一种针对细胞表面受体进行抗体筛选的多重分析方法二

实验方法细胞系和细胞培养该文章对表达EGFR受体的的A549和A431两种细胞进行了比较,A549,A431和Jurkat细胞购自Sigma。三种细胞的培养条件如下,A549细胞:含有10%FBS的DMEM,2mM L-glutamine和100U/ml青霉素,100U/ml链霉素;A431细胞:含有10%FBS的EBSS(Sigma),2mM glutamine,1×Non-essential Amino Acids(NEAA)(Sigma), 100U/ml青霉素,100U/ml链霉素;Jurkat细胞:RMPI-1640(Sigma),10%FBS,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素。A431和A549细胞培养到80%的密度时,利用0.25%胰酶和EDTA进行消化,洗涤,重悬到新的培养基中。未有标注的培养试剂均来自于Life Technologies。抗体和试剂鼠抗人EGFR抗体购自Merck Ch......阅读全文

基于HAV抗原表位结构信息设计小分子抑制剂

  甲型病毒性肝炎(Type A viral hepatitis),是由甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus, HAV)引起的一种传染病,感染HAV后可引起不同程度的急性症状。现今全球每年仍有150万甲型肝炎病毒的感染病例。甲型肝炎作为一种传染病,其流行、爆发与该地区的收入状况、卫生和生

俄歇电子能谱分析是一种表面分析方法且空间分辨率高

(1)大多数元素在50~1000eV能量范围内都有产额较高的俄歇电子,它们的有效激发体积(空间分辨率)取决于入射电子束的束斑直径和俄歇电子的发射深度。(2)能够保持特征能量(没有能量损失)而逸出表面的俄歇电子,发射深度仅限于表面以下大约2nm以内,约相当于表面几个原子层,且发射(逸出)深度与俄歇电子

2019nCov药物研发进展和策略

  一、2019-nCoV的简要回顾  目前的研究表明,新型肺炎是指由新型冠状病毒(2019-nCoV)引起的呼吸道疾病。因此,新型肺炎药物的研制离不开对2019-nCoV的认识。  2020年2月3日,上海公共卫生临床中心、复旦大学公共卫生学院张永振教授团队和中科院武汉病毒研究所石正丽教授团队分别

临床化学检查方法介绍促甲状腺受体抗体介绍

促甲状腺受体抗体介绍:  促甲状腺受体抗体是鉴别甲亢病因、诊断GD的重要指标之一。Graves病(简称GD)又称毒性弥漫性甲状腺肿或Basedow病,是一种伴甲状腺激素(TH)分泌增多的器官特异性自身免疫病,与慢性淋巴细胞性甲状腺炎和产后甲状腺炎等同属于自身免疫性甲状腺病(AITD),有显著的遗传倾

SLAS-2013分会:美国年会创新计划奖项的侯选者及获得者

  2013年6月6日,实验室自动化与筛选协会2013亚洲会展在上海金茂君悦大酒店盛大开幕,国内外知名药企、生物医学研究专家、学者等应邀参会。“美国年会创新计划奖项的候选者及获得者”报告分论坛于6月7日下午举行,由RainDance科技研发副总裁Darren R.Link博士、百时美施贵宝公司高级研

酶标记抗体技术方法(二)

三、HRP标记抗体的方法  酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。  戊二醛二步法  1. 原理:戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白

我国在细胞凋亡荧光成像分析及药物筛选方法取得进展

  肿瘤细胞凋亡与癌症的发生、发展、死亡密切相关,对药物诱导的肿瘤细胞凋亡进行检测,可以作为药物筛选以及判定抗肿瘤药物治疗效果的依据,在肿瘤治疗中发挥着重要作用。细胞色素c(Cyt c)是细胞凋亡早期信号的重要标志物,在癌细胞的凋亡进程中起到关键作用。通过监测细胞凋亡进程中Cyt c的释放水平,有助

一种新型整合酶抑制剂高通量筛选方法

  随着HIV-1病毒耐药性的不断升级,抗艾滋病药物的研发远远滞后,抗HIV-1药物新靶点的发现和创新药物的研发已成为燃眉之急。HIV-1整合酶催化病毒cDNA与宿主细胞基因组的整合,是HIV病毒复制周期中必需的关键酶。人体内无整合酶功能类似物。因此,整合酶是抗艾滋病药物研发的理想靶点。  近年来,

血细胞分析仪检测方法(二)

