Vero细胞在WAVE反应器中的微载体球转球放大(五)
相比搅拌罐而言,WAVE 反应器在同一个培养袋中可以有更宽的培养范围(10-100%工作体积),对于种子扩增和细胞消化的不同反应体积,都可以提供均匀有效的混合,从而实现微载体的原位消化,而无需特定的消化反应器。避免了消化前后微载体的转移,操作简单,均匀有效的混合有利于精密控制消化反应的条件,最大程度保证细胞的完整性和回收,成为微载体球转球成功放大的关键。 球转球实验 B2B #4 和#5 的结果提示,球转球进行高倍率放大也完全可行,放大倍率可以达到十倍,前提应该是让种子培养达到足够的细胞密度以保证能有足够多的细胞进入下一步培养。足够的细胞接种密度,以及细胞数和微载体表面积的比例两者共同保证了细胞的有效贴壁并快速进入生长期。而我们的实验表明,球转球后微载体表面积或者是培养体积的在小范围内的变化均不会对细胞的贴壁和生长产生太大的影响。 &nbs......阅读全文
Vero-细胞在-WAVE-反应器中的微载体球转球放大(五)
相比搅拌罐而言,WAVE 反应器在同一个培养袋中可以有更宽的培养范围(10-100%工作体积),对于种子扩增和细胞消化的不同反应体积,都可以提供均匀有效的混合,从而实现微载体的原位消化,而无需特定的消化反应器。避免了消化前后微载体的转移,操作简单,均匀有效的混合有利于精密控制消化反应的条件,最大
Vero-细胞在-WAVE-反应器中的微载体球转球放大(二)
在瓶子内进行球转球实验 在 WAVETM 反应器内细胞密度达到需要的水平时,Vero 细胞微载体培养悬浮液即被转移到另外一个透明的瓶子中并移到生物安全柜中。后面的清洗和胰酶消化过程等均在生物安全柜内进行。在微载体沉降下来之后,去除上清。剩下的微载体被转移到 500 毫升无菌透明的瓶子内
Vero-细胞在-WAVE-反应器中的微载体球转球放大(四)
B2B #5 采用第二种方式进行高倍率放大。用 3g/L 的微载体密度培养 Vero 细胞至细胞密度 3.07x106/毫升,培养体积为 3 升。用胰酶把 Vero 细胞从微载体上消化下来。取十分之一的细胞/微载体悬浮液接种到新的 1.5 升的培养体积中,微载体浓度为 6g/L。待细胞密度达到 5
Vero-细胞在-WAVE-反应器中的微载体球转球放大(一)
Vero 细胞在 WAVE 反应器中的微载体球转球放大 陆丽芳,Christain Kaisermayer, 姚钰舜,隋礼丽通用电气医疗集团生命科学部,Fast Trak研发中心,上海 概要 Vero 细胞能被广泛应用于疫苗的生产。Vero 细胞的培养技术能否成功放大对于该技术能否大
Vero-细胞在-WAVE-反应器中的微载体球转球放大(三)
图 3 和图 4 显示的是球转球前后 Vero 细胞在微载体上的生长情况,分别有接种前第一、第三和第五天细胞的形态。图 4 的上面三张小图显示了球转球实验 B2B #3 之前来自细胞工厂种子培养的细胞生长形态。这是典型的 Vero 细胞种子培养的生长情况。通常 90%以上的 Vero细胞会在
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(六)
Vero细胞在转瓶 (Spinner Flask)中无血清条件下的微载体培养 Vero细胞也可以在转瓶中进行微载体培养。如图 14 所示,在无血清条件下,WAVE 和转瓶这两种培养系统中可以获得基本相同的最大细胞密度。相比 Cytodex3,Cytodex 1 具有更大的表面积,
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(一)
摘要 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的培养。然而,用于细胞治疗和疫苗生产的多种细胞为贴壁依赖型的,需要一个可贴附的生长表面。在本研究中,Cytodex 微载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以扩增 Madine-Darby Canine Kidney
小“微球”大本领:微球在制剂研究中的应用
制剂的一池春水正悄然被“微球”这种技术吹皱。即便是多种多样的领域,小小的“微球”都会帮助研究者获得更好的效果——那些需要缓慢释放或是维持活性的成分,可以通过制备成微球的方式来达到预期目标——例如医学上已有药物的剂型创新,又或是农药与化肥的用法改革。相比单纯地开发新药或新化合物,创新制剂的优势非常明显
中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(一)
生命科学和生物技术的日新月异对疫苗的发展提供了新的契机:疫苗快速规模化生产、质量标准不断提高以及新技术的开发应用成为行业的技术发展趋势。 新型中空纤维膜过滤技术具有温和低剪切力、容尘量高、操作灵活、寿命长成本低、易于放大等优点,解决了病毒颗粒浓缩时易堵膜和对剪切力敏感易聚集两大技术难题,提供
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(五)
MDCK细胞的生长和放大(2% FBS) 为了研究在 Cellbag 生物反应器中 MDCK细胞扩增的可放大性,在两种不同大小的袋子之间比较最大细胞密度和细胞生长速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培养体积采用最大工作体积的40%(即Cellbag-1
WAVETM-生物反应器中的-Cytodex™-微载体细胞培养工艺(二)
用于MDCK和 Vero细胞的生物反应器 WAVE Bioreactor 系统由一个带有一次性塑料细胞培养袋的摇动平台组成,配备CO2 气体混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD™控制塔用于控制pH、温度、氧气和混合。MDCK细胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50
潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JE..
潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JEV)疫苗领域的应用背景介绍 日本脑炎病毒(JEV)于1934年首次从一例致命的人类病例的大脑中分离出来。虽然有症状的日本脑炎很少见,但病死率可高达30%。在那些幸存下来的人当中,30-50%遭受永久性的智力、行为或神经问题。东南亚和西太平洋地
纳米微球在平板显示领域的作用
纳米微球在材料界发挥着各种各样的关键作用,在平板显示领域,粒径高度均一的微球可作为间隔物支撑在充满液晶的两块玻璃板之间,用于控制液晶盒的厚度; 导电金球和镍球是连接芯片和面板的关键材料,是各项异性导电膜和导电胶的重要组成部分;光扩散微球具有特殊光学性能,可将电光源转化成面光源的功能,大幅提高LED发
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(二)
01 「 多肽分离纯化色谱填料的选择 」一个理想的多肽药物分离纯化色谱填料必须满足以下特性:(a)高选择性,高分离度;(b)柱效高,分辨率高;(c)载量大;单位体积填料处理多肽样品的能力大(d)化学性能稳定,适用pH范围宽(1-14);可在线清洗, 耐脏性强,使用寿命长;(e)机械强度大,反压低
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(三)
「 色谱填料孔径对多肽分离纯化的影响 」 除了体积排阻色谱外,其它色谱分离机理都离不开样品与色谱填料表面的作用。 色谱填料孔径大小、分布及比表面积对多肽分离性能也有重大的影响,对于分子量小于1000的多肽样品,一般选择孔径在100Å 以下的就可以。 对于大多数分离模式来说有效的比表面积越大,载量越大
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(一)
由于多肽药物结构复杂、稳定性差、浓度低且目标分子与杂质的结构相类似,有的只有一个氨基酸的差别,因此多肽药物的分离纯化一直是多肽药物生产过程中最具挑战性的一部分,多肽分离纯化也主要依赖于高性能的微球制备色谱填料,其具有分离效果好、分辨率高、重复性好、回收率高等优点,是目前多肽药物的主要分离纯化方法。无
荧光微球分析技术及荧光微球吞噬实验的操作流程
荧光 微球分析技术属于化学材料发展结果,可用于细胞表面抗原的检测、退行性神经病变示踪物、吞噬功能的检测、血流分析、敏感性诊断试剂等,本文介绍了荧光微球分析技术以及荧光微球吞噬实验的操作步骤。荧光微球分析 技术简介荧光微球分析技术是近年来化学材料科学活跃发展 的产物,各种大小(0.2~10μm)可产生
磁性壳聚糖微球
天然高分子磁性微球的研究是目前的热点课题, 由于微球表面天然高分子的分子结构具有可设计性, 磁性微球又具有靶向性, 引起了世界科学工作者的极大兴趣, 已成为21世纪生命科学和材料学等领域的研究热点。近年来, 国外学者发表了许多有关天然高分子磁性微球的制备和应用方面的研究论文, 并申请了不少Z
微球介绍及其在各个行业的应用(二)
在血液净化领域:微球可以替代肾脏用来去除血液有毒物质,治疗和延长病人寿命。微球是制造人工肾的关键材料。 在计量领域:粒径高度均一的微球可以作为标准颗粒用于精确测量常规尺子无法计量的纳米尺寸的物质,标准颗粒作为计量工具也可用于矫正精密计量仪器。 在医疗诊断领域:功能化微球如磁性微球,多色荧光编码微球可
微球介绍及其在各个行业的应用(一)
一、 什么是微球? 微球是直径在纳米和微米尺度范围的球型粒子。球形物体是自然界存在最稳定的物质形态,它是三维几何空间理想的对称体,也是单位体积中所有立体形态中面积最小的。自然界大到星球如地球,小到篮球,乒乓球,玻璃珠等都是球体。 地球直径是1.28万千米,而篮球直径是0.25米,1纳米等于十
