L929细胞增殖MTT比色法检测IL1的生物活性实验原理和操...

L929细胞增殖MTT比色法检测IL-1的生物活性实验原理和操作步骤【基本原理】IL-1具有刺激多种来源的成纤维细胞增殖的作用,可用于IL-1生物活性检测。目前国内外大多数实验室常用L929细胞株(小鼠成纤维细胞瘤细胞)作为检测IL-1生物活性的靶细胞或反应细胞。MTT比色法的原理是利用四甲基偶氮唑盐[3-(4.5-dimethylthiazol-2- yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用下,由淡黄色被还原成蓝紫色或蓝黑色的MTT-甲肷,形成的量与活细胞代谢率及细胞增殖程度成正相关。故通过反应细胞形成的MTT-甲肷量,即可测定IL-1对L929细胞促增殖作用程度,从而间接测定IL-1的生物活性。 【材料和试剂】 (1)已诱生的IL-1待检样品:倍比稀释成不同浓度。 (2)IL-1标准品:倍比稀释成不同浓度。 ......阅读全文

L929细胞增殖MTT比色法检测IL1的生物活性实验原理和操...

L929细胞增殖MTT比色法检测IL-1的生物活性实验原理和操作步骤【基本原理】IL-1具有刺激多种来源的成纤维细胞增殖的作用,可用于IL-1生物活性检测。目前国内外大多数实验室常用L929细胞株(小鼠成纤维细胞瘤细胞)作为检测IL-1生物活性的靶细胞或反应细胞。MTT比色法的原理是利用四甲基偶氮唑

L929细胞增殖MTT比色法检测IL1的生物活性

实验概要IL-1具有刺激多种来源的成纤维细胞增殖的作用,可用于IL-1生物活性检测。目前国内外大多数实验室常用L929细胞株(小鼠成纤维细胞瘤细胞)作为检测IL-1生物活性的靶细胞或反应细胞。本实验利用L929细胞增殖MTT比色法IL-1的生物活性进行了检测。实验原理MTT比色法的原理是利用四甲基偶

应用MTT比色法检测TNF的生物活性

实验概要TNF包括TNFα与TNFß两型,它们具有极其相似的生物学活性,在体内外可对一些肿瘤细胞或细胞系起杀伤作用,而对正常细胞则无细胞毒效应。根据这一特点,可利用TNF对敏感靶细胞的细胞毒效应,在体外检测TNF的活性水平,既可检测分泌型TNF(sTNF),也可检测膜结合型TNF(mTNF)。最常用

IL1生物学活性检测实验——小鼠胸腺细胞增殖法

白细胞介素-1(IL-1)主要是由活化的单核-巨噬细胞合成和分泌的一种细胞因子,具有活化淋巴细胞、协同刺激胸腺细胞增殖、参与抗体产生和促炎症反应等多种生物学功能。IL-1有IL-1α和IL-1β构成,结合同种受体,表现相同的生物学活性。实验方法原理IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠

细胞增殖检测:MTT实验经验总结

MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用

细胞增殖检测:MTT法

细胞增殖检测:MTT法             实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-

细胞增殖检测:MTT法

MTT法,又称MTT比色法,可以用于:检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物,是一种接受氢离子的染

小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性实验

实验试剂1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培养液与RPMI-1640完全培养液3. ConA或PHA4. IL-1标准品:倍比稀释成至少6个不同浓度值。实验设备1. 3H-TdR、β-液闪汁数仪,微量细胞收集仪2. 解剖刀、剪、单皿、研磨工具(玻璃匀浆器,不诱钢网或者毛玻璃片

MTT法细胞活性检测实验步骤

MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途:

细胞增殖检测:MTT法心得

MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。一、MTT的原理活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。二、MTT法检测细胞增殖实验的注意事项1、培养好细胞点板养细胞没

细胞因子的检测

随着免疫学理论研究的深入,发现的细胞因子日益增多,并在免疫应答的调节和效应中起着重要作用,其在体内水平的高低直接反映机体的免疫状况。细胞因子检测的方法主要分三类:①细胞生物学活性检测法。②免疫学标记技术,常用ELISA。③分子生物学方法,常用逆转录PCR检测细胞因子的mRNA转录的情况。现以生物活性

