潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JE..
潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JEV)疫苗领域的应用背景介绍 日本脑炎病毒（JEV）于1934年首次从一例致命的人类病例的大脑中分离出来。虽然有症状的日本脑炎很少见，但病死率可高达30%。在那些幸存下来的人当中，30-50%遭受永久性的智力、行为或神经问题。东南亚和西太平洋地区有30多亿人可能受到JEV感染，因此接种疫苗是最佳预防措施。 日本脑炎疫苗的开发始于20世纪40年代福尔马林灭活小鼠脑源性疫苗。尽管在诱导保护性免疫应答方面有效，但最后一批小鼠源疫苗已于2011年5月用完，因为当今国际乙脑疫苗开发标准不再允许这种生产方法。 在这篇白皮书中，我们描述了使用填充床细胞培养系统开发日本脑炎疫苗的过程。我们提供了一种具有成本效益的生物处理解决方案和一种适用于替代小鼠脑源性疫苗的制造工艺。 概述 使用含有胎牛血清的MEM培养基,将VERO细胞接种在充满片状载体（BioNOCⅡ）的500mL潮汐式生物反应器细胞......阅读全文
潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JE..
潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JEV)疫苗领域的应用背景介绍 日本脑炎病毒（JEV）于1934年首次从一例致命的人类病例的大脑中分离出来。虽然有症状的日本脑炎很少见，但病死率可高达30%。在那些幸存下来的人当中，30-50%遭受永久性的智力、行为或神经问题。东南亚和西太平洋地
Vero－细胞在－WAVE－反应器中的微载体球转球放大（二）
在瓶子内进行球转球实验 在 WAVETM 反应器内细胞密度达到需要的水平时，Vero 细胞微载体培养悬浮液即被转移到另外一个透明的瓶子中并移到生物安全柜中。后面的清洗和胰酶消化过程等均在生物安全柜内进行。在微载体沉降下来之后，去除上清。剩下的微载体被转移到 500 毫升无菌透明的瓶子内
Vero－细胞在－WAVE－反应器中的微载体球转球放大（四）
B2B #5 采用第二种方式进行高倍率放大。用 3g/L 的微载体密度培养 Vero 细胞至细胞密度 3.07x106/毫升,培养体积为 3 升。用胰酶把 Vero 细胞从微载体上消化下来。取十分之一的细胞/微载体悬浮液接种到新的 1.5 升的培养体积中，微载体浓度为 6g/L。待细胞密度达到 5
Vero－细胞在－WAVE－反应器中的微载体球转球放大（五）
相比搅拌罐而言，WAVE 反应器在同一个培养袋中可以有更宽的培养范围（10-100%工作体积），对于种子扩增和细胞消化的不同反应体积，都可以提供均匀有效的混合，从而实现微载体的原位消化，而无需特定的消化反应器。避免了消化前后微载体的转移，操作简单，均匀有效的混合有利于精密控制消化反应的条件，最大
Vero－细胞在－WAVE－反应器中的微载体球转球放大（一）
Vero 细胞在 WAVE 反应器中的微载体球转球放大 陆丽芳，Christain Kaisermayer, 姚钰舜，隋礼丽通用电气医疗集团生命科学部，Fast Trak研发中心，上海 概要 Vero 细胞能被广泛应用于疫苗的生产。Vero 细胞的培养技术能否成功放大对于该技术能否大
Vero－细胞在－WAVE－反应器中的微载体球转球放大（三）
图 3 和图 4 显示的是球转球前后 Vero 细胞在微载体上的生长情况，分别有接种前第一、第三和第五天细胞的形态。图 4 的上面三张小图显示了球转球实验 B2B #3 之前来自细胞工厂种子培养的细胞生长形态。这是典型的 Vero 细胞种子培养的生长情况。通常 90%以上的 Vero细胞会在
生物反应器在病毒载体生产中的应用
摘要scale-X 生物反应器是一种新型固定床系统，可用于贴壁和悬浮细胞系的培养。设备单元占地小，而具有相当大的表面积，从而可获得极高细胞密度。本研究比较了在scale-X hydro生物反应器和标准微载体培养体系中进行的贴壁Vero细胞培养。两种系统可获得相似的单位面积细胞浓度。随后，
一次性使用固定床生物反应器与微载体搅拌罐的对比
rVSV-ZEBOV疫苗无血清生产：一次性使用固定床生物反应器 vs 微载体搅拌罐摘要 埃博拉病毒病(EVD)是一种致命性疾病，近年来偶发于非洲大陆，并导致严重的疫情。rVSV-ZEBOV是一种重组水泡口炎病毒结构，其中的天然病毒糖蛋白替换为埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被认为是预防这种高传染
scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...1
我们之前在Pall iCELLis®固定床生物反应器中，以小规模和商品化规模，进行了病毒载体（慢病毒、腺病毒以及腺相关病毒）的生产。最近，一家名为Univercells的比利时公司推出了一种新型固定床生物反应器，其具有相同的细胞生长表面基质材料，但固定床结构与iCELLis生物反应器所使用的结构
scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...2
细胞分布 我们之前比较了iCELLis Nano生物反应器高压缩固定床（4m2）和低压缩固定床（2.67m2）中的细胞分布，发现在低压缩中，细胞分布更加均衡。在高压缩固定床中，细胞分布有较大的差异，取决于计数的细胞来自哪一层（相比顶部，底部的细胞量要高3到4倍）。尽管在低压缩固定床中，差异性较
讨论潮式生物反应器对贴壁细胞培养的线性放大性
背景介绍十年前一次性生物反应器首次引入商业生产后，生物制备工艺业已将其归纳为cGMP标准。现有的搅拌式反应器只能支持悬浮细胞培养，而VaccixCell的TideMotion®潮汐式生物反应器CelCradleTM（500ml）和TideCell®(2升-500升)，是目前市面上仅有的少数可用于大规
潮式生物反应器在疫苗生产的应用
疫苗生产过程优化旨在大流行和新出现的疾病发生时，短时间内满足疫苗的需求。Tide Motion®潮式生物反应器在经济性、易生产性、更高的过程控制和提供更高的病毒滴度方面提供了替代传统培养系统的绝佳选择。以下选取了包括动物疫苗与人疫苗在内的六种疫苗培养数据，可以直观看到Tide Motion®生物反应
如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫...1
如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫苗生产平台摘要：病毒疫苗生产日益增加的重要性，推动了细胞高密度培养生产工艺的发展。传统的细胞贴壁培养工艺有一定的物理局限性，如较大的设备占地、时间和较多的劳动力。我们通过新型一次性scale-Xcarbo生物反应器建立的病毒疫苗生产系统，解决了这种限制。
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（一）
摘要 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的培养。然而，用于细胞治疗和疫苗生产的多种细胞为贴壁依赖型的，需要一个可贴附的生长表面。在本研究中，Cytodex 微载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以扩增 Madine-Darby Canine Kidney
用生物反应器生产物质有何好处
法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来，生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比，我国动物细胞生物反应器方面的技术研究和装备严重滞后，国内用于动物细胞工业化大规模培养生产的人用和兽用疫苗生产技术正处于从转瓶培养向生物反应器悬浮培养技术
利用生物反应器来生产人类所需要的某些物质有哪些好处
缩短时间，例如生产人参素，人参要很久才长大，用机器既可以大量生产，又可以缩短时间，可以解决以前市场的供不应求的局面。 法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来，生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比，我国动物细胞生物反应器方面的技
病毒包装技术——病毒与非病毒载体
基于转化医学的研究理念，锐赛知道，每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究，整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中，在于各个临床医师的整体项目合作中，探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路，一般实验方向
固相补体结合反应（以固相反向补反检测脑炎病毒为例）
1、材料与试剂 （1）pH7.2巴比妥缓冲液 氯化钠 85.00g 巴比妥 5.75g 巴比妥钠 3.75g
