“中澳表观组学联合中心”在京成立

免疫沉淀法浓缩蛋白质实验

免疫沉淀法             实验方法原理 通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定

日本发现植物免疫系统关键蛋白质

    日本科学家近日发现，水稻体内有一种名为“抵抗性蛋白质”的物质，是其免疫系统的关键。这一研究成果已经刊登在最新一期美国《科学》杂志网络版上。     日本奈良尖端科学技术大学院大学植物分子遗传学教授岛本功率领的研究小组，利用水稻对比研究发现，一种名为“抵抗性蛋白质”的物质一旦察觉到植株感染

免疫化学法测定个别蛋白质

散射比浊法和透射比浊法由于测定方法简便、快速而被广泛使用。许多试剂盒供应抗血清及标准蛋白质，即可建立此测定法。此技术可以测定抗原-抗体复合物（沉淀颗粒）形成的量（终点法），亦可采用测定复合物形成的速率（动力学方法，即通过散射浊度计测定抗原-抗体混合反应复合物颗粒形成的时间，即反应速率。一定条件下，反

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——图解

实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液抗体仪器、耗材电泳仪移液器脱色摇床显影仪实验步骤一、实验步骤↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓展开

应用ScanLater免疫印迹蛋白质梯估计蛋白质的分子量

优点：·简单的一套的标准品就可以满足凝胶可视、膜定位和时间分辨荧光检测 ·蛋白质都已经被生物素标记 ·可以检测待测物的分子量 ·无需混匀和加热 简介ScanLater免疫印迹蛋白质梯是ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统必不可少的一项组成。蛋白质梯最初始是应用于蛋白质分子定量，凝胶电泳的可

应用ScanLater免疫印迹蛋白质梯估计蛋白质的分子量

　　优点： 　　·简单的一套的标准品就可以满足凝胶可视、膜定位和时间分辨荧光检测  　　·蛋白质都已经被生物素标记  　　·可以检测待测物的分子量  　　·无需混匀和加热 　　简介 　　ScanLater免疫印迹蛋白质梯是ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统必不可少的

中科院Nature开源性刊物发表蛋白质研究新技术

　　来自中科院大连化学物理研究所的研究人员开发一种新型的同位素标记策略，可对6种不同的蛋白质样品进行可靠标记并进行同时定量。并证实这一策略适用于高通量检测蛋白质周转(turnover)动态。这一研究成果发表在国际著名刊物Nature旗下开源性刊物Scientific Reports上。 　　中

Westernblotting－蛋白质印迹（免疫印迹）

蛋白质免疫印迹实验组织蛋白提取

　　组织蛋白提取　　1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪（最好高温高压处理）、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、两套研磨棒（最好高温高

蛋白质免疫印迹悬浮细胞蛋白提取简介

　　1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一种蛋白酶抑制剂，剧毒）、离心机、烧杯、4×SD

方案1－用－FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀

实验材料抗 FLAGM2 单克隆抗体293 T 细胞试剂、试剂盒抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素仪器、耗材大型离心机配有检测 GFP 滤片

中科院JBC发表免疫学研究新发现

　　近日来自中科院微生物研究所的研究人员发表了题为“Tetraspanin 6 (TSPAN6) negatively regulates RIG-I-like receptors (RLRs) mediated immune signaling in a ubiquitination de

中科院《JBC》：识别免疫反应参与蛋白的新技术

　　目前，中科院生物物理研究所和剑桥大学等处的研究人员开发出一种新技术，可有助于识别免疫细胞上某些对抗击人体入侵者非常关键的蛋白质。　　当我们的身体受到外来物（如细菌和病毒）的攻击时，我们的免疫系统会精心安排一种复杂的回击策略，涉及到许多单独的部分。这一反应的一个重要组成部分，是一类称为B淋巴细胞（

中科院Nature子刊发表免疫学新文章

　　来自中科院动物研究所、大连大学附属中山医院等机构的研究人员证实，TSC1可控制巨噬细胞极化阻止炎症疾病。这一研究发现发表在9月1日的《自然通讯》（Nature Communications）杂志上。　　论文的通讯作者是中科院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室副主任赵勇（Yong Zhao

中科院Nature子刊发布免疫学新文章

　　来自中科院上海生命科学研究院的研究人员揭示出了，抗病毒天然免疫反应中调控MAVS活性的一个自抑制机制。这一重要的研究发现发布在7月17日的《自然通讯》（Nature Communications）杂志上。　　中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所的侯法建（Fajian Hou）研究员

蛋白质分析技术(WesternBlot－ELISA免疫荧光与免疫组化技术)2

2 类型（1）间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体，检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。 常用于临床血清中自身抗体的检测，以及杂交瘤上清特异性抗体的筛选。如血清中PDCD5自身抗体的检测。(2) 双抗体夹心法测抗原是检测抗原最常用的方法。只要获得针对受检抗原的特

