RapiGestSF试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(三)

与其他的蛋白酶合用 我们测试了 RapiGest SF 与多种蛋白酶的适配性,如 Asp-N, Lys-C 与 Glu-C 。在酶解前使用 RapiGest SF 变性蛋白获得了有效的消解结果。蛋白去糖基化的用途 RapiGest SF 也用于测试其它酶,如 PNGase F ,该酶用于酶切糖蛋白 N- 连接的糖基。 2 图 6 说明了去糖基化鸡蛋卵清蛋白。在 RapiGest SF 介质中 PNGase F 消解 2 小时后观察到了完全的去糖基化反应。结论 • RapiGest SF 促进了蛋白酶解的速度与完全程度,能够得到蛋白药物序列覆盖率很高的肽图分析。• RapiGest SF 是适用于蛋白组学、糖蛋白与生物制药应用的领域• 几乎无需消解后样品处理,简单样品酸化,足以从溶液中去除 RapiGest SF 。多种情况下 LC/MS 分析前只需简单稀释。• RapiGest S......阅读全文

RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(三)

与其他的蛋白酶合用 我们测试了 RapiGest SF 与多种蛋白酶的适配性,如 Asp-N, Lys-C 与 Glu-C 。在酶解前使用 RapiGest SF 变性蛋白获得了有效的消解结果。蛋白去糖基化的用途 RapiGest SF 也用于测试其它酶,如 PNGase F ,该酶用于酶切糖蛋白

RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(一)

Ying Qing Yu 与 Martin Gilar  / 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司简介 本应用纪要中,我们介绍了沃特世ZL RapiGest™ SF 试剂的物理化学性质及其应用领域。 2002 年,我们首次推出 RapiGest SF ,这一创新产品是帮助酶消解的有利工具,可促进溶液中蛋

RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(二)

胰蛋白酶消解的兼容性 胰蛋白酶是最常见的蛋白水解酶,可用于肽图分析和蛋白组学的应用。我们研究了在添加 RapiGest SF 的情况下胰蛋白酶的活性作用,并与文献中最常见的变性剂的作用做了对比。本检测基于胰蛋白酶诱导 N-α- 苯甲酰 -L- 精氨酸乙基乙酯( BAEE )在 50 mM 重

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF

  在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:   ■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。  

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF

在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中,不

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(一)

在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中,不

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(二)

RapiGest SF虽然是一种表面活性剂,但其全面适应液质分析的要求。在使用RapiGest SF作为变性剂完成蛋白酶切后,如果只进行色谱分析,则可无需对RapiGest SF进行处理。如进行液质联用分析,则通过简单的加酸步骤就可将RapiGest SF去除。而酸性溶液环境又恰恰是液质

ELISA中的三个必要的试剂与完整试剂盒组分

在临床检验中一般选用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:1,酶的底物;2,洗涤液;3,酶反应停止液。4,结合物及标本的稀释液;5,酶符号的抗原或抗体 (结合物);6,已包被抗原或抗体 的固相载体(免疫吸附剂);7,阴性

组织学——试剂和溶液

Fixative Preparation10% Formal Saline Preparation (Nottingham Pathology Lab) 4% Paraformaldehyde Preparation (Nottingham Pathology Lab)  Fixatives (XM

实验室试剂当量溶液的定义

当量溶液(Normal solution)为一升溶液中含有一克当量溶质的水溶液,即指浓度是1N的溶液。 指示剂 指示剂(Indicator)是能由某些物质存在的影响而改变自己颜色的物质。主要用于容量分析中指示滴定的终点。一般可分为酸碱指示剂、氧化还原指示 剂、吸附指示剂等。指示剂除分析外,也可用来检

溶液中锶的测定

  锶只能用火焰法。沾点锶溶液在火焰上燃烧看是否为红色,如果是红色证明是锶离子

蛋白纯化的三种新工具

  蛋白亲和标签是蛋白质组研究中的一个关键性工具,迄今为止人们已经开发出了许多久经考验的蛋白标签系统,例如六聚组氨酸、HA、Myc和FLAG等等。尽管这些标签系统各具特色,但它们也分别存在着一些缺陷,还不能完全满足研究者们的需要。   为此,Biotechniques杂志盘点了近期出现的三种新蛋白

蛋白纯化的三种新工具

  蛋白亲和标签是蛋白质组研究中的一个关键性工具。迄今为止,人们已经开发出了许多久经考验的蛋白标签系统,例如六聚组氨酸、HA、Myc和FLAG等等。尽管这些标签系统各具特色,但它们也分别存在着一些缺陷,还无法完全满足研究者们的需求。   为此,Biotechniques杂志盘点了近期出现的三种新

