正常人胚肺成纤维细胞的培养

实验材料:1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液;4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml;5. 保存液:10%二甲亚砜或10%甘油;6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械;7. 离心管(15ml、50ml)实验方法:1. 取水囊引产的妊娠3—6个月的胎儿。用75%乙醇消毒胸壁。剖胸取出两肺。剪去肺内较大的支气管后,将肺边缘组织置于平皿中,用PBS液清洗3次,除去血液。选择苍白色的肺组织,剪成1mm3左右的碎块。再用PBS液洗2—3次,直至液体澄清为止;2. 将肺组织块移入三角瓶中......阅读全文

病毒的鸡胚培养_卵黄囊接种

实验方法原理卵黄囊接种法主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖。这些大的病原体主要在卵黄囊的内皮细胞生长,且生长速度很快,立克次体在染色后也可看到。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等实验步骤1. 接种步骤与方法(1

鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF1)及操作规程

  鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1)   细胞介绍   该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增

鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF1)及操作规程

细胞介绍该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖,说明这些细胞是永生化而没有转化。该细胞可作为病毒增殖、重

成纤维细胞的培养方法有哪些

  分离培养  成纤维细胞的分离培养一开始并不涉及成骨作用,而主要是用于研究细胞的老化、各种外来因子对细胞的损伤、细胞在体外条件下的恶性转化、以及某些先天性代谢异常、酶缺陷等。由于皮肤成纤维细胞易于获取,又易于在体外生长,皮肤成纤维细胞培养已在基础医学和临床医学研究中得到较广泛的运用,其分离培养技术

正常人骨间充质干细胞的培养

实验材料:1. 骨髓来源:骨髓材料由健康人提供;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 分离液:密度为1.073g/ml的Percoll溶液;4. DMEM-LG培养液:含1000mg/L葡萄糖的DMEM培养液,补充1

正常人甲状腺细胞的原代培养方法

实验材料:1.      甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料;2.      不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.      培养用液:DMEM培养液

正常人甲状腺细胞的原代培养方法

实验材料: 1. 甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:DME

衣原体培养基-鸡胚培养基的配制

[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有

胚性愈伤组织培养的概念

中文名称胚性愈伤组织培养英文名称embryogenic callus culture定  义将母体植株上的一部分切下,形成外植体,接种到无菌的培养液上进行胚性愈伤组织的诱导、生长和发育的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

病毒的鸡胚培养_尿囊腔接种

实验方法原理尿囊腔接种法广泛应用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养,这些病毒被注射到尿囊腔后,可在内皮细胞中复制,复制的病毒被释放到尿囊液中,因此,在尿囊液中含有大量的病毒。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开

原代胚胎成纤维细胞培养

实验方法原理细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体内取出,在人工条件下培养,使细胞生存、生长、繁殖和传代,从而可以进行细胞生命过程、细胞癌变等问题的研究。由体内直接取出组织或细胞进行细胞培养叫做原代细胞培养,也有的把第1代细胞与传10代以内的细胞培养统称为原代细胞培养。一般来说,用幼嫩状态的组织

原代胚胎成纤维细胞培养

实验器材手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。实验试剂无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM

原代胚胎成纤维细胞培养

原代胚胎成纤维细胞培养             实验方法原理 细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体内取出,在人工条件下培养,使细胞生存、生长、繁殖和传代,从而可以进行细胞生命过

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

实验材料: 1.人胎盘; 2.A/GA:含抗生素的A(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml); 3.丙三醇; 4.含50%丙三醇的DMEM; 5.胰蛋白酶/EDTA; 6.Millicell微孔膜组织培养插片;

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

PriCells: 正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养实验材料:1. 人胎盘;2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml);3. 丙三醇;4. 含50%丙三醇的DMEM;5. 胰蛋白酶/EDT

人胚肺二倍体细胞操作步骤

人胚肺二倍体细胞 英文名称:CCC-HPF-1 细胞 Cell定义:能进行独立繁殖的有膜包围的生物体的基本结构和功能单位。一般由质膜、 细胞 质和核(或拟核)构成,是生命活动的基本单位。人胚肺二倍体细胞操作步骤:1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超

