关对策,确保监测技术的可行性以及合理性,希望给予行

浅谈PCR方法中常见的污染问题及对策

浅谈RT-PCR实验方法中常见污染问题及对策 河南出入境检验检疫局技术中心 李轲 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是一种体外核酸扩增技术,它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点,能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定,所以