  电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术  典型机型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等。这类仪器共有四个不同的检测系统,将标本用特殊细胞染色技术处理后再应用RF和DC技术对白细胞进行分类和计数。其共采用如下四个检测系统:  嗜酸性粒细胞检测系统:该系统是利用电阻抗方式计数。

多重PCR反应的方法

一)选择目标基因由于多重PCR在同一个反应体系中需要加入多对引物,而模板直接影响扩增的结果分析,这就导致了扩增模板的选择至关重要。同时,扩增区域的选择必须符合分析的目的,如通常对于致病微生物,需要选择其保守序列,如16sRNA,或者毒力基因、毒力相关基因,以防止检测到非致病突变体而无法解释结果;对于

文献研究:质谱流式(CyTOF)的高端应用

质谱流式细胞术是指用稳定的重金属同位素(主要是镧系元素)代替荧光基团来标记抗体。然后将细胞引入CyTOF分析仪并雾化成液滴,液滴被汽化、雾化、电离,然后通过电势加速被带入质谱仪。最后,用TOF探测器对过滤后的离子云进行分析。图1.质谱流式工作原理尽管质谱流式细胞术通常被认为是一种基于荧光流式细胞术的

高内涵成像技术在单抗结合检测中的应用(一)

优点   1.无需冲洗的检测方法提高效率,减小浪费   2.应用范围广,可用于贴壁细胞,悬浮细胞及免疫磁珠   3.可用任何波长的荧光标记   4.高敏感度可检测低丰度抗原   单抗结合检测方法的发展大大提高了细胞及免疫磁珠的高通量,高内涵分析效率。这种不用冲洗,基于荧光微孔分析技术(fluorom

利用抗独特型抗体激活表达广泛中和抗体的前体B细胞

  诱导保护性的广泛中和抗体(broadly neutralizing antibody, bNAb)产生是成功接种疫苗的关键策略。然而,对于许多重要的全球性疾病,如艾滋病和流感,人们尚未实现高效的疫苗接种。  一种开发新疫苗的策略专注于鉴定出病原体上的特定脆弱靶标,疫苗诱导出的保护性抗体应当能够靶

杂交瘤细胞怎么筛选分离方法

第一次用加入氨基蝶呤的选择培养基选择出融合正确的杂交瘤细胞第二次用抗原抗体反应选择出可以产生抗体的杂交瘤细胞。

声学所提出一种针对双耳重放的声源仰角参数化控制方法

  仰角感知在双耳重放中起着重要的作用。人类听觉系统对仰角的感知主要依靠双耳接收信号的谱信息。近年来,谱信息对仰角感知的影响一直是科研人员关注的热点,基于头相关传输函数(Head Related Transfer Function, HRTF)的音效定位研究表明频谱中的峰值点和谷点是决定声源仰角感知

药物动力学模拟新算法,将减少新冠药物开发时间

英国《自然》杂志近日在线发表一篇重磅研究。在美国华盛顿大学蛋白质设计研究所所长、2021年生命科学突破奖获得者戴维·贝克的带领下,研究人员创造了一种生产蛋白质药物的强大新方法。利用计算机,他们设计了可以针对体内重要蛋白质(如胰岛素受体,以及病毒的表面蛋白)的小分子结合蛋白。这一进展或有助于开发应对诸

ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(一)

ClonePixTM 2系统提供了一种全新、快速评估哺乳细胞系GPCR靶蛋白表达水平的方法 1.  用哺乳表达系统快速评估GPCR靶蛋白的內源表达水平 2.  增加发现最优细胞反应器的可能性 3.  减少细胞系/抗体开发的时间—避免有限稀释法    背景   哺乳细胞GPCRs的内源表达通常是非常低

我国学者发现治疗甲型肝炎先导化合物——golvatinib

  2019年4月30日,《Plos Biology》在线发表了中国科学院生物物理研究所王祥喜研究员、饶子和院士和四川大学苏丹教授合作的研究论文“Structural basis for neutralization of hepatitis A virus informs a rational d

用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(一)

作者:Xiaojuan Liu1, *, Yongping Zhang2, *, Chen Cheng1, 3, *, Albert W Cheng4, Xingying Zhang1, 5, Na Li1, Changqing Xia2, 6, Xiaofei Wei7, Xiang Li

用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(三)

流式细胞术 Flow cytometry CytoFLEX (Beckman Coulter Inc) was used to perform fluorescent expression analysis. Cells were harvested on the following day

