LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像(三)

Figure 2 NIR和IR双光子激发和释放光谱。通过在同一焦平面对不同波长的Ti:Sa激光和OPO激光获取多幅图像并对扫描间的能量强度和漂白进行校正后的激发光谱。为获取红色和内在荧光团以及SHG的释放光谱,信号通过物镜,光谱仪和CCD相机检测。 (a) 自然状态下,SDS-PAGE前后的表达细胞质DsRed2 和组蛋白-2B-EGFP的HT-1080细胞.方框表明了光谱获取的区域。(b) EGFP, DsRed2, 和 Alexa Fluor 660的双光子激发光谱.实线代表了SDS-PAGE中分离的蛋白或Alexa Fluor 660,虚线代表了活的双色细胞中的。计算的1100nm对DsRed2的激发效率比760nm要高20倍。(c) 活的非固定的HT-1080双色细胞中830 nm对EGFP和1100 nm对DsRed2的同时激发。 Bars, 20 µm。 ......阅读全文

双光子显微镜简介

双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子

双光子共焦显微镜有何优点

  双光子共焦显微镜具有许多突出的优点:双光子共焦显微镜可以采用波长比较长的、在生物组织中穿透能力比较强的红外激光作为激发光源,因此可以解决生物组织中深层物质的层析成像问题。由于双光子荧光波长距离发光波长,因此双光子共焦显微镜可以实现暗场成像。双光子可以避免普通成像中的荧光漂白问题和生物细胞的光致毒

与单光子共焦显微镜相比,双光子共焦显微镜有何优点

  双光子共焦显微镜具有许多突出的优点:双光子共焦显微镜可以采用波长比较长的、在生物组织中穿透能力比较强的红外激光作为激发光源,因此可以解决生物组织中深层物质的层析成像问题。由于双光子荧光波长距离发光波长,因此双光子共焦显微镜可以实现暗场成像。双光子可以避免普通成像中的荧光漂白问题和生物细胞的光致毒

与单光子共焦显微镜相比,双光子共焦显微镜有何优点

  双光子共焦显微镜具有许多突出的优点:双光子共焦显微镜可以采用波长比较长的、在生物组织中穿透能力比较强的红外激光作为激发光源,因此可以解决生物组织中深层物质的层析成像问题。由于双光子荧光波长距离发光波长,因此双光子共焦显微镜可以实现暗场成像。双光子可以避免普通成像中的荧光漂白问题和生物细胞的光致毒

与单光子共焦显微镜相比,双光子共焦显微镜有何优点

  双光子共焦显微镜具有许多突出的优点:双光子共焦显微镜可以采用波长比较长的、在生物组织中穿透能力比较强的红外激光作为激发光源,因此可以解决生物组织中深层物质的层析成像问题。由于双光子荧光波长距离发光波长,因此双光子共焦显微镜可以实现暗场成像。双光子可以避免普通成像中的荧光漂白问题和生物细胞的光致毒

三光子显微镜揭示清醒小鼠脑中全部皮质层

  美国麻省理工学院(MIT)的Picower研究所开发的新型三光子显微镜能够提供高速、低功率的超短光脉冲,能够到达大脑内的深层目标,而不会造成功能性干扰或物理损伤。它能够高效地检测由细胞发出的荧光,并产生具有清晰分辨率和快速帧速率的图像。三光子显微镜使科学家们能够更深入地观察大脑,因为较低能量、较

Nature子刊:高速双光子显微镜可用于小鼠大脑成像

  近日,美国斯坦福大学Mark J. Schnitzer及其研究小组研发出可用于清醒小鼠大脑成像的千赫兹双光子显微镜。这一研究成果于2019年10月28日在线发表于国际学术期刊《自然—方法学》。  研究人员介绍,双光子显微镜是在散射介质中成像的主要技术,通常可提供约10–30 Hz的帧采集速率。 

光片显微镜—结合新型透明化方法,实现动物整体透明...