重组腺相关病毒载体的生产实验
瞬时转染 293 细胞制备无腺病毒重组腺相关病毒载体实验材料293组织培养细胞系pSub201质粒pXX2质粒pXX6质粒试剂、试剂盒完全DMEM 10%FBS培养基完全IMDM 10%FBS培养基CaCl2纯DMEM 2%FBS 培养基干冰 乙醇浴硫酸铵饱和硫酸铵乙醇PBS仪器、耗材组织培养板—次
封国生：以医联体为载体－推进分级诊疗
去年8月的全国卫生与健康大会上，习近平总书记强调了全民健康的重要性，此后的中央政治局会议上又审议通过了《“健康中国2030”规划纲要》，确立了“以促进健康为中心”的大健康观、大卫生观，为中国未来十几年医疗健康提供了抓手。今年10月初李克强总理提出，“今年10月底前，全国所有三级公立医院都要启动医
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（二）
用于MDCK和 Vero细胞的生物反应器 WAVE Bioreactor 系统由一个带有一次性塑料细胞培养袋的摇动平台组成，配备CO2 气体混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD™控制塔用于控制pH、温度、氧气和混合。MDCK细胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50
羊是日本脑炎病毒新的潜在扩增宿主
近日，中国农业科学院上海兽医研究所猪传染病风险预警与阻断技术团队揭示了羊作为潜在扩增宿主，在日本脑炎病毒传播循环中扮演重要角色。相关研究成果发表在《科学进展（Science Advances）》上。 日本脑炎病毒是一种由蚊子传播的人兽共患病毒，目前的研究普遍认为，该病毒在自然界主要通过“蚊-猪
青岛市获全省首个人用疫苗国家药物临床研究批件
日前，由青岛市恒业生物技术有限公司历时五年研制的纯化乙型脑炎灭活疫苗获得国家食品药品监督管理局颁发的《药物临床研究批件》，成为山东省首个获得人用疫苗临床研究批件的产品，标志着青岛市人用疫苗研发及产业化水平达到一个新高度。 流行性乙型脑炎 (简称乙脑) 是一种病死率和致残率很高的人畜共患
以人鼠细胞杂交为例介绍细胞融合技术
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融合细
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（六）
Vero细胞在转瓶 （Spinner Flask)中无血清条件下的微载体培养 Vero细胞也可以在转瓶中进行微载体培养。如图 14 所示，在无血清条件下，WAVE 和转瓶这两种培养系统中可以获得基本相同的最大细胞密度。相比 Cytodex3，Cytodex 1 具有更大的表面积，
病毒包装技术——腺病毒载体的制备
1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄
奇妙！以精子为载体，运输药物治疗妇科疾病
抗癌药物如何精确达到肿瘤组织，以便提高药效、降低副作用？这一直是科学家们试图解决、优化的难题之一。药物递送存在很多问题，例如药物会被体液稀释或者被其他器官吸收、药物难以渗透进入癌组织等等。所以，我们需要找到更好的方式。 近日，来自于德国综合纳米科学研究院的Mariana Medina-Sánc
三维潮汐式生物反应器于间充质干细胞的应用
前 言 未来的细胞治疗需要大量的间充质干细胞(MSCs)，每个剂量从1000万到2亿多个细胞不等。当需要超过5000万个细胞的大剂量使用时，传统的平板培养是不切实际的。而利用生物反应器并结合线性放大、过程控制和自动化，是解决这一需求的主要方法。然而许多生物反应器在MSCs培养方面都面临技术难题，比
无血清细胞培养基是怎么出现的？
无血清细胞培养基，顾名思义，就是培养基中没有添加血清，在使用时也不需要添加血清或血清替代物就可直接用于细胞培养的培养基。有人说，DMEM、MEM、DMEM/F12、1640、，难道不是无血清培养基吗？它们里面也没有添加血清啊？这就有点抬杠了。尽管它们没有添加血清，但它们不加血清细胞也不长啊！那无血清
如何将病毒载体生产从塑料器皿向固定床生物反应器转变
早期到晚期临床开发中的基因和修饰细胞治疗（例如，嵌合抗原受体[CAR] T-细胞治疗）在多种疾病的治疗以及潜在治愈方面显示出了良好的前景。这类新一代药物中的多个产品已经获得了审批并开始进入市场。尽管有大量候选药物的管线开始进入临床试验阶段，但其仍面临着可能的生产瓶颈 – 病毒载体生产 – 其可能延迟