干消化法与湿消化法的优缺点

1.湿消化法:指在适量的食品样品中,加入氧化性的强酸,然后在一定温度条件下反应,破坏食品中的有机物,使待测的无机成分释放出来,形成不挥发的无机化合物的方法。 优点:有机物分解速度快,加热温度较干灰化法低,可减少待测成分的挥发损失。 缺点:试剂用量大,有时空白值比较高,消化过程中会产生大量有害气体。 2.干灰化法:食品样品放在坩埚中,先在电炉上加热使样品脱水、炭化,再置于500-600℃的高温炉中灼烧灰化。使样品中的有机物氧化分解成二氧化碳、水和其他气体而挥发,留下无机物供测定。 优点:能处理较多的样品,提高检出率;不加试剂,空白值较低;适用范围广,操作简单。 缺点:灰化时间长、敞口高温导致被测成分挥发(通常550~600℃4h);坩埚对被测成分的吸留致使某些成分的回收率低。......阅读全文

肿瘤细胞原代培养实验——酶消化法

实验方法原理本法是利用成纤维细胞对胶原酶较为敏感的特点,通过消化进行选择。可用0.5mg/ml的胶原酶消化处理,边消化边在倒置显微镜下窥视,当发现成纤维细胞被除掉后,即终止消化;用Hanks洗涤处理一次后,更换新培养液,继续培养,可获纯净肿瘤细胞。如成纤维细胞未被除净,可再次重复。实验材料组织试剂、

酶法组织消化技术:从粗制的胶原酶到高纯度消化产品一

酶法组织消化中常用的胶原酶(Collagenase),能特异性地降解胞外胶原蛋白,使胶原蛋白和纤维粘连蛋白的网状结构解离,而不损坏细胞表面结构的完整性。由于细胞外基质的成分复杂,除胶原蛋白外,还含有弹性蛋白,糖蛋白等其他大分子结构。而且不同组织类型,不同物种来源,不同年龄的组织中胞外基质组份不同。所

酶法组织消化技术:从粗制的胶原酶到高纯度消化产品二

罗氏高纯度研究级别酶混合物Liberase Research Grade Enzyme BlendsLiberase Research Grade Enzyme Blends包含了一系列酶混合物,它们由不同比例的中性蛋白酶(非梭菌蛋白酶)和高纯度Collagenase I + Collage

酶消化法从Wharton胶中分离干细胞

试剂和材料:1. 培养基:完全LG-DMEM:含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM,添加10%热灭活胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;2. PBSA;3. 胰蛋白酶,2.5%;4. 胶原酶A,0.1%用PBSA配制;5. 培养瓶;6. 圆锥形离心管,50ml;7. 剪刀

奶粉-钙测定-样品免消化/火焰原子吸收法

1适用范围本方法适用于奶粉中钙的测定。2原理用1.0%盐酸溶液溶解样品,以La3+作基体改进剂,直接用空气—乙炔火焰原子吸收法测定。3试剂铼溶液;钙标准贮备液(500g/mL);钙标准使用液(10g/mL)。4仪器原子吸收分光光度计;钙元素空心阴极灯。5操作步骤准确称取奶粉0.1g于50ml烧杯

消化炉——凯氏定氮法的最佳保证

消化炉,顾名思义,是用来消化物体的,在经典凯氏定氮仪中经常会使用到。如今,市面上的消化炉,可以分为两类:分路数显消化炉和梯度液晶消化炉。其中梯度液晶消化炉是采用温度梯度定时控制,弥补了不能定温定时控制的不足。浙江托普的KDN-20C消化炉这款仪器,可任意设定温度与时间,真正实现了无人看守自动消化的目

组织的分离实验_EDTA-消化分离法

实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作

消化法细胞传代培养的操作步骤

我们实验室是首先吸去旧培养基,加入约2ml胰蛋白酶洗一遍,吸去胰酶,再加入约1ml胰酶,消化2-3分钟(37度),吸去胰酶加入新鲜培养基越4ml,对细胞进行吹打直至打散,此时可以吸去部分细胞悬液,再补充至4ml,就OK

土壤样品的前处理全量分析法之湿法消化法

湿法消化法又称湿法氧化。它是将土壤样品与一种或两种以上的强酸(如硫酸、硝酸、高氯酸等)共同加热浓缩至一定体积,使有机物分解成CO2和H20除去。为了加快氧化速度,可加入过氧化氢、高锰酸钾、过硫酸钾和五氧化二钒等氧化剂和催化剂。该法具体操作如下:准确称取0.5 g(准确到0.1 mg,以下都与此相同)

常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与...