光片显微镜—结合新型透明化方法,实现动物整体透明化并成像通过对各种疾病的观察与研究,我们现在广泛认识到:大部分疾病,起源于身体的一部分,但最终都会影响到整体。这意味着,对于疾病的整体性研究至关重要。传统的组织病理成像的研究方法,更侧重于单个器官、组织的病理形态观察与检测,整体的病理研究需要一种能够完

双光子荧光显微镜

在一般的荧光现象中,由于激发光的光子密度低,一个荧光分子只能同时吸收一个光子,再通过辐射跃迁发射一个荧光光子,这就是单光子荧光。对于以激光为光源的荧光激发过程,则可能产生双光子甚至多光子荧光现象,这时所用的激发光源强度高,光子密度满足荧光分子同时吸收两个光子的要求。以一般的激光为激发光源的过程中,光

双光子共聚焦显微镜

双光子共聚焦显微镜是为了解决生物检测中样品染料标记的光漂白现象而提出的,因为共焦孔径光阑必须足够小以获得高分辨率的图像,而孔径小又会挡掉很大部分从样品发出的荧光,包括从焦平面发出的荧光,这样就要求激发光必须足够强以获得足够的信噪比;而高强度的激光会使荧光染料在连续扫描过程中迅速褪色(即光漂白现象),

郑炜团队在高分辨双光子显微成像技术中取得进展

  近日,中国科学院深圳先进技术研究院研究员郑炜团队在高分辨双光子显微成像技术研发中取得系列进展。  第一项研究工作与华中科技大学教授费鹏团队合作完成,开发出基于多帧重构提高双光子成像轴向分辨率的方法。与传统双光子成像相比,该方法对成像轴向分辨率和信噪比均提升超过3倍。相关研究成果以Axial re

利用双光子活体成像的方式对角膜干细胞进行观察记录

  复层扁平上皮又被称为复层鳞状上皮(Stratified squamous epithelia),通常存在于皮肤、食道以及口腔等部位的表面,会经历不断的再生过程,在此过程中终末分化的细胞从表面脱落并由具有干性的细胞进行补充。由于细胞不断丢失,复层扁平上皮必须处于一种动态平衡状态,以维持其组织结构和

新型可发光纳米探针-能实现对深层组织显微成像

  记者7月12日从上海理工大学获悉,该校科学家与暨南大学、新加坡国立大学的同行们合作,开发出一种可发光的镧系元素纳米探针,该探针可用于亚细胞结构的低功率受激发射损耗(STED)显微镜和深层组织超分辨率成像。相关成果发表在《自然·纳米技术》上。  光学显微技术在生物领域中是一个重要工具,借助这一技术

细胞与组织亚细胞分辨的透射式MALDI2质谱成像

再帕尔•阿不力孜科研团队 第61期中国医学科学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室文献整理:金波 指导教师:贺玖明   德国明斯特大学K. Dreisewerd团队在《Nature Methods》上发表了一篇题为“Transmission-mode MALDI-2 mass spect

双光子荧光显微镜的优点

双光子荧光显微镜有很多优点:1)长波长的光比短波长的光受散射影响较小容易穿透标本;2)焦平面外的荧光分子不被激发使较多的激发光可以到达焦平面,使激发光可以穿透更深的标本;3)长波长的近红外光比短波长的光对细胞毒性小;4)使用双光子显微镜观察标本的时候,只有在焦平面上才有光漂白和光毒性。所以,双光子显

多光子显微镜成像技术:多光子显微镜用于体内神经元...

多光子显微镜成像技术:多光子显微镜用于体内神经元成像的多种技术与传统的单光子宽视野荧光显微镜相比,多光子显微镜(MPM)具有光学切片和深层成像等功能,这两个优势极大地促进了研究者们对于完整活体大脑深处神经的了解与认识。2019年,Jerome Lecoq等人从大脑深处的神经元成像、大量神经元成像、高

高端显微镜的国产路

科研人员正利用双光子-STED显微镜观察样品。  “现在做生物的,都盯着《科学》《自然》,仪器只要求用最好的,眼里没有国产进口之分;做医生的,更是绝对不希望因为仪器而延误病人的诊治。可大家传统观念里都觉得,国产仪器不好用。国产要真正替代进口,面临着很大压力,这怎么破?”  浙江大学教授王平抛出的这个

光学显微镜Z重要的部件物镜的特性介绍

今天和大家谈谈光学显微镜当中zui重要的部件:物镜。为什么是zui重要且没有之一呢?因为科研工作者们关心的解析度、信噪比等与成像质量息息相关的参数都是由物镜决定的。当然,显微镜的其他部分也一样不可或缺,但是篇幅有限,即便是物镜,我们也只能浅尝辄止的谈一谈。 在生命科学研究领域,光学显微镜的使用率位列

深脑成像利器:北京大学微型化三光子显微镜问世

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/2/494575.shtm 2023年2月23日,北京大学程和平、王爱民团队在 Nature Methods 在线发表题为“Miniature three-photon microscopy maximiz

