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6. 取出封闭2h的ELISPOT板，吸弃每孔中的封闭液。(不要洗板！) 7. 在ELISPOT板中，先加30μl 无血清培养基(12道排枪)和20μl肽库(8道排枪)，后加50μl细胞(8道排枪) (每孔活细胞总数为2×105，每个病人需活细胞总数为10×106，体积为2.5 ml。每条多肽的终浓度为5μg/ml，活细胞的工作浓度为4×106/ml，活细胞的终浓度为2×106/ml）。 阳性孔中每孔加入50μl 细胞和30μl无血清培养基和20μl PMA+Inomysin（工作液浓度分别为250ng/ml和5ug/ml，终浓度分别为50ng/ml和1ug/ml）。&n......阅读全文
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中，细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段，同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是，由于细胞因子
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中，细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段，同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是，由于细胞因子
ELISPOT技术原理 在免疫学领域中，对于疾病以及疫苗研究不仅仅局限于体液免疫应答（B细胞免疫），细胞介导的免疫应答(cell mediated immune response，CMI)也是人们所关注的，而T细胞在CMI中起关键作用。在研究免疫应答机制时以
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用，使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法（ELISA）检测体液中游离的细胞因子（CK）或抗体，但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切的反映体内的抗体及