常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与传代培养法 1)初代消化培养法: 1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液

干、湿灰化法样品前处理归纳总结

  【样品前处理要求】   1.样品是否要预处理,如何进行预处理,采样何种方法,应根据样品的性状、检验的要求和所用分析仪器的性能第方面加以考虑。   2.应尽量不用或少使用预处理,以便减少操作步骤,加快分析速度,也可减少预处理过程中带来的不利影响,如引入污染、待测物损失等。   3.分解

干、湿灰化法样品前处理归纳总结!

【样品前处理要求】  1.样品是否要预处理,如何进行预处理,采样何种方法,应根据样品的性状、检验的要求和所用分析仪器的性能第方面加以考虑。  2.应尽量不用或少使用预处理,以便减少操作步骤,加快分析速度,也可减少预处理过程中带来的不利影响,如引入污染、待测物损失等。  3.分解法处理样品时,分解必须

传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法

一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的

人滑膜细胞原代培养实验_酶消化法

人滑膜细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于相应细胞生理、形态学研究;(3)用于相关疾病研究。实验方法原理将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料滑膜组织试剂、试剂盒Ⅰ型胶原酶胎牛血清生理盐水

人滑膜细胞原代培养实验_酶消化法

人滑膜细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于相应细胞生理、形态学研究;(3)用于相关疾病研究。实验方法原理将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料滑膜组织试剂、试剂盒Ⅰ型胶原酶胎牛血清生理盐水

食品检测中硝酸一高氯酸消化法

此法可先加硝酸进行消化,待大量的有机物分解后,再加入高氯酸,或者以硝酸高氯酸混合液先将样品浸泡过夜,或小火加热待大量泡沫消失后,再提高消化温度,直至完全消化为止。此法氧化能力强,反应速度快,炭化过程不明显;消化温度较低,挥发损失少。但由于这两种酸受热都易挥发,故当温度过高、时间过长时,容易烧干,并可

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

小鼠肝细胞原代培养实验——胰酶消化法

小鼠肝细胞原代培养可用于:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS

数显消化炉的消化步骤

 样品的消化步骤  称取经粉碎通过40~60目/寸的试样0.3~1g,无损地放入已洗净烘干的消化管内,加水、催化剂和10mL硫酸。  1、将消化管分别放入各个消化架的各个孔内,然后置于消化器上,放上已装好密封圈的排污管。  2、打开抽气三通进水(自来水),使抽气三通处于吸气状态。  3、再接通电源,

数显消化炉的消化步骤

  样品的消化步骤  称取经粉碎通过40~60目/寸的试样0.3~1g,无损地放入已洗净烘干的消化管内,加水、催化剂和10mL硫酸。  1、将消化管分别放入各个消化架的各个孔内,然后置于消化器上,放上已装好密封圈的排污管。  2、打开抽气三通进水(自来水),使抽气三通处于吸气状态。  3、再接通电源

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1.  选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

大鼠肝星状细胞原代培养实验_胰酶消化法

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM酶消化液

组织的分离实验_胶原酶消化分离法

实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性,但胶原酶对细胞间质有好的消化作用,可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害,效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验

胶原酶消化法—培养脐带间充质干细胞

人脐带间充质干细胞具有高度分化潜能,基因稳定、不易突变,不会引起肿瘤;无需配型、无排异,广泛应用于疾病治疗及抗衰老研究。目前,在美容行业及针对亚健康群体的应用,也越来越引人注目。脐带间充质干细胞脐带是由包膜、华通氏胶、脐静脉、脐动脉脐构成。脐带间充质干细胞存在于华通氏胶中。由于存在数量少,用胶原酶消

人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法

人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法

实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后,可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管,将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管,用无血清DMEM洗,室温250g离心5min。(d)倒掉上清液,将离

SPA的提取、纯化与鉴定(煮沸提取法和溶菌酶消化法)

(一) SPA的提取SPA提取的方法很多,包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下:1.煮沸提取法⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂培养基上,37℃培养20h~24h。⑵ 以 0.15mol/L pH5.9PB液将菌苔洗下,配成10%(V/V)的悬液。⑶

智能消化炉

  炉内温度连续可调,控温精度高,控温稳定。铝锭一体加热,温差小,样品消化均匀。控制面板与炉体散热隔离,减少炉体高温辐射对控制系统的影响。过热保护:温度超过500℃时自动切断加热电源并报警。限温保护:可设置温度上限,若实际温度超过上限温度,仪器将自动报警并切断加热电源,防止控温系统失灵后温度不断上升