郑炜团队提出梯度光场编码的双光子快速三维成像技术

  近日,中国科学院深圳先进技术研究院研究员郑炜团队提出一种基于激发光梯度编码的快速三维成像技术,可使双光子体成像速度比传统技术提升5至10倍。  双光子显微镜具有亚微米级的成像分辨率和毫米级的成像深度,被广泛应用在神经结构和功能成像以及其他活体成像研究中。传统的双光子三维成像是将双光子激发的焦点在

程和平院士开发深脑成像的利器—微型化三光子显微镜

  2023年2月23日,北京大学程和平/王爱民团队在Nature Methods在线发表题为“Miniature three-photon microscopy maximized for scattered fluorescence collection”的文章。文中报道了重量仅为2.17克的微

“超高时空分辨微型化双光子在体显微成像系统”获进展

  在国家自然科学基金国家重大科研仪器研制专项“超高时空分辨微型化双光子在体显微成像系统”(项目编号:31327901)的支持下,北京大学分子医学研究所、信息科学技术学院、动态成像中心、生命科学学院、工学院联合中国人民解放军军事医学科学院组成跨学科团队,历经三年多的协同奋战,成功研制新一代高速高分辨

植入老鼠的“人脑”有视觉反应

  近日,美国加州大学圣地亚哥分校和波士顿大学的研究团队首次证明,植入老鼠体内的人脑类器官已经与动物皮层建立了功能性连接,并对外部感官刺激做出了反应。他们通过结合透明石墨烯微电极阵列和双光子成像的创新实验装置发现,植入的类器官对视觉刺激的反应与周围组织的反应相同。相关研究结果发表于《自然—通讯》。 

多光子显微镜成像技术:大视场多区域脑成像技术

为了了解神经回路的功能以及神经元之间的相互作用,需要对不同区域的大量神经元进行活体成像,我们这里介绍两种显微镜技术,分别针对大视场多区域成像和自由活动小鼠的活体成像。从图1可以看出用于视觉处理的神经元分布在直径约3毫米的区域——小鼠初级视觉皮层和多个较高级的视觉区域。当前的商用双光子显微镜系统通常提

超分辨率显微镜实现自由运动神经环路高分辨成像

  提到在体小动物神经成像,人们自然会联想到钙离子荧光探针局部注射或遗传钙指示剂(如Gcamp家族)结合双/三光子显微镜的经典在体成像组合。  随着基因改造技术的突飞猛进,通过病毒转染和转基因技术,在神经元内源性表达“基因编码类钙指示剂(genetically encoded calcium ind

双光子显微镜首获航天员皮肤三维图像

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/3/494940.shtm #双光子显微镜首获航天员皮肤三维图像# 【上新!航天员在轨体检新工具】近日,神舟十五号航天员乘组使用由我国自主研制的空间站双光子显微镜开展在轨验证实验任务并取得成功。空间站双光子

2.2克高速高分辨微型化双光子荧光显微镜现世

   历经3年多的协同奋战,北京大学联合中国人民解放军军事医学科学院组成跨学科团队,成功研制新一代高速高分辨微型化双光子荧光显微镜,重量仅为2.2克。该科研团队通过这一微型显微镜获取了小鼠在自由行为过程中大脑神经元和神经突触活动清晰、稳定的图像。原始论文于5月29日在线发表于《自然》杂志子刊Natu

双光子显微镜首获航天员皮肤三维图像

  近日,神舟十五号航天员乘组使用由我国自主研制的空间站双光子显微镜开展在轨验证实验任务并取得成功。空间站双光子显微镜能以亚微米级分辨率清晰呈现出航天员皮肤结构及细胞的三维分布,具备对皮肤表层进行结构、组分等无创显微成像的能力。这是目前已知的世界首次在航天飞行过程中使用双光子显微镜获取航天员皮肤表皮

法国同步三维成像技术让观察大脑无需扫描

  据美国物理学家组织网近日报道,最近,法国巴黎笛卡尔大学科学家结合数字单光子全息刺激和远程聚焦荧光功能成像两项技术,开发出一种能在光激发脑部神经元的条件下,同步观察其解剖结构和生理功能的三维成像技术,而且分辨率和准确性更高。  观察大脑在三维空间处理感觉及概念信号分两步走:一是拍摄神经结构,二是刺

新方法打破理论极限,活体进行大体积实时成像

  哺乳动物的长期亚细胞活体成像对研究天然生理过程中多种细胞间行为和细胞器功能至关重要。然而,光学异质性,组织不透明性和光毒性提出了巨大的挑战。2021年5月25日,清华大学戴琼海,俞立及范静涛共同通讯在Cell 在线发表题为”Iterative tomography with digital ad