磁性微球的表面改性
磁性微球是有机高分子和无机磁性物质的复合体,它同时兼具有机高分子微球的诸多表面功能性和磁性无机物质的磁响应性。我们要利用其表面功能性,就有必要使磁性微球表面带上我们所希望的功能基,以提高和扩大其应用范围。免疫磁性微球(Immunomagnetic Microspheres, IMMS )是表面结
一次性使用固定床生物反应器与微载体搅拌罐的对比
rVSV-ZEBOV疫苗无血清生产:一次性使用固定床生物反应器 vs 微载体搅拌罐摘要 埃博拉病毒病(EVD)是一种致命性疾病,近年来偶发于非洲大陆,并导致严重的疫情。rVSV-ZEBOV是一种重组水泡口炎病毒结构,其中的天然病毒糖蛋白替换为埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被认为是预防这种高传染
细胞球的概述
细胞 英文名:CELL 在文章中简称C。细胞并没有统一的定义,近年来比较普遍的提法是:细胞是生命活动的基本单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物;高等植物与高等动物则是多细胞生物。
ATS全自动冻干微球生产系统:开启微球生产新时代
在当今快速发展的科技浪潮中,微球作为一种关键的材料,在众多领域都有着不可或缺的作用。从体外诊断(IVD)到生物制品、药物制剂,再到化妆品行业,微球的应用范围不断拓展,对生产技术的要求也越来越高。 在传统生产过程中,微球制备面临诸多挑战 ■ 滴珠慢 → 生产效率低,难以大规模应用。 ■ 溶液
生物反应器在病毒载体生产中的应用
摘要scale-X 生物反应器是一种新型固定床系统,可用于贴壁和悬浮细胞系的培养。设备单元占地小,而具有相当大的表面积,从而可获得极高细胞密度。本研究比较了在scale-X hydro生物反应器和标准微载体培养体系中进行的贴壁Vero细胞培养。两种系统可获得相似的单位面积细胞浓度。随后,
荧光微球(Fluorescent-microsphere)介绍
何为荧光微球(Fluorescent microsphere)? HG-98免疫荧光分析仪除了检测带有荧光素的试剂外,还常常用于检测带有荧光微球的试剂。何为荧光微球?荧光微球: 荧光微球通常是指形状为球形,直径在几纳米至几十微米之间,微球表面或内部负载有荧光物质,在受到一定的能量激发时能够发出荧
关于免疫层析用微球
“微球粒径怎么选?”“微球沉淀了怎么办?”“微球偶联采用两步法进行?” ……承蒙大家的关照,选择微球作为标记材料来开发免疫层析产品。今天,小为&小度特意为大家精选了14个在实操过程中,最常见、最具代表性的问题,由于篇幅问题,本次先上7个问答,来看看里面是不是也有你遇到的问题!Q1:在免疫层析实验中,
炭微球的制备方法(三)
.水热合成法 水热合成法是使用密闭压力容器,一般以水为溶剂,在一定压力和温度下,在液相中通过化学反应进斤合成。采用水热法制备炭微球的原料一般为葡萄糖、淀粉、蔗糖和纤维素等。Wang等以纤维素为原料,400℃水热处理6h,可制备出粒径在几微米的炭微球。Yi等以葡萄糖为碳源,160℃水热处理6h得到胶体
高度均匀的氨基酚醛树脂微/纳米球和碳球合成
微/纳米球在分析化学、药物传输、生物医疗、胶体催化和光子晶体等领域具有广泛的应用。但是目前制备尺寸均匀的胶体球需借助模板或表面活性剂等合成方法,还存在工艺路线复杂等劣势。 最近,中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室徐国宝课题组在微/纳米研究中取得新进展,首次报道了利用简易无模板