正常人胚肺成纤维细胞的培养
实验材料:1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液;4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml;5. 保存液:10%二甲亚砜或10%甘油;6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械;7. 离心管(15ml、50ml)实验方法:1. 取水囊引产的妊娠3—6个月的胎儿。用75%乙醇消毒胸壁。剖胸取出两肺。剪去肺内较大的支气管后,将肺边缘组织置于平皿中,用PBS液清洗3次,除去血液。选择苍白色的肺组织,剪成1mm3左右的碎块。再用PBS液洗2—3次,直至液体澄清为止;2. 将肺组织块移入三角瓶中......阅读全文
正常人胚肺成纤维细胞的培养
实验材料:1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液;4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎
正常人包皮成纤维细胞的培养
正常人包皮成纤维细胞的培养实验材料:1. 细胞来源:新生儿包皮;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液:两者比例为1:1,用D-Hanks液配制;4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂:用DM
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
实验材料 母鼠试剂、试剂盒 PBS胰蛋白酶溶液DNase 溶液仪器、耗材 无菌解剖器械不锈钢滤网烧瓶培养箱实验步骤 1. 准备下列试剂和材料:确定怀孕期的母鼠(孕期14至6天)无菌解剖器械(镊子、剪刀、手术刀片)Cellector 带收集装置的不锈钢滤网,1 mm 直径筛网内有搅拌棒的 125 ml
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验
实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 Wistar乳鼠试剂、试剂盒 PBS牛血清青霉素链霉素EDTA胰酶碘酒酒精仪器、耗材 绵球科直剪眼科弯剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿塑料
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、
正常人肺微血管内皮细胞培养
实验材料:1. 手术切除的正常肺组织2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA3. 6孔培养板:用多聚赖氨酸包被4. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS(pH=7.4),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.45.
鸡胚成纤维细胞制备实验
实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料 9 日龄鸡胚试剂、试剂盒 70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材 无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布 So
鸡胚成纤维细胞制备实验
实验方法原理用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料9 日龄鸡胚试剂、试剂盒70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布Sorvall
鸡胚成纤维细胞制备实验
实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料 9 日龄鸡胚试剂、试剂盒 70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材 无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布 So
鸡胚成纤维细胞制备实验
基本方案 实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。 实验材料 9
鸡胚成纤维细胞制备实验
基本方案 实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。 实验材料 9
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化_MEF滋养板的制备
实验材料丝裂霉素 C试剂、试剂盒胰酶溶液PBS明胶溶液仪器、耗材MEF 生长培养基组织培养皿实验步骤1. 准备下列材料MEF 生长培养基胰酶溶液无 Ca2+ 和 Mg2+ PBS丝裂霉素 C明胶溶液(0.1%)150 mm 组织培养皿滋养细胞组织培养皿2. 准备一支 15 ml 离心管,加 5 ml
病毒的鸡胚培养
目的意义:了解禽源病毒鸡胚培养的意义及用途掌握病毒鸡胚培养的基本方法基本原理:鸡胚培养是培养某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分离、增殖、毒力滴定、中和试验及生产疫苗等。病毒接种鸡胚的途径有多种,主要有卵黄囊接种、绒毛尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、羊膜腔接种途径等,应根据需要选择适当的途径。器材
病毒的鸡胚培养
实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大量病毒。因此,在用羊膜腔接种分离病毒时,除可收获羊水以外,还可收获尿囊液。实验材料 鸡胚试剂、试剂
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验——胰酶消化法
大鼠肺成纤维细胞培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料Wistar乳鼠试剂、试剂盒PBS牛血
成熟胚培养的技术特点
中文名称成熟胚培养英文名称culture of mature embryo定 义将子叶期以后的胚从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
幼胚培养的技术特点
中文名称幼胚培养英文名称culture of larva embryo定 义将子叶期以前的具胚结构的幼小胚从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
胚状体培养的概念
中文名称胚状体培养英文名称embryoid culture定 义从外植体上直接或间接诱导出胚状体的培养技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
病毒的培养方法实验——鸡胚培养法
病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病毒(
正常人脐静脉内皮细胞的培养
正常人脐静脉内皮细胞的培养 实验材料: 1. 婴儿脐带; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:
正常人关节软骨细胞的长期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用液配制;4. 消化液Ⅱ:0.5mg/ml胶原酶
正常人脐静脉内皮细胞的培养
实验材料:1. 婴儿脐带;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和1
正常人关节软骨细胞的长期培养
实验材料:1. 软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用PBS液配制;4. 消化
用活鸡胚培养病毒的原理
物病毒(见脊椎物病毒)培养自宿主、实验物、鸡胚或细胞培养进行死亡、发病或病变等作病毒繁殖直接指标或血细胞凝集、抗原测定等作间接指标收获发病物组织磨悬液或病变细胞培养液即粗制病毒测定病毒数量采用空斑其原理与噬斑相同易物单层细胞代替细菌接种适稀释病毒用含培养液性红琼脂覆盖使病毒染局限面积内形病变区衬底健
病毒的鸡胚培养_羊膜腔接种
病毒的鸡胚培养可用于:(1)某些病毒分离、增殖;(2)病毒的毒力测定、中和试验;(3)生产疫苗等。实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大