反相液相色谱柱不是LCMS/MS分析的主流
对于LC-MS/MS色谱柱人们的惯性思维通常是由反相液相色谱柱开始研发, 产生这种惯性思维是因为常规高效液相色谱分析中C18等反相高效液相色谱柱占有统治地位,另一方面是色谱公司不懂LC-MS/MS分析误导用户的结果。这惯性思维是不正确的!LC-MS/MS分析的实用战略和HPLC有很大不同! LC-MS/MS分析的方法的选择性最重要!色谱公司不能简单地将现成的反相液相色谱填料装成5cm x 2.1mm短柱充当LC-MS/MS柱使用, 但事实上几乎所有色谱公司都是这样做的。这样的反相液相色谱LC-MS/MS柱有三个明显的弱点:(1) 许多极性化合物难以保留,质谱灵敏度差。许多重要的物质,如抗癌药物DTIC, 抗痛药物河豚毒素,污染物质三聚氰胺, 中草药中糖肽等非常极性, 在反相液相色谱柱上没有保留。还有许多的化合物比较极性, 使用少量的甲醇或乙腈就从反相液相色谱柱上洗脱。在药物代谢研究中, 观察到许多化合物自己疏水, 但代谢......阅读全文
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
反相液相色谱柱原理及运用维护
反相液相色谱柱是根据溶质、极性活动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱形式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是运用面较广的一种别离形式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,活动相多选用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水互溶
反相液相色谱柱应当怎样维护和使用
反相液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水互溶
c8反相液相色谱柱的平衡
c8反相液相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,就会在处理问题方面获得zui大的"补偿",而且c8反相液相色谱柱的寿命也会变得更长! c8反相液相色谱柱
反相液相色谱柱开启和安装的步骤
反相液相色谱柱开启和安装的推荐步骤:反相液相色谱柱使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。取用色谱柱时避免磕碰掉落。将色谱柱入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至
高效反相液相色谱
实验方法原理 反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛(HPLC级)去离子水(HPLC级) 三氟乙酸(TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析(即在步骤①中不加样)。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。(1)线性梯
高效反相液相色谱
反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液
反相高效液相色谱
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合
高效反相液相色谱
实验方法原理反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反
何谓反相液相色谱
液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留,所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反,反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。正相色谱的流出顺序是极性
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
如何区分正相色谱柱和反相色谱柱
本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明:1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。 由于硅胶
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装 1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 2、为了使色谱柱与仪器系统
通用型反相液相色谱柱结构和特点
通用型反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,被广泛用于多个领域中。在通用型反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化
解析通用型反相液相色谱柱的再生
关于通用型反相液相色谱柱的再生: 色谱柱污染后把筛板卸下来超声清洗 对于色谱柱的污染,首当其冲的就是筛板,因此常用的做法就是把柱头卸下来,把筛板拿去超声清洗。但是我们在拆卸过程中对色谱柱前端填料的损害远远大于污染照成的伤害,因为我们不是专业的。因此建议这一步能不做就不做。 自己
反相高效液相色谱柱使用维护注意事项
作为基于极性流动相和非极性固定相所组成的液相色谱体系,反相高效液相色谱柱是通过表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,根据一般有机分子的结构中具有非极性的疏水部分,同时疏水部分越大,一般保留值越高的性质,反相高效液相色谱柱进行相应的工作。 为尽可能减少日常中不正确色谱操作对反向液相色谱柱的损
反相高效液相色谱柱的原理及使用维护
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能
c8反相液相色谱柱的安装步骤
使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。取用c8反相液相色谱柱时避免磕碰掉落。将c8反相液相色谱柱入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。在0.1 mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至0.5 mL/min。当
通用型反相液相色谱柱结构和特点
通用型反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,被广泛用于多个领域中。在通用型反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶,采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高,覆盖完全,对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高,寿命长,是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了色谱柱的寿命,保证分析结果的重现性。随着使用时间
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶,采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高,覆盖完全,对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高,寿命长,是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了色谱柱的寿命,保证分析结果的重现性。随着使用时间的增
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶,采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高,覆盖完全,对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高,寿命长,是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了色谱柱的寿命,保证分析结果的重现性。随着使用时间的增
反相液相色谱柱是一种怎样的色谱模式
反相液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水