实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用

实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用彭年才12 张镇西1 兰邹然3 黄兵3 李红东2 李明2 苗保刚2 1西安交通大学生物医学分析技术与仪器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山东省动物疾病预防与控制中心2009年4月30日摘要:病原检测方法及仪器是人感染猪流感防控的关键环节,针对实时荧光定量PCR分子诊断核酸检测技术的先进性以及国产试剂和仪器的成熟性,本文分析了该技术在以往禽流感检测被采用的国家标准以及使用的广泛性,最后介绍了最新发布的美国CDC《针对人感染猪流感病毒治疗和预防的临时指南》和我国卫生部《人感染猪流感预防控制技术指南(试行)》,两部法规都将实时荧光定量PCR确定为人感染猪流感实验室检测的确诊方法。从以上情况可以获知:实时荧光定量PCR技术在人感染猪流感诊断中具有先进、快速、成熟、合法的特点,是一种法定的主流技术,将来实施中,......阅读全文

实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用

实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用彭年才12  张镇西1  兰邹然3  黄兵3  李红东2  李明2   苗保刚2 1西安交通大学生物医学分析技术与仪器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山东省动物疾病预防与控制中心2009年4月30日摘要:病原检测方法及仪器是人感染猪流感防控的关键环节,针

实时荧光定量PCR在医学领域的作用

  新的愈后指标的研究  对于感染性疾病,在药物作用至一定程度后,就认为可以停药了,但是应该在什么停药,现在大都没有一个明确的指标,现在所用的指标由于受到检测方法的灵敏度及准确性限制,这一指标未必合理,因此有必要对治愈的指标以及指标与复发率以及疾病转化为其他疾病之间的关系等进行进一步的研究,从而为药

实时荧光定量PCR仪【实时荧光定量PCR仪】

  【FT-PCR】实时荧光定量PCR仪【实时荧光定量PCR仪】_风途厂家_Kgaoletšo ya dikarolo tše bopago seswantšho tša kgole ya PCR  具体来讲扑杀无害化处理染疫动物,禁止泔水饲喂生猪,加强生猪养殖运输屠宰等各个环节的清洗和消毒,包括养

实时荧光定量PCR

  实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:  1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,

实时荧光定量-PCR

实时荧光定量 PCR 是一种可以实时检测核酸扩增的技术,在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化对 PCR 过程进行实时监控,以此实现对初始模板的定量分析。常用标记方法主要有两种,一是非特异性荧光标记:SYBR Green I;二是特异性荧光标记:Taqman 探针法。    实时荧光

实时荧光定量-PCR

    实时荧光定量 PCR ,简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种,目前该技术已得到广泛应用,如:扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。    SYBR Green I 是一种结

实时荧光定量PCR

Real Time PCR实时荧光定量PCR   其定量的基本原理是在 PCR 反应体系中加入非特异性的荧光染料(如: SYBR GREEN I )或特异性的荧光探针(如: Taqman 探针),实时检测荧光量的变化,获得不同样品达到一定的荧光信号(阈值)时所需的循环次数: CT 值( Cycle

实时荧光定量-PCR

Thomas D. SchmittgenDepartment of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy,Washington State University, Pullman, WA 99164.      对于从 90 年代初就开始接触定

实时荧光定量PCR

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在许多

实时荧光定量PCR仪在药物研究中的应用

  新药开发研究,人用药物及其他药物  针对一些感染性疾病的药物,如各种病毒病、细菌病等,在新药的开发过程中,快速了解药物对疾病进程的影响可以为新药开发节约大量的人力、时间和资金,与以前所用的Elisa等方法相比,实时荧光定量PCR技术可以快速、准确、定量、灵敏地测定血液或组织中病原体的含量,因此有

实时荧定量PCR仪在医学诊断中的应用

基因扩增仪俗称PCR仪,是进行基因研究过程中必不可少的一种仪器。正是因为其特殊的工作原理,在很多的方面都有一定的应用。只要我们能想想到的与基因有关的研究都用得到PCR仪,因为有些时候我们收集到的样品是很少的,如果不通过基因扩增手段根本满足不了实验的要求。    基因扩增仪又叫PCR仪或者热梯度循环仪