关于成纤维细胞的分离培养的介绍

  成纤维细胞的分离培养一开始并不涉及成骨作用,而主要是用于研究细胞的老化、各种外来因子对细胞的损伤、细胞在体外条件下的恶性转化、以及某些先天性代谢异常、酶缺陷等。由于皮肤成纤维细胞易于获取,又易于在体外生长,皮肤成纤维细胞培养已在基础医学和临床医学研究中得到较广泛的运用,其分离培养技术已相对成熟,

小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养

实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液 主要设备35 mm培养皿、60 mm培养皿、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养

成纤维细胞的原代培养相关介绍

  成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法,其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常,以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5~10min即可见细胞以伪足初期附着,与 底物形成一些接触点;然后细胞逐渐呈放射状伸展,胞体的中心部分亦随之变扁平;最快者大约在接种后30min,细胞

病毒的鸡胚培养_绒毛尿囊膜接种

实验方法原理绒毛尿囊膜接种常用于牛痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒的分离,因为这些病毒在绒毛尿囊膜上可形成肉眼可见的斑点状或痘疱状病灶。另外,病毒可在绒毛尿囊膜上进行滴定,因为感染性病毒颗粒的数目可以通过产生的斑和痘的数目来计算。该方法还可用于抗病毒血清的滴定试验,即在有抗体存在的情况下,痘疱形成受到

大鼠淋巴成纤维细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL大鼠淋巴成纤维细胞。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入

正常人骨膜内成骨细胞原代培养

正常人骨膜内成骨细胞原代培养实验材料:1. 骨组织来源:手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PriCells -  正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × P

正常人骨膜内成骨细胞原代培养

实验材料:骨组织来源:手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培养液时加入15%的小牛血清,并用

人衰老成纤维细胞经紫外线损伤后的DNA-修复和...(一)

人衰老成纤维细胞经紫外线损伤后的DNA 修复和细胞周期调控摘要 以体外培养的不同代龄的人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS) 为对象, 紫外线诱导DNA 损伤后, 观察细胞形态、增殖特性、细胞周期、DNA修复变化等细胞应答以及gadd153、p21、p53 等基因的转录水平的表达变化. 结果显示:

巨细胞病毒行肺炎的实验室检查

  周围血白细胞减少。以呼吸道分泌物、唾液、尿液、子宫颈分泌物、肝、肺活检标本接种至人胚成成纤维细胞培养基中可分离到巨细胞病毒。呼吸道分泌物和纤维支气管镜肺组织活检标本内发现嗜酸性核内包涵体巨细胞,即能确诊。测定血清的巨细胞病毒抗体,双份血清抗体呈4倍或以上增长时,有助于诊断。

简单概述真皮成纤维细胞的制备培养步骤

 真皮成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。细胞来源于皮肤组织,是一种贴壁培养方式的细胞,由于这些细胞非常容易培养,它们已经被广泛用于细胞和分子生物学研究中。    成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质

巨细胞病毒行肺炎的诊断及检查

  诊断:由于病毒性肺炎在临床表现上具有一定的相似性,因而病原学检查尤为重要。CMV的病原学检查可通过以下几方面进行:①检测CMV包涵体细胞和病毒颗粒:如从患者血、尿、和支气管灌洗液中分离,但存在较高的假阳性,71%~91%的高危移植患者从BAL中虽分离到CMV,但无活动性肺炎证据。也可以将患者各种

鸭源性核酸PCR荧光探针试剂盒各类组织的取材

(一)鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒血液细胞的取材 血液及淋巴组织中的血细胞、淋巴细胞的取材,一般多抽取静脉外周血,或从淋巴组织中(如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等)分离细胞,取材时应注意抗凝,通常采用肝素抗凝,常用肝素浓度为8~10u/mL血,抽血的针筒也要用肝素湿润,若从血站取来的献血员的血液,因

巨细胞病毒行肺炎的诊断检查及鉴别诊断

  诊断检查  诊断:由于病毒性肺炎在临床表现上具有一定的相似性,因而病原学检查尤为重要。CMV的病原学检查可通过以下几方面进行:①检测CMV包涵体细胞和病毒颗粒:如从患者血、尿、和支气管灌洗液中分离,但存在较高的假阳性,71%~91%的高危移植患者从BAL中虽分离到CMV,但无活动性肺炎证据。也可