亲和质谱技术:药物靶标配体的高通量筛选

  疾病相关的药物靶标蛋白与小分子化合物的亲和作用研究是当今开发新药分子的热点领域。亲和质谱技术(Affinity Selection Mass Spectrometry)作为一种间接筛选小分子配体的方法,已经成功应用于许多受体、酶等靶蛋白的配体的筛选,并且得到了广泛的应用。  亲和质谱分析的基本原

多色流式细胞术筛选活化T淋巴细胞(二)

流式细胞术表型分析策略,用于鉴定正常人外周血中活化的T细胞。 1.单重态细胞2.白细胞3.淋巴细胞4.CD3 + T淋巴细胞5.CD4 +与CD8 + T淋巴细胞 下中部:活化的CD8 +细胞毒性T淋巴细胞 右下:循环的滤泡辅助性T淋巴细胞右上:激活的CD4 +辅助/诱导T淋巴细胞 COVID-19

气体吸附法进行比表面及孔径分析仪分析进展

 气体吸附法是获得多孔材料全面表征的极好方法,它可以反映比表面、孔径分布等方面的信息。但是,这需要对吸附过程有一个详细的了解,包括多孔材料对流体的吸附和相变化及其对吸附等温线的影响,这是表面分析和孔分析的基础。    孔宽,孔形及有效的吸附能与孔填充过程有关。如果是所谓微孔(按照IUPAC 分类,

乙肝表面抗体阳性的概述

  乙肝表面抗体详解:乙肝表面抗体是人体的保护性的抗体,主要是乙肝病毒表面抗原刺激人体免疫系统而产生的抗体。它的出现,能中和掉人体内的乙肝病毒。具体保护人体的作用。其英文简写为HBsAb。

乙肝表面抗体阳性的意义

  1、单项抗-HBs阳性 (1)接种乙肝疫苗成功的标志;(2)单项低效价抗-HBs阳性有时为非特异性反应。  2、与抗-HBc、抗-HBe同时阳性 机体自然感染(包括隐性感染和显性感染)乙肝病毒(HBV)以后发生免疫应答,乙肝病毒被清除,机体获得抵御乙肝病毒再次侵袭的特异性免疫力;  3、与HBs

达普生物最新自动数字PCR系统,开拓数字PCR多重检测能力

前言:2022 年 8 月,达普生物科技有限公司正式推出六色荧光通道的微液滴式数字 PCR——星云六色全自动数字 PCR 系统(Nebula 6 Channel Auto dPCR System)。该系统基于液滴微流控技术,整合高功率长寿命光学系统,超灵敏荧光检测技术及全新的 AI 图像分析算法为一

FcRn亲和层析HPLC法可用于评估IgG抗体质量属性

  IgG抗体与新生儿Fc受体(FcRn)的结合力与抗体的血清半衰期相关。细胞通过胞饮作用以非特异性方式将IgG抗体摄入。在初级内体囊泡(early endosome vesicle)的低pH下,IgG抗体能够以pH依赖性方式与FcRn结合,随后再循环回到细胞表面上,而不是在溶酶体中被降解。一旦这种

ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-3

图3 Mirrorball允许不依赖荧光抗体的结合量来测量CFSE标记的细胞。而在ABI 8200平台上,细胞必须有荧光抗体的结合才能被检测的到不仅Mirrorball提供了和ABI 8200一样的高灵敏度,而且与ABI 8200只能扫描1 mm2的区域相比,它能够扫描整个孔内的细胞并且不受细胞分布

Cell:将受体固定在癌细胞表面,免疫治疗精准打击

  一种安全可控的体内内吞操作可能具有破坏性的治疗潜力。为此,来自昆士兰大学的研究人员领导的研究小组证明了抗吐剂/抗精神病药丙氯哌嗪可被重新使用,以可逆地抑制治疗性单克隆抗体靶向的膜蛋白的体内内吞作用。  研究人员在人肿瘤体外实验中直接证明了这一点。短暂的抑制内吞可增强靶细胞的可用性,并提高自然杀伤

采用ACQUITY-Arc系统重现单克隆抗体分析方法(二)

 图1. IEX 采集数据比较,使用A) Agilent 1100系列HPLC系统和B) ACQUITY Arc系统。插图显示了酸性和碱性变体的分离情况。利妥昔单抗主峰标示为MP。其它酸性(1A、2A、3A)和碱性(1B 、2B 、3B)残留物均进行了相应标示,并在表1中列出了各自的保留时间。表1.