小鼠胚胎的长时间、6D活细胞观察
哺乳动物细胞胚胎植入发育和时间空间的变化协调是密不可分的，因此，对于这些发育过程的分析也必须是实时，动态而且3D的。我们过去经常使用的荧光蛋白表达技术，mRNA显微注射以及时相荧光显微观察使得活细胞成像成为了可能，但传统的荧光显微镜得到的数据却不能用来构建三维构象，这是由于荧光显微镜不能透过胚胎的厚度而且也无法克服非焦平面的荧光干扰。而且强荧光的重复照射也会对胚胎细胞沉声光毒性，因此长时间的动态观察成了胚胎发育分析的一个瓶颈。我们今天介绍的这篇文章改进了成像系统，使得共聚焦成像设备（采用Yokogawa共聚焦扫描设备）能够得到6D数据（x ,y, z, t, λ, s），重要的是，改进型的成像设备和成像条件使得长时相荧光观察没有对胚胎发育造成任何影响。以我们试验中的数据为例，胚胎在长达70个小时的观察过程中接受了两个波长的荧光激发---488和561（每次拍照的时间间隔为7.5分钟），每个时间点拍摄51个Z轴断层图片；因......阅读全文
小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法
小鼠胚胎干细胞培养可以：（1）细胞保种；（2）用于干细胞研究；（3）用于细胞生理学、形态学等研究；（4）动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
胰酶消化法1 胰酶消化法2 实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置MEF
以胚胎小鼠为例进行原代培养的方法
1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒消毒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的消毒器械。最后取出双角子宫置于无菌平皿内。2．用Hanks液洗涤3次，剪开子宫取出胚胎。除去子宫、血液和筋膜等组织。3．用弯头剪
关于小鼠胚胎中的双纺锤体的介绍
长期以来，科学家认为在哺乳动物胚胎的首次细胞分裂过程中，只有一个纺锤体负责将胚胎染色体分配到两个细胞中。但欧洲研究人员利用小鼠开展的最新实验观察发现，这个过程中实际上有两个纺锤体，分别负责来自父亲和母亲的染色体 [2] 。 双纺锤体的形成可能部分解释了为什么哺乳动物在早期发育阶段（胚胎最初的几
小鼠胚胎的长时间、6D活细胞观察
哺乳动物细胞胚胎植入发育和时间空间的变化协调是密不可分的，因此，对于这些发育过程的分析也必须是实时，动态而且3D的。我们过去经常使用的荧光蛋白表达技术，mRNA显微注射以及时相荧光显微观察使得活细胞成像成为了可能，但传统的荧光显微镜得到的数据却不能用来构建三维构象，这是由于荧光显微镜不能透过胚胎的厚
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗相关研究。实验方法胰酶消化法1胰酶消化法2实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置MEF生长培养基中培养，使细胞得以生存、生
揭示小鼠胚胎的发育时钟和从头细胞极化机制
在植入前发育的过程中，顶-底细胞极性（apicobasal cell polarity）的建立是从全能性向多能性过渡的关键，从而诱导细胞向滋养外胚层（trophectoderm）分化。在小鼠胚胎中，这一事件被设定在8个细胞阶段发生，这一时间遵循一种内在的发育时钟，与胚胎大小或细胞周期进展无关。尽管顶
由最初期胚胎育成小鼠新型全能干细胞问世
英国研究团队在近日《自然》杂志上撰文指出，他们借助一种全新方法，利用小鼠发育最初期的4—8个细胞胚胎，培育出了一种全能干细胞系——扩展潜能干细胞（EPSCs）。新细胞不仅能发育成任何类型的细胞，且发育潜力超过胚胎干细胞等，对人类的再生医学意义重大，有望为研究治疗流产和发育紊乱问题开辟新方向。
上海生科院等建立小鼠早期胚胎空间转录组图谱
3月22日，国际学术期刊《细胞》子刊《发育细胞》在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所景乃禾研究组与中国科学院-马普学会计算生物学伙伴研究所韩敬东研究组合作的最新研究成果“Spatial Transcriptome for the Molecular Annotatio
挑战教条－用非卵细胞制备胚胎并诞健康小鼠
最近，科学家们首次用非卵细胞制备出了动物胚胎，这一发现对于过去两个世纪的教条观念提出了挑战。 卵子可以被“诱骗”发展成一个胚胎，无需受精，但由此产生的胚胎——称为孤雌囊胚，在几天后会死亡，因为没有发生关键的发育过程，而这些过程需要来自精子的信息。 然而，来自英国巴斯大学生物与生物化学系的科学
科学家利用干细胞首次开发出“人工小鼠胚胎”
近日，来自剑桥大学的科学家利用两种类型的干细胞以及3D支架，成功在培养基中制造出了一种类似小鼠胚胎的结构，相关研究刊登于国际杂志Science上。理解胚胎发育的早期阶段一直是科学家们非常感兴趣的领域，因为其能够帮助解释为何有超过三分之二的人类妊娠会发生失败。 一旦哺乳动物的卵细胞同精子结合受精
制滴菌素A对小鼠克隆胚胎的染色体重建
实验概要体细胞移植胚胎制备完成后，若用制滴菌素A(TSA)处理一下，其胚胎制备效率会显著增加。本次试验中以小鼠早期SCNT胚胎为研究对象，检测了TSA在体细胞核重编程方面的影响；检测方面包括：染色体重排、组蛋白修饰、DNA复制和转录活性恢复。实验步骤1. 卵母细胞收集B6D2F1雌鼠注射5 IU马绒
葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用
实验概要为了研究葡萄糖对克隆胚胎早期发育的影响，本实验检测了克隆胚胎与对照组胚胎中葡萄糖的代谢及相关代谢情况，也检测了线粒体的超微结构、分布和数量。实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HE
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒胎牛血清
葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用