实时荧定量PCR仪在医学诊断中的应用

     基因扩增仪俗称PCR仪,是进行基因研究过程中必不可少的一种仪器。正是因为其特殊的工作原理,在很多的方面都有一定的应用。只要我们能想想到的与基因有关的研究都用得到PCR仪,因为有些时候我们收集到的样品是很少的,如果不通过基因扩增手段根本满足不了实验的要求。    基因扩增仪又叫PCR仪或者热

实时荧光定量PCR(realtime-PCR)

            实验方法原理 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 实验材料

实时荧光定量PCR(realtime-PCR)

实验步骤一、 样品RNA的抽提 1.  取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。2.  两相分离 每1 ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12 000 rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的

实时荧光定量PCR(realtime-PCR)

实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 RNA提取试剂盒荧光定量PCR MixTRIZOLdNTP氯仿逆转录酶MMLV异丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2琼脂糖溴化乙锭MOPS甲醛乙酸钠EDTAEB溴酚兰仪器、耗材 离心管离心机风光光度计电泳槽凝胶板Realtime PCR仪实验步骤 一、 样品

实时荧光定量pcr仪在优生优育中的应用

  近年来经济发展迅猛,人民生活水平逐年提高,对自身及家人特别是下一代的身体健康愈来愈重视。另外,由于国内计划生育工作逐步走向深化,独生子女比较多,孩子的身体素质更成为长辈们关注的焦点。因此,怎样提高新生儿质量改善人类遗传素质,即优生优育已显得非常重要。①避免有严重遗传性疾病和先天性疾病的个体出生。

实时荧光定量PCR技术

通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析1 导言小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子,这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说,miRN

实时荧光定量-PCR-原理

实时荧光定量 PCR 技术,是指在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量的方法。实时定量 PCR 技术是在常规 PCR 基础上,添加了一条标记了两个荧光基团的探针。一个标记在探针的5'端,称为荧光报告基团(R);另一个

实时荧光定量PCR简介

荧光定量PCR检测技术从诞生到现在已经有 8 年了,但是其应用在近四年才迅猛增长。在 Medline 数据庫中,用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索,在1996 年仅有 19 篇,在 1997 年仅有 28 篇,在 98 、 99 、2000 年分别达到了

实时荧光定量PCR仪

  在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机

实时荧光定量PCR原理

所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法. 1.在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念—— Ct值.C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到

实时荧光定量PCR仪

在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析

实时荧光定量pcr中的绝对定量怎么做

在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。我们实验室用BIOG-PCR技术测得的扩增曲线起跳值一般在30左右,每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就

实时荧光定量pcr中的绝对定量怎么做

在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。我们实验室用BIOG-PCR技术测得的扩增曲线起跳值一般在30左右,每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就

实时荧光定量pcr中的绝对定量怎么做

在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。我们实验室用BIOG-PCR技术测得的扩增曲线起跳值一般在30左右,每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就

实时荧光定量PCR的原理

5.PCR预实验,主要检测引物的特异性和扩增效率;6.正式定量实验:对所有样品上机检测;7.实验结果和数据分析,形成报告。收费标准优惠包干价:120元/样/基因(SYBRgreenI法,相对定量)(含RNA提取,反转录,引物合成费用,上机测试费用(3个重复);一个内参免费(内参3个重复) Ct值(C

实时荧光定量PCR的原理

所谓实时荧光定量PCR技术 ,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链

实时荧光定量PCR的原理

所谓实时荧光定量PCR技术 ,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链

实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用

 实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR,如果用于RNA检测,这被称为逆转录实时PCR即Real-time RT-PCR)是实时PCR法,它是指对DNA或经过反转入(RT-PCR)的RNA

实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用

实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR,如果用于RNA检测,这被称为逆转录实时PCR即Real-time RT-PCR)是实时PCR法,它是指对DNA或经过反转入(RT-PCR