原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;2.甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;3.甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;染色步骤:1.用Hanks液漂洗盖玻片3次;2.用甲醛钙固定液固定20min;3.用蒸馏水漂洗盖玻片3次;4.用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;5.用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;6.用70%乙醇漂洗盖片3次;7.用甘油明胶封片后观察;结果:原代细胞含脂类的区域呈橘......阅读全文

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

实验方法原理苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。实验材料细胞样品试剂

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

            实验方法原理 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法的染色步骤

1.用Hanks液漂洗盖玻片3次;2.用甲醛钙固定液固定20min;3.用蒸馏水漂洗盖玻片3次;4.用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;5.用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;6.用70%乙醇漂洗盖片3次;7.用甘油明胶封片后观察;

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法配制试剂

配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;2.甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;3.甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法方法的原理

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

原代贴壁细胞吉姆萨染色法

原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Sorense

原代贴壁细胞吉姆萨染色法

原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Soreen缓

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

原代细胞骨架的染色方法!

  原代细胞骨架的染色方法!   一、微丝的显示方法步骤:   1、用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;   2、用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;   3、用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min;   4、PBS漂洗3次;   5、用罗丹明(

原代细胞骨架的染色方法

  一、微丝的显示方法步骤:   1、用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;   2、用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;   3、用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min;   4、PBS漂洗3次;   5、用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽

原代细胞骨架的染色方法

微丝的显示方法步骤:1.    用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;2.    用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;3.    用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min;4.    PBS漂洗3次;5.    用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phal

原代细胞骨架的染色方法!

一、微丝的显示方法步骤:1、用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;2、用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;3、用0.5%的PBS处理3次,每次10min;4、PBS漂洗3次;5、用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1:10)室温中反应15min;

原代细胞骨架的染色方法

微丝的显示方法步骤:      1.  用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;      2.  用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min;      3.  用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min;      4.  PBS漂洗3次;      5.  用罗丹明(rh

原代细胞骨架的染色方法

微丝的显示方法步骤:1. 用液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s;2. 用2%的甲醛/液固定原代细胞3min;3. 用0.5%的三硝基甲苯/处理3次,每次10min;4. 漂洗3次;5. 用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1:10)室温中反应15min;6.

活细胞的脂类染色的操作与应用

脂类是脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)的统称。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质,脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。在病理检验中,脂类染色法最常用于证明脂肪

苏丹黑脂类染色

骨髓涂片中细胞的脂类被染成黑色颗粒,分布于胞浆中。原始粒细胞一般呈阴性,早幼粒以下各阶段细胞为阳性,且随细胞的成熟,而阳性程度逐渐加强。原始单核细胞常为阴性,幼单及单核细胞呈阳性反应,但颗粒细小,呈弥散分布。淋巴细胞、红细胞、浆细胞及巨核细胞系列,均呈阴性反应。【临床意义】苏丹黑脂类和过氧化物酶染色

色素类染色实验_脂褐素染色

实验方法原理脂褐素是一种衰老或破坏的线粒体和内质网等细胞器结构经过溶酶体消化未完的残余物,多见于老年入或患慢性消耗性疾病患者的组织细胞,常用 Schmorl 反应方法染色。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水铁氰化钾三氯化铁中性红乙酸仪器、耗材滴管玻片实验步骤试剂配制三氯化铁

黑素细胞的Dopa染色法鉴定方法介绍

  黑色素的合成是以酪氨酸为底物,在酪氨酸酶的作用下,经过羟化变成多巴,进而氧化成多巴醌,进一步变成黑色素。MC中存在特异性的酪氨酸酶,细胞培养时加入外源性左旋多巴,会在酪氨酸酶的作用下合成较多的色素颗粒使细胞在镜下呈现黑色。

培养细胞的染色实验——Giemsa染色法

实验方法原理Giemsa 染色是最常用的方法之一,它简便、快速,适用于多种细胞和染色体染色。试剂、试剂盒Giemse甘油甲醇Sorensen仪器、耗材滴管玻璃片实验步骤1.  染液制备(1)称Giemse粉0.5 g、甘油22 ml,在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合,研磨至无颗粒;(2)再

培养细胞的染色实验——Feulgen染色法

实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷犍破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要,若温度过低

血细胞染色—吉姆萨染色法

吉姆萨(Giemsa)染色法吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为

超活染色染色法的方法介绍

超活染色又称体外活染。活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。

血细胞化学染色的染色法—铁染色的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色法—铁染色的原理:人体内有一定量的以铁蛋白和含铁血黄素形式贮存的铁元素,这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀(普鲁士蓝),定位于含铁的部位。  (2)血细胞化学染色的染色法—铁染色的操作方法:将染色液滴加在骨髓小粒丰富的骨髓涂片上,室温20~30

细胞生长检测方法:染料染色法测定细胞数

一、结晶紫检测法1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104 ~104 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2 的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递

负染色法的方法介绍

用重金属盐(如磷钨酸钠、醋酸铀等)对铺展在载网上的样品进行染色,使整个载网都铺上一层重金属盐,而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。