10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-freeRNase)配制方法

溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)......阅读全文

10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free-RNase)配制方法

溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)

实验常用试剂的制备与储藏(一)

一.常用贮液与溶液  1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。  1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。  10mol/L乙酸胺(amm

溴化乙锭(10mg/ml)的配制

在100ml水中加入1g 溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA)配制方法

加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

常用贮液与溶液(一)

1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):

PURELAB-flex(配生物过滤器)可以清除内毒素、RNase、DNase和...

PURELAB flex(配生物过滤器)可以清除内毒素、RNase、DNase和细菌 内毒素内毒素是革兰氏阴性活菌外膜脱落的脂多糖。 细菌细胞死亡时释放出内毒素。内毒素与细胞相互作用,造成多种不利影响(参考文献1Dawson和参考文献2 Nagano)。 内毒素对试管内受精(参考文献3 Dumoul

卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)的配制

溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

怎样提取微生物的质粒(DNA)

碱提法:一、试剂准备1.溶液Ⅰ:50mM葡萄糖,25mM Tris-HCl(pH 8.0),10mM EDTA(pH 8.0).1M Tris-HCl(pH 8.0)12.5ml,0.5M EDTA(pH 8.0)10ml,葡萄糖4.730g,加ddH2O至500ml.在10 lbf/in2高压灭菌

10mg/mlBSA(小牛血清白蛋白)溶液的配制

秤取100mg小牛血清白蛋白溶于10ml灭菌重蒸水中。置4℃冰箱贮存备用。

四环素(tetracyyline)(10mg/ml)的配制

溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

分子生物学实验常用试剂配置

常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium ac

常见实验用溶液的配制方法(一)

  一.常用贮液与溶液   1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。   1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。   10m

分子生物学实验常用试剂配置

一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammo

分子生物学实验常用试剂配置

一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammon

RNase-A/Tl保护和-RNase-H-聚焦法实验——RNase-H-聚焦法

实验方法原理RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单链专一的 RNase 具有抗性。此法可以对 RNA 分子末端进行定位或对含内含子的交界定位。与 Northern blot 相比,它是一种十分有效而且灵敏度很高的并可用于测定 mRNA 丰度的方法

RNase-A/Tl保护和-RNase-H-聚焦法实验——RNase保护法

基因分子鉴定的一个重要方面就是其 RNA 转录物 5' 和 3' 端的精确作图。首先被 Maniatis 研究组使用的 RNase 保护测定法就是基于这个目的发展起来的。由于杂交是在溶液中实现的,因此也称为溶液杂交。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理RNA与

RNase-A/Tl保护和-RNase-H-聚焦法实验

RNase保护法 RNase H 聚焦法             实验方法原理 RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单

RNase-A/Tl保护和-RNase-H-聚焦法实验

实验方法原理 RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单链专一的 RNase 具有抗性。此法可以对 RNA 分子末端进行定位或对含内含子的交界定位。与 Northern blot 相比,它是一种十分有效而且灵敏度很高的并可用于测定 mRNA

质粒DNA的碱裂解法提取与纯化

  细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上,随着染色体的复制而复制,并通过细胞分裂传递到后代。    质粒已

RNase-inhibitors-and-RNases

Question  1.What are the differences among RNase H, RNase A, RNase B and RNase C?2.In your cDNA kits, RNase H is added in the second strand reaction t

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DescriptionThis protocol is for use with the D cyclins and employs 488 nm argon laser excitation of propidium iodide and 630 nm NeNe or diode laser ex

无Ca2+-、Mg2+Hanks液的配制方法

无Ca2+ 、Mg2+Hanks液              NaCl                              4.5g              KCl                               0.2g             NaHCO3          

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Grow 10ml YPD cultures o/n. Figure out cell density; inoculate 30 ml YPD and grow o/n so that cell density is approximately 2 x 108cells/ml the next m

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实验概要Plasmid DNA is isolated from small-scale (1-2 ml) bacterial cultures by treatment with alkali and SDS.主要试剂Buffers and Solutions:    Alkaline lysis

RNA酶保护试验((RNase-Protection-Assay,RPA)方法

一、试剂准备1. GACU POOL:取100mM ATP、CTP、GTP各2.78μl、100mM UTP 0.06μl,加DEPC H2O至100μl。2. 杂交缓冲液IPES 0.134g、0.5M EDTA(pH8.0)20μl、5M NaCl 0.8ml、甲酰胺8ml,加DEPC H2O至

RNAse-A-Treatment-of-Mouse-Cells

IntroductionRNAse A treatment of permeabilized cells followed by immunostaining is a method which allows to show if the localization of a protein into

DNAse-posttreatment-for-nuclear-antigens

Rationale: The use of DNAse to improve nuclear antigen staining has been published long before the AR era 1, 2.DNAse treatment is currently suggested

NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸实验

            实验方法原理 常规的质粒 DNA 制备物中都会不同程度地污染有来自宿主菌基因组或质粒断裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。尽管它们的分子质量不大,但数量多,会对制备物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的总量产生明显影响。

NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸实

实验方法原理 常规的质粒 DNA 制备物中都会不同程度地污染有来自宿主菌基因组或质粒断裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。尽管它们的分子质量不大,但数量多,会对制备物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的总量产生明显影响。试剂、试剂盒 乙醇NaCl乙酸钠TE胰 RNase仪器、耗材 

干货!小鼠肝组织dna的提取详细步骤

  实验原理  DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。在匀浆后提取 DNA 的反应体系中, SDS 可破坏细咆膜、核膜,并使组织蛋白与 DNA 分子分离, EDTA 抑制细胞中 DNase 活性,