小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性

实验试剂1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培养液与RPMI-1640完全培养液3. ConA或PHA4. IL-1标准品:倍比稀释成至少6个不同浓度值。实验设备1. 3H-TdR、β-液闪汁数仪,微量细胞收集仪2. 解剖刀、剪、单皿、研磨工具(玻璃匀浆器,不诱钢网或者毛玻璃片

小鼠胸腺细胞增殖3HTdR掺入法检测IL1的生物活性

实验概要IL-1可协同有丝分裂原(如ConA或PHA)刺激的T细胞或胸腺细胞发生增殖反应,通过3H-TdR DNA掺入法,即可测定IL-1生物活性。此法是目前测定IL-1活性常用而简便的方法,其敏感度达10-50pg/ml。但本法缺乏特异性,因为IL-1亦可刺激T细胞或胸腺细胞产生一些细胞因

细胞活性检测DNA合成增殖实验

BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程

IL2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法

(一)原理白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物

细胞活性检测代谢增殖测定

MTT检测法活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲基亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标仪490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出活细胞数量。在一定细胞数范围内,吸

MTT实验原理和实验步骤

MTT原理:MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下,生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formaza

IL1的体外诱生实验

实验概要IL-1主要由活化的单核/巨噬细胞产生,具有广泛的生物学活性。IL-1包括IL-1α和IL-1β,两者分子量相近,且均能与IL-1R结合,故具有相似的生物学活性,常用的IL-1生物活性检测法对两者均适用。常用的IL-1生物活性检测法包括:小鼠胸腺细胞增殖法、L929细胞增殖法、D10G4.1

MTT比色法实验原理、步骤及注意事项

实验概要 MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT

MTT比色法实验原理、步骤及注意事项

实验概要MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT比色法,是一种检

MTT比色法实验原理、步骤及注意事项

实验概要MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT比色法,是一种检

IL1生物学活性检测

实验方法原理 IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠胸腺细胞增殖。进一步通过3H-TdR掺入法或染料摄入法判定小鼠胸腺细胞增殖量,推定IL-1的生物学活性。通过检测IL-1的生物学活性,可了解单核-巨噬细胞等的功能。实验材料 小鼠胸腺细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液L

CCK8较MTT法—测定细胞增殖/毒性实验

CCK-8较MTT法测定细胞增殖/毒性实验,步骤更简便,灵敏度更高,重复性更好第一   从基础操作方面对比CCK-8 方法MTT方法1还原后的甲臢物为水溶性,不需要溶解还原后的甲臢物位非水溶性的,需要有机溶剂溶解2实验重复性好实验重复性差3操作简便操作繁琐第二 从细胞培养方面对比细胞培养CCK-8方

MTT法检测细胞生长实验

   MTT法也就是MTT比色法,这种方法就是用来检测检测细胞存活和生长的。    这个方法中的MTT浓度为5mg/ml,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可。您在配制和保存的过程中,容器用

细胞增殖检测:CFSE原理和CFSE配制

一、原理 荧光染料CFSE, 也可称为CFDA SE(5,6- carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester) 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂,是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧

结晶紫法对TNF生物活性的检测

实验概要TNF包括TNFα与TNFß两型,它们具有极其相似的生物学活性,在体内外可对一些肿瘤细胞或细胞系起杀伤作用,而对正常细胞则无细胞毒效应。根据这一特点,可利用TNF对敏感靶细胞的细胞毒效应,在体外检测TNF的活性水平,既可检测分泌型TNF(sTNF),也可检测膜结合型TNF(mTNF)。最常用

轻松解决细胞增殖的检测方法

无论单细胞还是多细胞都是以细胞分裂的方式产生新的细胞,进行增殖,用来补充体内衰老或死亡的细胞。 细胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法。 ①试剂盒检测细胞代谢活性(基于mtt、cck-8等) mtt(噻唑蓝):通过添加四咪唑盐

细胞活力检测方法

细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标,如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件变化等。细胞活性检测方法有很多种,如台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、、ATP含量测定法、荧光染色法、比色法(MTT法)等。一、ATP含量测定法---生物发光检测有研究表明内源性三磷酸腺苷 (AT