蛋白质分析技术(ELISA、Western－Blot、免疫荧光与免疫组化技术)

一 Western Blot1 原理：将通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF膜上，然后与能特异性识别待检蛋白的抗体进行反应，洗涤去除没有结合的特异性抗体后，加入标记的、能识别特异性抗体的种属特异性抗体，反应一段时间后再次洗涤去除非特异性结合的标记抗体，加入适合标记物的检测试剂

蛋白质分析技术(WesternBlot－ELISA免疫荧光与免疫组化技术)4

四免疫组织化学技术原理：是指酶标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的成色反应，对相应的抗原进行定性、定位和定量测定的一项技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙的结合起来，借助显微镜（包括荧光显微镜、电子显微镜等）的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质（如蛋

蛋白质分析技术(Western－Blot、ELISA、免疫荧光与免疫组化技术)

1 原理：将通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF膜上，然后与能特异性识别待检蛋白的抗体进行反应，洗涤去除没有结合的特异性抗体后，加入标记的、能识别特异性抗体的种属特异性抗体，反应一段时间后再次洗涤去除非特异性结合的标记抗体，加入适合标记物的检测试剂进行显色或发光等，观察有无特

蛋白质分析技术(WesternBlot－ELISA免疫荧光与免疫组化技术)3

（一）细胞膜蛋白分子的检测原理：细胞膜表面的抗原或受体可特异地与相应的抗体或配体结合，将针对细胞表面抗原的抗体或配体用不同的荧光素标记，根据不同荧光物质的最大激发和发射波长的不同，即可准确定量每种荧光物质的强度，从而推出相应细胞表面抗原表达量1 直接法：细胞＋荧光素标记的抗CD分子的抗体→4ºC反应

免疫印迹与免疫检测实验——半干转移系统转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材半干燥转移装置滤纸实验步骤1.  制备样品，并在小型或标准尺寸的单向或双向凝胶上分离蛋白质。 2.  准备转印膜3.  拆卸凝胶夹层，除去积层胶。4.  组装转印夹层：Mylar聚酯薄膜屏蔽物3张以转移缓冲液饱和的滤纸已平衡的转印膜凝胶3张以转移缓冲液饱

蛋白质间相互作用研究方法：免疫共沉淀

相互作用在生理上的证实和探索l      通过免疫共沉淀确定结合蛋白1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3．收集上清（约30 ml）并加入3

蛋白质免疫印迹制备分离胶、积层胶

　　1）所需器材：制冰机、制胶槽、Teflon梳子、小烧杯、手套、大冰盒、去离子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl（PH值8.8）、1.0mol/L的Tris-cl（PH值6.8）、10%SDS（十二烷基磺酸钠）、10%AP（过硫酸铵）、TEMED（四甲基乙二胺）、移液枪、吸

蛋白质免疫印迹实验贴壁细胞蛋白提取

　　贴壁细胞蛋白提取（细胞蛋白含量一般约为1x10-9mg/细胞）　　1）所需器材：制冰机、细胞刮刀、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、两个大冰盒、手套、长满细胞的培养瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一种蛋白酶抑制剂，剧毒）、移液枪、吸头（最好高温

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——Western印迹法

实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaClSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床实验步骤一、操

检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术简介

　　检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术 　　自身免疫性疾病是由异常免疫反应引起的慢性退行性或炎症性疾病。不同的自身免疫性疾病对机体的影响各有不同。例如，在多发性硬化症中，自身免疫反应的侵害对象是中枢神经系统，而在克罗恩病中则是肠道。此外，同种疾病对不同个体的组织和器官的影响程度不尽相同。 　　此类

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析第一节　概述　　1960年，美国学者Yalow 和Berson 创立了放射免疫分析（Radioimmunoassay，RIA），并首先用于糖尿病人血浆中胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破，开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法

蛋白质免疫印迹实验悬浮细胞蛋白提取相关

　　悬浮细胞蛋白提取　　1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一种蛋白酶抑制剂，剧毒）、离

蛋白质分析技术(ELISA、Western－Blot、免疫荧光与免疫组化技...2

（2）间接法：细胞→3％多聚甲醛固定和渗透化→封闭→针对蛋白的特异抗体→洗涤→荧光素标记的二抗→洗涤 → 荧光显微镜观察或流式细胞计分析凋亡相关蛋白TFAR19蛋白的表达和细胞定位分析TFAR19（PDCD5）是由本研究室在国际上首先报导的一个拥有自己知识产权的人类新基因，前期的功能研究表明，它是促

南京大学，中科院PNAS提出免疫研究新思路

　　来自南京大学，中科院遗传与发育生物学研究所等处的研究人员发表了题为“BIK1 interacts with PEPRs to mediate ethylene-induced immunity”的文章，指出了乙烯和PEPR信号途径参与免疫应答级联放大的一种新机制，为深入了解乙烯诱导的免疫