日本发现植物免疫系统关键蛋白质

蛋白质免疫印迹实验

实验步骤 操作流程(1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张 (Whatman 3 MM)。(2) 将凝胶在转印缓冲液中浸泡 30m in，将转移膜、滤纸和海绵垫也在同样的缓冲液浸湿。(3) 安装转印「夹心三明治」。将凝胶放置在玻璃平板上，然后将一张浸湿的滤纸放在凝胶上，如

蛋白质免疫印迹实验

蛋白质免疫印迹实验             实验步骤 操作流程 (1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张

蛋白质免疫印迹技术

实验概要免疫印迹是利用聚丙烯酰胺凝胶电泳来检测样品或提取物中某种特定蛋白的方法。聚丙烯酰胺凝胶紧贴着膜放置，在电流的作用下蛋白质从凝胶迁移到膜上并且被固定，常用的膜是硝酸纤维素或 PVDF（聚偏乙烯氟化物）。膜是凝胶蛋白质的复制品，然后可以与抗体结合后进行染色。实验步骤1.   样品准备1)   抽

蛋白质免疫印迹实验

这是一个建立在 B urnette 实验方案基础上的实验流程，小于 80k D a 的蛋白质的转移效果很好并且结果稳定, 重复性好。应用这种膜转移方法，我们利用多克隆抗体在下面的样本中检测目的蛋白：哺乳动物细胞和细菌溶解产物、细胞培养上清、组织提取物以及组织液。虽然下列实验条件是根据我们自己的实验需

蛋白质与免疫亲和介质结合实验

仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAG

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原，可与其专一性抗体结合，再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色；可在一群转印色带中，专一性地挑出目标蛋白质，是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液：可用传统抗血清或单株抗体，其最适使用浓度，随抗体效价不同而异，以下为一般适

蛋白质与免疫亲和介质结合实验

材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE 电泳分析，测

蛋白质工程拓展免疫细胞语言

　　根据世界卫生组织统计，每年约600万人死于败血症，这些数字令人担忧。这种俗称“血液中毒”的疾病通常始于无害的感染。　　一旦触发免疫系统过度反应，自身组织就会受到攻击和损伤。过度反应最终会导致危及生命的防御系统全面崩溃。仅在德国，死于败血症的人数就超过了艾滋病、结肠癌和乳腺癌的总和！　　世界各地的

蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）（二）

二、蛋白样品制备 1.   单层贴壁细胞总蛋白的提取 （1） 倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 （2） 每瓶细胞加3 ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动1 min洗涤细胞，然后弃

蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）（三）

四、SDS－PAGE电泳 1.  清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板，另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲，再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 2.  灌胶与上样 （1）玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。（操作时要使两玻璃对齐，以免漏胶。） （2）按前面方法配10%分离

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）

实验方法原理 Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原，可与其专一性抗体结合，再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色；可在一群转印色带中，专一性地挑出目标蛋白质，是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液：可用传统抗血清或单株抗体，其最适使用浓度，随抗体效价不同而异，以下为一般适

蛋白质与免疫亲和介质结合实验

仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE

蛋白质分离和分析——免疫沉淀

实验步骤 基 本 方 案 1 用非变性去垢剂裂解细胞制成的悬液进行免疫沉淀材 料未标记或标记的细胞悬液P B S ，冰预冷非变性裂解缓冲液，冰预冷5 0 % (V A O protein A-Sepharose 填 料（Sigma， Amersham Pharmacia Biotech)保存于含 0

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）

            实验方法原理 Western免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 与Southern或Northern杂交方法类似，但We

蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）（一）

蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。实验方法底物化学发光ECL法Western印迹法图解实验方法原理Western免疫印迹（

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）

蛋白质免疫印迹（Western Blot ）    可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。实验方法原理：    Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白

免疫印迹与免疫检测实验——转移槽转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤1.  制备抗原样品，并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白，在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2.  电泳完成后，拆卸凝胶夹层，去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 min。3

日发现植物免疫系统关键蛋白质

　　日本科学家近日发现，水稻体内有一种名为“抵抗性蛋白质”的物质，是其免疫系统的关键。这一研究成果已经刊登在最新一期美国《科学》杂志网络版上。 　　日本奈良尖端科学技术大学院大学植物分子遗传学教授岛本功率领的研究小组，利用水稻对比研究发现，一种名为“抵抗性蛋白质”的物质一旦察觉到植

免疫沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理 通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质 A 和抗体形成复合物，蛋白质 A 与免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋

免疫沉淀法浓缩蛋白质实验

实验方法原理通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质 A 和抗体形成复合物，蛋白质 A 与免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋白质

免疫沉淀法浓缩蛋白质实验

免疫沉淀法             实验方法原理 通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定

日本发现植物免疫系统关键蛋白质

    日本科学家近日发现，水稻体内有一种名为“抵抗性蛋白质”的物质，是其免疫系统的关键。这一研究成果已经刊登在最新一期美国《科学》杂志网络版上。     日本奈良尖端科学技术大学院大学植物分子遗传学教授岛本功率领的研究小组，利用水稻对比研究发现，一种名为“抵抗性蛋白质”的物质一旦察觉到植株感染

蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——图解

实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液抗体仪器、耗材电泳仪移液器脱色摇床显影仪实验步骤一、实验步骤↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓展开

免疫化学法测定个别蛋白质

散射比浊法和透射比浊法由于测定方法简便、快速而被广泛使用。许多试剂盒供应抗血清及标准蛋白质，即可建立此测定法。此技术可以测定抗原-抗体复合物（沉淀颗粒）形成的量（终点法），亦可采用测定复合物形成的速率（动力学方法，即通过散射浊度计测定抗原-抗体混合反应复合物颗粒形成的时间，即反应速率。一定条件下，反

蛋白质免疫印迹组织蛋白提取简介

　　1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪（最好高温高压处理）、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、两套研磨棒（最好高温高压处理）、掌上离

应用ScanLater免疫印迹蛋白质梯估计蛋白质的分子量

　　优点： 　　·简单的一套的标准品就可以满足凝胶可视、膜定位和时间分辨荧光检测  　　·蛋白质都已经被生物素标记  　　·可以检测待测物的分子量  　　·无需混匀和加热 　　简介 　　ScanLater免疫印迹蛋白质梯是ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统必不可少的

应用ScanLater免疫印迹蛋白质梯估计蛋白质的分子量

优点：·简单的一套的标准品就可以满足凝胶可视、膜定位和时间分辨荧光检测 ·蛋白质都已经被生物素标记 ·可以检测待测物的分子量 ·无需混匀和加热 简介ScanLater免疫印迹蛋白质梯是ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统必不可少的一项组成。蛋白质梯最初始是应用于蛋白质分子定量，凝胶电泳的可

蛋白质免疫印迹悬浮细胞蛋白提取简介

　　1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一种蛋白酶抑制剂，剧毒）、离心机、烧杯、4×SD

Westernblotting－蛋白质印迹（免疫印迹）