实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液，卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体；用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞，以除去
葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用
实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液，卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体；用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞，以除去其细
小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结2
网友观点是：1、关于如何确底胚胎期12.5d~13d的小鼠？希望大家能够介绍一下自己所采用的方法，集思广益。我所采用的方法是选择同一天出生的三对小鼠，到成熟（8~10 w）后，分三周合笼，（每周合笼一对），然后待最早合笼的小鼠产崽后，再取另两个雌鼠的胚胎。不知道这样行不行，也没注意别人是怎样做的。另
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
方法：神经干细胞的培养①原代细胞的培养：取孕13.5天昆明种二级孕小鼠，引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜，取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜，暴露胎鼠，剪开颅骨，取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中，体视显微镜下剥离脑膜,分离胎
小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立
中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中，首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系，而这些细胞保持了一定水平的雄性印记，并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》（Cell）
体视显微镜荧光适配器用于小鼠胚胎筛选
NIGHTSEA体视显微镜荧光适配器(SFA，Stereo Microscope Fluorescence Adapter)应用于筛选GFP阳性的小鼠胚胎并解剖脊髓 实验目的研究者为了研究运动和感觉神经元的生理属性，需要收集出生12-13天带有特殊特性小鼠胚胎的脊髓。然而，只有50%的小鼠胚胎带有特
小鼠皮肤细胞可转化为胚胎所需三种干细胞
以色列研究人员在新一期美国《细胞-干细胞》杂志上报告说，他们在动物实验中成功将皮肤细胞转化为早期胚胎所需的三种主要干细胞，即可分化为胚胎、胎盘、脐带等组织的干细胞。 研究人员说，这一成果不仅对研究胚胎和胎盘缺陷、解决某些不孕问题等具有重要意义，还意味着将来有可能在没有精子和卵子的情况下利用人类
SA处理制备远交系小鼠体细胞核移植胚胎技术
实验概要虽然体细胞克隆技术已经在不同物种的基因重编程基础研究中广泛应用，但是近十年来利用该技术成功制备胚胎的效率特别低。特别是在小鼠上，可克隆的小鼠系主要限于仔一代，如B6D2F1。最近，我们将TSA引进克隆技术中，使B6D2F1 小鼠卵丘细胞为供体细胞的核移植胚胎成功制备率提高了2-5倍。
日本用小鼠胚胎干细胞高效培育小脑神经细胞
日本理化学研究所9月13日发布新闻公报称，该所研究人员成功诱导小鼠胚胎干细胞，有选择性地分化成小脑神经细胞，且实现了较高的分化效率。 公报说，小脑皮质中层内的浦肯雅细胞是掌管精确运动和学习的主要神经细胞，在医学方面具有相当重要的作用，以往诱导胚胎干细胞有选择性地分化成浦肯雅细胞的方法
Nature：中科院团队合作获得小鼠胚胎早期时空转录图谱
在小鼠胚胎的植入后发育期间，早期外胚层中的内细胞团的后代从幼稚状态转变为多能状态。同时，形成胚层并指定细胞谱系，从而建立胚胎发生的蓝图。命运映射和谱系分析研究表明，胚胎层不同区域的细胞在原肠胚形成期间获得位置特异性细胞命运。在基本身体计划形成之前，细胞命运的区域化-其机制有助于理解胚胎编程和基于
亚太唯一突变小鼠胚胎干细胞库落户苏大
目前，英国剑桥大学威康信托桑格研究所赠送的41万株突变小鼠胚胎干细胞，越过重洋，成功落户苏州大学剑桥—苏大基因组资源中心，该中心由此成为亚太地区仅有的一个突变小鼠胚胎干细胞资源库。 突变小鼠胚胎干细胞是由桑格研究所领导的欧美联盟共同研发，全球仅有4份，其中3份分别在英国桑格研究所、德国和美国，
从小鼠到人类，胚胎模型的构建引起的伦理问题思考
·有些人认为胚胎从精卵结合之时起就具有完全道德地位，而有些人则认为胚胎仅是在发育过程中道德地位不断提高。·目前构建的胚胎模型还不是“真正”胚胎，而只是模拟胚胎发育的某些方面。只要不将人类胚胎模型植入子宫进行孕育，就不必担忧克隆问题。这些研究能够增进对人类发展和发育障碍的理解，有利于科技发展和人类生命
关于胚胎干细胞的研究进展—小鼠ES细胞的介绍
小鼠ES细胞的分离方法基本成熟，且已广泛应用于生命科学研究的各个领域。1981年Evans首次分离得到小鼠ES细胞，他以手术切除受精后2.5 d小鼠卵巢并结合激素注射干扰子宫环境，从而使胚胎延迟着床，再回收胚胎，将其体外培养于STO细胞饲养层上，结果得到了小鼠ES细胞系。Martin G R以免
Cell－Research解析小鼠原肠期胚胎胚层形成的表观遗传规律
细胞命运决定过程的调控机制是哺乳动物胚胎发育研究领域关注的重点。在哺乳动物胚胎发育过程中，具有全能性的合子会依次经过桑椹胚期、囊胚期、原肠胚期等，最终形成能够发挥完整生物学功能的个体。其中，外、中、内三个胚层形成的原肠运动时期对后续胚胎发育蓝图的构建起着至关重要的作用。 表观遗传调控在哺乳早期
STO小鼠胚胎成纤维细胞不贴壁的一些原因
细胞不贴壁的一些原因1. 胰酶消化时间把控不当：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。2. 缺少贴壁因子：血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。3