如何测定溶液中的高分子溶液粒径

从溶液结构和线团间的相互作用来看,可以把高分子溶液分为三个浓度区域:①稀溶液,孤立线团、线团间相互作用可以忽视;②亚浓溶液,高分子线团开始感觉到溶液中邻近线团的存在,即线团间的相互作用开始呈现其重要性,线团相互接触不过是更形象化的直观描述;③浓溶液,溶液中链段的空间密度分布趋于均一后的情况。但是这三

中国油价“三连跌”有利稳增长保民生

  中国国家发展和改革委员会10日宣布,决定自11日零时起将汽、柴油价格每吨分别降低420元和400元。这次降价是继5月10日和6月9日之后中国今年第三次下调国内汽柴油价格,也是2008年12月实施现行成品油定价机制以来国内油价首现“三连跌”。   “三连跌”助力稳增长惠民生   银河证券研究部

融合蛋白酶解实验

实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子/ml 反应缓冲液2 × SDS 样品缓冲液仪器、耗材 沸水浴实验步骤 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl 含有 1 μl 200μg /ml Xa 因子的 1 mg/ml 融合蛋白反应

融合蛋白酶解实验

基本方案 用 Xa 因子             实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白

实验室检验检测工具​试剂条

试剂条是有干化学试剂的纸条,可检测液体标本中的化学成分。

实验室检验检测工具生化试剂

生化试剂(Biochemical reagent)是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用的试剂。生化试剂的介绍由于生命科学面广、发展快,因此该类试剂品种繁多、性质复杂。生化试剂的种类主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物

如何测量SF6六氟化硫中的露点

为了保证SF6气体的绝缘特性,降低SF6气体分解物所产生的酸性副产品物质的形成,须将高压电气设备气室中的水气含量保持在尽可能低的水平。虽然注入的是干燥的SF6气体并做到了高压下的密封,没有外界新气流入,但由于气室内外存在较大差距的水气分压,水分子还是有很强的侵入能力,特别是长期运行后的高压电气设备更

Illumina在英国NIPTZL侵权诉讼中获有利先机

  分析测试百科网讯 2017年11月21日,英国ZL法院高等法院司法审判对Illumina起诉Premaitha对其医生实验室,TDL遗传学和Ariosa诊断的ZL侵权案件表示赞同。  2015年3月,Illumina及其全资子公司Verinata Health针对Premaitha over I

质粒提取三种溶液的作用

为了方便理解,这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液: 溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0; 溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS; 溶液III,3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。 1、溶液I:

实验室检验检测工具​试剂瓶

广口、细口;磨口、无磨口等多种。广口瓶用于盛固体试剂,细口瓶盛液体试剂;棕色瓶用于避光的试剂,磨口塞瓶能防止试剂吸潮和浓度变化。定义:盛装试剂的玻璃瓶或塑料瓶。颜色:有无色、棕色。品种:分为广口瓶、细口瓶。广口瓶用于盛放固体试剂,细口瓶用于盛放液体试剂。瓶口带有磨口滴管的叫滴瓶。试剂瓶不耐热。用于盛

温胰蛋白酶解离组织

            实验方法原理 组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时,每隔半小时收集已分离的细胞,离心后加入含血清的培养基。 实验材料 组织 DBSS

冷胰蛋白酶解离组织

经验交流(0)实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织                                                                  DBSS            

温胰蛋白酶解离组织

实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时,每隔半小时收集已分离的细胞,离心后加入含血清的培养基。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶D-PBSA试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶离心管瓶子磁力搅拌机镊子移液管血球计数仪实验步骤1. 将组织(1~5 g)移入加有新配制的无菌 DBSS (5

冷胰蛋白酶解离组织

实验方法原理 剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料 组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒 生长培养基皮氏平皿仪器、耗材 培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤 1. 将组织(1~5 g,预先称重)移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮

温胰蛋白酶解离组织

方案12.5 温胰蛋白酶解离组织实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时,每隔半小时收集已分离的细胞,离心后加入含血清的培养基。实验材料组织                                                                  DBSS        

冷胰蛋白酶解离组织

            实验方法原理 剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。 实验材料 组织 DBSS

冷胰蛋白酶解离组织

实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤1. 将组织(1~5 g,预先称重)移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮氏培养皿中